王喆 穆曉男 姚雪靜

Nectin-4為腫瘤相關(guān)抗原，在乳腺癌和卵巢癌中均有表達(dá)，而在相應(yīng)的正常組織中不表達(dá)[1]。Nectin-4細(xì)胞黏附分子和ErbB2酪氨酸激酶受體在許多癌癥中均被上調(diào)，能夠促進(jìn)癌細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移。因此，Nectin-4對(duì)腫瘤的臨床檢測(cè)及治療具有非常重要的意義。

1 Nectin-4在乳腺癌中的表達(dá)及其臨床意義

乳腺癌是一種復(fù)雜且異質(zhì)性的分子水平疾病。Nectin-4在正常乳腺上皮細(xì)胞中不表達(dá)，但在乳腺起源的腫瘤中高表達(dá)，其表達(dá)譜與乳腺腫瘤基礎(chǔ)亞型標(biāo)記的表達(dá)相關(guān)。Nectin-4是一種新的、靈敏的乳腺癌組織學(xué)和血清學(xué)標(biāo)記物，可用于轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者的檢測(cè)[2]。

三陰性乳腺癌（triple-negative breast cancer，TNBC）與其他分子亞型相比無特異性靶點(diǎn)。有研究表明，可通過檢測(cè)TNBC患者血清中Nectin-4的表達(dá)水平來診斷和治療，以提高患者的生存率[3-4]。

2 Nectin-4在卵巢癌中的表達(dá)其臨床意義

因缺乏可用的特異性和敏感性測(cè)試，卵巢癌在早期難以發(fā)現(xiàn)。與正常卵巢細(xì)胞系和組織相比，通過使用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）和定量RT-PCR技術(shù)，可以檢測(cè)到Nectin-4信使RNA在卵巢癌中過表達(dá)。組織芯片免疫組織化學(xué)染色顯示，卵巢癌細(xì)胞系和組織中Nectin-4的蛋白表達(dá)顯著高于正常卵巢細(xì)胞系[5]。Nectin-4在卵巢癌患者的mRNA和蛋白水平過度表達(dá)，在健康人群中很少過度表達(dá)，這表明其可能被用作卵巢癌的血清生物標(biāo)志物[6]。在血清癌胚抗原125（cancer antigen 125，CA125）程度較高的良性婦科疾病患者中，大多數(shù)情況下也檢測(cè)不到Nectin-4，這表明Nectin-4有助于在CA125檢測(cè)組中將良性婦科疾病與卵巢癌進(jìn)行有效的區(qū)分。另外，Nectin-4還可以作為醫(yī)治高級(jí)別漿液性卵巢癌特定亞型的綜合多功效靶點(diǎn)。

3 Nectin-4在胃癌中的表達(dá)及其臨床意義

胃癌（gastric cancer，GC）治療方案包括手術(shù)、化療、放療和分子靶向治療。類似于卵巢癌的檢測(cè)定量RT-PCR和組織微陣列免疫組化技術(shù)可用于研究Nectin-4在GC中的表達(dá)及其在GC患者預(yù)后中的作用[7]。相關(guān)研究結(jié)果顯示，與相應(yīng)的非腫瘤組織相比，GC腫瘤組織中Nectin-4的mRNA和蛋白表達(dá)增加并且GC患者Nectin-4陽性表達(dá)程度與患者的總生存期有關(guān)[8]。這些結(jié)果表明Nectin-4在GC的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用，可能成為GC中一個(gè)新的臨床病理生物標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)[8-9]。

4 Nectin-4在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)及其臨床意義

肝細(xì)胞癌（hepatocellular carcioma，HCC）患者的治療通常是手術(shù)切除病灶和肝移植，但大多數(shù)患者由于診斷較晚而無法手術(shù)。研究人員檢測(cè)了87例HCC患者Nectin-4的表達(dá)水平，結(jié)果顯示，HCC患者腫瘤組織中Nectin-4 mRNA和蛋白的表達(dá)水平遠(yuǎn)高于相應(yīng)的非腫瘤組織，在腫瘤細(xì)胞胞漿中，67.82%（59/87）的HCC患者存在Nectin-4過表達(dá)[10]。在多變量分析中，Nectin-4是HCC患者無復(fù)發(fā)生存期（relapse-free survival，RFS）和總生存期（overall survival，OS）的獨(dú)立預(yù)后因素[10]。

5 Nectin-4在胰腺癌中的表達(dá)及其臨床意義

胰腺癌具有很高的侵襲性且患者的預(yù)后很差。在人類胰腺癌中，Nectin-4誘導(dǎo)腫瘤增殖、血管生成和不良預(yù)后[11-13]。在人胰腺癌細(xì)胞中Nectin-4通過Rac1信號(hào)通路參與腫瘤細(xì)胞的增殖和生長(zhǎng)[14]。Nectin-4已經(jīng)成為胰腺癌重要的預(yù)后指標(biāo)及新型治療靶標(biāo)[15]。

