丁香酚在羅非魚血漿中藥代動力學(xué)評價

曹婷

【摘要】目的：探討丁香酚在羅非魚血漿中藥代動力學(xué)。方法：2018年1月—2019年3月，將選取的羅非魚放入麻醉藥物溶液中藥藥浴，等到其完全麻醉后，在放入清水中復(fù)蘇。每個一段時間采用檢測血漿中的丁香酚含量，計算血漿中的藥代動力學(xué)參數(shù)。結(jié)果：丁香酚最高血藥濃度為4.27mg/L，消除半衰期為1.84h，平均滯留時間MRT0-∞為3.12h;藥時曲線下面積AUC0-t為13.28Mg/（L*h）。結(jié)論：丁香酚在羅非魚血漿中半衰期越短，其消除率速率越快，藥代動力學(xué)與二室模型保持一致。

【關(guān)鍵詞】丁香酚;羅非魚;血漿;中藥代動力學(xué)

【中圖分類號】R284

【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A

【文章編號】2095-6851（2020）01-034-01

丁香酚又被稱為2-甲氧基-苯酚，在臨床上屬于一種天然香料物質(zhì)，其不但能夠作為食品添加劑，用于增強(qiáng)食品風(fēng)味，同時還具有對魚類的麻醉作用，在水產(chǎn)行業(yè)中得到了廣泛的應(yīng)用[1-2]。近些年，眾多研究人員開展了丁香酚在不同種類水產(chǎn)品中麻醉效果的研究，并獲取了丁香酚作為魚類麻醉劑的應(yīng)用數(shù)據(jù)，從而逐漸形成了完善的魚類麻醉階段行為特征的判斷標(biāo)準(zhǔn)。對于丁香酚是否能夠作為魚類麻醉劑，在各個國家產(chǎn)生了不同的說法，而我國對于丁香酚的研究以及風(fēng)險評估剛處于初級階段，且使用與限量均尚無統(tǒng)一規(guī)定，急需研究丁香酚在不同種類水產(chǎn)品中的規(guī)律以及風(fēng)險特性[3]。本文在丁香酚理想濃度下，進(jìn)行了丁香酚在羅非魚血漿中的藥代動力學(xué)研究，旨在為丁香酚在水產(chǎn)品中得以科學(xué)應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗用魚及養(yǎng)殖條件

選取活力旺盛，且外傷，體重為（450±15）g的羅非魚，并在魚缸內(nèi)飼養(yǎng)一周，在養(yǎng)殖過程應(yīng)持續(xù)曝氣，同時停止喂食。缸內(nèi)用水應(yīng)為自來水，每天換水一次，水溫應(yīng)控制在（25.5±2.4）℃。

1.1.2 試劑

丁香酚試劑（純度為99.00%;佛山市南海中南藥化廠;批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字H20057405;使用前應(yīng)將無水乙醇稀釋成體積比為1：9的使用液）;丁香酚對照品（純度為99.00%;CAS號：95-49-1），丁香酚-D3內(nèi)標(biāo)物對照品（純度為99.00%;CAS號：72-15-8;上海阿拉丁試劑有限公司）。

甲醇（色譜級;江蘇平光制藥有限責(zé)任公司）;肝素鈉（南京健友生化制藥股份有限公司）;水溶液為超純水。

1.1.3 儀器與設(shè)備

液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（島津（香港）有限公司;型號：LCMS-2020）;SPE固相萃取小柱（60mg/3mL月旭科技（上海）股份有限公司;型號：57044）;臺式冷凍離心機(jī)（山東博科生物產(chǎn)業(yè)有限公司;型號：TGL-16M）;氮吹儀（北京眾信佳儀科技有限公司;型號：WD20）;超純水儀（上海睿析科學(xué)儀器有限公司;型號：RX-UPTB）。

