一例豬偽狂犬病的綜合診斷

周定存

（鄧州市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，河南 鄧州474150）

近年來，由于規(guī)?；B(yǎng)豬場對偽狂犬病的防控措施得當(dāng)，使得該病在部分養(yǎng)殖場得到徹底的凈化，但規(guī)?；i場向外引種頻繁，若將帶毒種豬引進(jìn)豬場，而豬場內(nèi)豬群未免疫接種偽狂犬病疫苗，極易導(dǎo)致偽狂犬病在豬場短時(shí)間爆發(fā)，給該豬場造成難以挽回的經(jīng)濟(jì)損失。2019年3月初，某規(guī)?；i場暴發(fā)疑似豬偽狂犬病，通過臨床診斷結(jié)合實(shí)驗(yàn)室診斷結(jié)果，最終判定為豬偽狂犬病野毒感染所致。其具體診斷過程如下：

1 發(fā)病情況及臨床癥狀

某規(guī)?；B(yǎng)豬場，自2017 年判定為豬偽狂犬病毒陰性豬場，其后未對豬群免疫接種豬偽狂犬病疫苗，自2018 年9 月引種以來，豬場陸續(xù)發(fā)生母豬流產(chǎn)、死胎等案例，且發(fā)生率逐漸上升，此外，部分仔豬發(fā)生較嚴(yán)重的腹瀉和神經(jīng)癥狀，最終以死亡告終。2019 年5 月初，豬場內(nèi)很多懷孕母豬出現(xiàn)流產(chǎn)、產(chǎn)弱仔等臨床癥狀，引進(jìn)的種公豬表觀可見睪丸腫大、精神萎靡等，此外，大批仔豬體溫升高、共濟(jì)失調(diào)、呼吸困難等，部分仔豬腹瀉等。直至5 月中旬，已經(jīng)有大批仔豬死亡，給養(yǎng)殖場造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

2 病理變化

分別對死亡不久和瀕臨死亡的仔豬進(jìn)行解剖，觀察病理變化。病豬淋巴結(jié)腫大，扁桃體可見明顯化膿壞死；肺部表面有片狀出血，腎臟表面有出血點(diǎn)，胃腸道黏膜有出血、卡他性出血癥狀；此外，其腦膜充血、明顯水腫。

根據(jù)其發(fā)病特點(diǎn)，臨床癥狀和病理變化，初步判斷該豬群感染豬偽狂犬病毒，但不能排除其他病原，如細(xì)菌或其他病毒等。

3 實(shí)驗(yàn)室診斷

3.1 細(xì)菌分離與鑒定

無菌采集病豬的腦部、肺部、肝臟和腎臟及淋巴結(jié)病理變化明顯的部分，采取平板劃線法分別將病料接種與兔鮮血瓊脂培養(yǎng)基和普通瓊脂培養(yǎng)基上，并在37℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)，分別在24 h和48 h觀察培養(yǎng)基表面是否生長菌落及菌落形態(tài)。結(jié)果顯示，分別接種以上病料的兩種瓊脂培養(yǎng)基表面均未出現(xiàn)菌落，因此可初步確定病豬未感染細(xì)菌性疾病。

3.2 血清學(xué)診斷

頸靜脈采集病豬血液10份，每份3 ml，將血液樣品于室溫靜置4 h，吸取上清置于無菌離心管內(nèi)，將離心管低速離心（3 000 rpm）離心5 min，應(yīng)用豬偽狂犬病毒gE 蛋白ELISA 檢測試劑盒分別對以上血清樣品進(jìn)行抗體檢測。結(jié)果顯示，10 份血清樣品中有8 份檢測為偽狂犬病毒gE蛋白抗體陽性，提示該豬群感染偽狂犬病毒野毒。

3.3 病原診斷

為了確定該豬群是否感染其他病毒，通過RT-PCR技術(shù)和PCR技術(shù)對組織中豬偽狂犬病毒、豬藍(lán)耳病毒、豬圓環(huán)病毒和豬細(xì)小病毒進(jìn)行病原檢測。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，除了豬偽狂犬病毒gE基因檢測為陽性外，其他病原均未檢出，病原檢測結(jié)果最終確定該豬群感染豬偽狂犬病毒。