6 以Nectin-4為靶點(diǎn)的抗腫瘤藥物研究

目前以Nectin-4為靶點(diǎn)的最成功的抗腫瘤藥物是Enfortumabvedotin（以下簡(jiǎn)稱EV），商品名為Padcev。EV是由Astellas和Seattle Genetics公司共同開發(fā)的一種新型抗體-藥物偶聯(lián)物（antibody-drug conjugate，ADC），其是將抗Nectin的抗體與高效微管抑制劑MMAE通過可切割的二肽連接物VC偶聯(lián)而形成，2019年12月獲FDA批準(zhǔn)用于尿路上皮癌的治療[16]。當(dāng)EV與腫瘤細(xì)胞表面的Nectin-4結(jié)合后，經(jīng)腫瘤細(xì)胞的內(nèi)吞作用，進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi)部，二肽連接子VC被細(xì)胞內(nèi)的蛋白水解酶裂解，釋放出毒素MMAE，達(dá)到定向殺死腫瘤的目的。多個(gè)體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)，EV能夠以高親和力結(jié)合細(xì)胞表面表達(dá)的Nectin-4，并在一定劑量下體外誘導(dǎo)細(xì)胞死亡[17]。臨床前研究表明，EV能夠與大鼠和猴子的Nectin-4特異性結(jié)合，并抑制幾種表達(dá)Nectin-4的異種移植瘤的生長(zhǎng)，包括人乳腺癌、尿路上皮癌、胰腺癌和肺癌的小鼠異種移植瘤，并導(dǎo)致乳腺癌和尿路上皮癌異種移植的腫瘤消退[16]?？傮w而言，這些發(fā)現(xiàn)證實(shí)了Nectin-4是多種實(shí)體瘤的有效治療靶點(diǎn)，并支持進(jìn)一步針對(duì)Nectin-4的ADC藥物的臨床開發(fā)、研究和應(yīng)用。

2014年，EV進(jìn)入臨床實(shí)踐，被評(píng)估用于局部晚期或轉(zhuǎn)移性尿路上皮癌（metastatic urothelial carcinoma，mUC）的治療，已被FDA授予突破性藥物資格[18-21]。EV-101為EV的Ⅰ期臨床試驗(yàn)，用于評(píng)價(jià)其在受試者藥代動(dòng)力學(xué)中的免疫原性、藥物安全性和抗腫瘤活性，幾乎所有入組患者以前都接受過鉑類化學(xué)療法的治療，而且有89位患者以前接受過檢查點(diǎn)抑制劑的治療，EV-101結(jié)果顯示，EV具有較好的藥物安全性[22]。EV-201是一項(xiàng)全球多中心的Ⅱ期臨床試驗(yàn)，確診的客觀緩解率（objective response rate，ORR）為44%，28%的患者病情穩(wěn)定，18%的患者病情進(jìn)展，10%的患者無法評(píng)估，無論患者之前是否對(duì)檢查點(diǎn)抑制劑做出了反應(yīng)，患者都會(huì)對(duì)EV發(fā)生客觀反應(yīng)，安全報(bào)告期內(nèi)無死亡病例報(bào)告[23]?？傊珽V在Ⅰ期和Ⅱ期臨床試驗(yàn)中顯示了對(duì)該人群的有效性和安全性，包括預(yù)后不良的患者如肝轉(zhuǎn)移[24]。

由 Franois Bertucci和 Marc Lopez 開發(fā)了一種ADC藥物（N41mab-vcMMAE），該ADC同樣是由一種抗人Nectin-4單克隆抗體與MMAE偶聯(lián)而成[4]。在體外，N41mab-vcMMAE以高親和力和特異性與Nectin-4結(jié)合，對(duì)表達(dá)Nectin-4的乳腺癌細(xì)胞系具有劑量依賴性細(xì)胞毒性[4]。在體內(nèi)，該ADC誘導(dǎo)了對(duì)Nectin-4陽性的異種移植三陰性乳腺癌的快速、完整和持久的反應(yīng)，包括原發(fā)腫瘤、轉(zhuǎn)移性病變和局部復(fù)發(fā)，N41mabvcMMAE對(duì)腫瘤的抑制效率取決于藥物劑量和腫瘤Nectin-4表達(dá)水平[4]。

7 以Nectin-4為靶標(biāo)的藥物專利情況

由Astellas和Seattle Genetics共同開發(fā)的新型ADC藥物EV，其在澳大利亞、西班牙、日本、美國(guó)、中國(guó)臺(tái)灣、斯洛文尼亞及世界知識(shí)產(chǎn)權(quán)組織已進(jìn)行專利的申請(qǐng)[25-31]。由Yissum公司發(fā)明的人Nectin-4抗體治療也在世界知識(shí)產(chǎn)權(quán)組織申請(qǐng)了相關(guān)專利[32]。另外，法國(guó)的國(guó)家醫(yī)療保健研究所及讓波利與艾琳卡爾梅特研究所也對(duì)于其研究的Nectin-4特異性抗體（14A5.2mab）及用途在中國(guó)申請(qǐng)了專利[33]。目前全球Nectin-4相關(guān)領(lǐng)域的研究和專利還不多，尤其在中國(guó)仍有很大的開發(fā)空間和前景。

Nectin1-4在成人組織中已被鑒定，Nectin-4在成人正常組織中很少表達(dá)，但在胚胎和胎盤中特異性表達(dá)，并且許多研究表明，Nectin-4在多種腫瘤組織和細(xì)胞中過表達(dá)[11]。因此，Nectin-4有望成為多種腫瘤的生物標(biāo)志物。另外，隨著對(duì)Nectin-4靶向藥物的進(jìn)一步研究，將來必定會(huì)有更多的以Nectin-4為靶點(diǎn)的抗體藥物和ADC藥物進(jìn)入到臨床研究中，用來治療Nectin-4過表達(dá)的惡性腫瘤，為癌癥的治療提供新的方向。