1.2 測定方法

1.2.1 配置標(biāo)準(zhǔn)溶液

把丁香酚對照品以及丁香酚-D3內(nèi)標(biāo)物對照品用甲醇溶液溶解、稀釋，依次配成質(zhì)量濃度為100ug/mL，1ug/L的標(biāo)準(zhǔn)液，放置在溫度為零下20℃環(huán)境中，保存在時間為30天。在使用時配置成不同質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作內(nèi)液。

1.2.2 處理樣品

選取5毫升血漿在15毫升離心管內(nèi)，隨后加入質(zhì)量濃度為1ug/mL的丁香酚-D3內(nèi)標(biāo)溶液0.5 毫升，靜置半小時，然后添加3mL甲醇，最后用離心機(jī)進(jìn)行離心，離心機(jī)應(yīng)調(diào)節(jié)至12000r/min，離心10min，將上清液轉(zhuǎn)移至新15mL的離心管，同時在離心后的殘渣中在此添加3ml甲醇，重復(fù)提取一次，隨后打開提取液，向提取液中添加4毫升純水，混勻備用。

把SPE小柱分別用甲醇、水活化各5毫升，隨后把處理好的備用樣品均上樣，流速應(yīng)控制在1.5—2ml/min，棄流出液;用5毫升體積分?jǐn)?shù)為60%甲醇水溶液對固相萃取小柱沖洗兩次;用5毫升甲醇溶液洗脫，并收集洗脫液，洗脫液應(yīng)在40℃水浴條件下用氮氣吹至蔣干，然后用甲醇定容1毫升，下清液過0.22um濾膜，上機(jī)檢測。

1.3 數(shù)據(jù)處理方法

全部數(shù)據(jù)均應(yīng)通過DAS2.00以及Excel軟件進(jìn)行計算處理。

2 結(jié)果與分析

藥代動力學(xué)考察對于丁香酚麻醉濃度為45mg/L條件下，探討丁香酚在羅非魚血漿中的藥代動力學(xué)。在0—18小時范圍內(nèi)取出羅非魚血漿檢測丁香酚殘留量。采用DAS2.0軟件，按照房室模型和統(tǒng)計矩理論，對藥代動力學(xué)參數(shù)進(jìn)行計算。由藥代動力學(xué)參數(shù)可看出，丁香酚在羅非魚血漿中的濃度與一級動力學(xué)參數(shù)相擬合，為二室模型，見表2。

3 討論

現(xiàn)階段，丁香酚作為魚類麻醉劑被廣泛應(yīng)用[4]。此次通過進(jìn)行理想麻醉濃度條件下，探討丁香酚在羅非魚血漿中藥代動力學(xué)，其目的旨在為丁香酚在水產(chǎn)品行業(yè)的安全性評估提供可靠依據(jù)[5]。此次研究結(jié)果表明，丁香酚溶液濃度在45mg/L時，羅非魚血漿中的丁香酚麻醉劑濃度與復(fù)蘇時間均表現(xiàn)為衰減趨勢，血漿中丁香酚最高血藥濃度為4.27mg/L，消除半衰期為1.84h，平均滯留時間MRT0-∞為3.12h;藥時曲線下面積AUC0-t為13.28Mg/（L*h）;丁香酚在羅非魚血漿中半衰期越短，其消除率速率越快，藥代動力學(xué)與二室模型保持一致。

參考文獻(xiàn)：

[1] 黃武， 徐金龍， 劉建芳，等. 高效液相色譜法檢測羅非魚中丁香酚殘留量[J]. 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報， 2018， 13（1）：103-106.

[2] 張媛媛，宋理平，胡斌 . 飼料中添加姜黃素對尼羅羅非魚幼魚生長和四氯化碳誘導(dǎo)肝損傷的影響[J]. 中國水產(chǎn)科學(xué)， 2018， 25（6）：1271-1280.

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[4] 劉含亮，王紀(jì)亭，萬文菊， 等.胰島素受體-1在尼羅羅非魚不同組織中的表達(dá)及其對注射葡萄糖的響應(yīng)[J].動物營養(yǎng)學(xué)報，2017， 29（2）：652-662.

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