4 討論

豬偽狂犬病是由豬偽狂犬病毒（或豬皰疹I(lǐng) 型病毒）感染豬所引起的一類強(qiáng)感染性傳染病，各生長階段豬群對該病毒均易感，其中以懷孕母豬和仔豬感染該病后臨床癥狀最為明顯，懷孕母豬感染該病后主要臨床癥狀為流產(chǎn)、死胎等，而發(fā)病仔豬則出現(xiàn)腹瀉、嘔吐和明顯的神經(jīng)癥狀。市面上已經(jīng)有多種針對豬偽狂犬病毒開發(fā)的弱毒疫苗或滅活苗，使用有效的疫苗和生物凈化措施完全可以將豬偽狂犬病在豬群中凈化，目前也有很多豬場通過以上措施成功將豬偽狂犬病毒凈化。然而，也有很多豬偽狂犬病毒凈化后豬群又感染野毒的案例發(fā)生，筆者所服務(wù)的規(guī)?；i場也是如此，由于引種過程中未對種豬進(jìn)行疫病監(jiān)測，導(dǎo)致野毒通過引進(jìn)種豬帶入豬場，而豬場內(nèi)豬群未免疫豬偽狂犬病相應(yīng)疫苗，無法抵抗野毒的感染，最終導(dǎo)致該病在豬場內(nèi)短時(shí)間爆發(fā)。

該病診斷一般包括：

4.1 初步診斷

新生仔豬及4 周齡內(nèi)仔豬常突然發(fā)病，體溫41 ℃以上，間有嘔吐、腹瀉及神經(jīng)癥狀，出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)失調(diào)，興奮不安，身體各部分肌肉痙攣，隨后麻痹死亡，病程1～2 d，死亡率很高。4 周齡左右的豬發(fā)病后只有輕微癥狀，有輕熱、呼吸困難，時(shí)有腹瀉和嘔吐，幾天內(nèi)可完全康復(fù)，但也有部分豬出現(xiàn)神經(jīng)癥狀后死亡。妊娠母豬常發(fā)生流產(chǎn)、死胎或木乃伊胎，流產(chǎn)發(fā)生率約占50%。成年豬一般隱性感染，有時(shí)有輕度呼吸系統(tǒng)癥狀，不食、嘔吐、萎頓等。由于豬的病癥復(fù)雜，若出現(xiàn)以上癥狀，懷疑是偽狂犬病時(shí)，應(yīng)進(jìn)一步進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷。

4.2 實(shí)驗(yàn)室診斷

采用豬扁桃體、咽喉黏膜、腦、延腦、小腦和海馬角等，檢查細(xì)胞中有無核內(nèi)包涵體。將病料接種家兔，2～3 d 后注射的局部出現(xiàn)奇癢及全身癥狀，常在奇癢出現(xiàn)后1～2 d轉(zhuǎn)為麻痹而死亡。

4.3 血清學(xué)診斷

可用直接免疫熒光法檢查腦、扁桃體的壓片或冰凍切片，發(fā)現(xiàn)核內(nèi)包涵體出現(xiàn)熒光，有診斷價(jià)值。檢查血清抗體可采用中和試驗(yàn)、間接血凝抑制試驗(yàn)、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等，其中血清中和試驗(yàn)較為敏感、準(zhǔn)確。

此次病例通過對該豬場發(fā)病豬群發(fā)病特點(diǎn)、臨床和病理變化，實(shí)驗(yàn)室診斷結(jié)果進(jìn)行總結(jié)，最終判定該豬場爆發(fā)豬偽狂犬病，且為野毒感染所致。由于目前尚無治療該病的藥物，所以對于該病主要以防控為主，特別是針對某些偽狂犬病毒陰性豬場，應(yīng)該定期對豬群進(jìn)行血清學(xué)或病原監(jiān)測，同時(shí)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理水平，提高豬群的免疫力。