張升 張偉 王麗 李孝軍 崔俊濤

摘要：為闡明土壤不同氮素形態(tài)尤其是有機氮形態(tài)與土壤有害生物種群發(fā)生、發(fā)展的關系，以禾谷鐮刀菌供試菌株，初步研究了5種氨基酸態(tài)氮對其生長及DON毒素產(chǎn)生的影響。結(jié)果表明：0.20%氮源添加量下的100 ml液體培養(yǎng)基中，各培養(yǎng)基中菌絲干質(zhì)量差異顯著，培養(yǎng)基中菌絲干質(zhì)量從大到小的順序為賴氨酸培養(yǎng)基（1.27 g）>硝酸鈉培養(yǎng)基（0.88 g）>谷氨酸培養(yǎng)基（0.84 g）>酪氨酸培養(yǎng)基（0.52 g）>纈氨酸培養(yǎng)基（0.45 g）>蛋氨酸培養(yǎng)基（0.36 g）。賴氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液中DON毒素含量最高，達到2 951 μg/L，其他不同氮源培養(yǎng)基發(fā)酵液中DON毒素含量大小順序為酪氨酸（1 418 μg/L）>谷氨酸（240 μg/L）>硝酸鈉（224 μg/L）>纈氨酸（214 μg/L）>蛋氨酸（50 μg/L），毒素含量與氮源添加量呈正相關關系。生物測定結(jié)果顯示，賴氨酸液體培養(yǎng)基發(fā)酵液的抑制效果最為明顯，種子萌發(fā)抑制率、胚根抑制率、胚芽抑制率分別達到了63.0%、60.9%、63.0%，其次為酪氨酸（41.0%、34.4%、34.8%）、谷氨酸（26.0%、18.8%、23.9%）、硝酸鈉（25.0%、15.6%、21.7%）、纈氨酸（25.0%、14.1%、21.7%）和蛋氨酸（7.0%、9.4%、17.4%）。對比5種氨基酸，當賴氨酸作為唯一氮源時，對禾谷鐮刀菌的生長和產(chǎn)毒作用顯著，可提高病原菌的侵染、定殖寄主植物的能力，從而誘導莖腐病的發(fā)生。

關鍵詞：禾谷鐮刀菌;氨基酸態(tài)氮;賴氨酸;DON毒素

中圖分類號：S154.34文獻標識碼：A文章編號：1000-4440（2020）06-1403-08

Abstract：To elucidate the relationship between different nitrogen forms， especially organic nitrogen forms， and the occurrence and development of soil pest， the effects of five amino acid nitrogen on the growth of Fusarium graminearum and the production of DON toxin were studied by using Fusarium graminearum strains. The results showed that the mycelial dry weight in each medium was significantly different when 100 ml liquid medium was added with 0.20% nitrogen source， and the mycelial dry weight in mediums followed the order of lysine medium （1.27 g）> sodium nitrate medium （0.88 g）> glutamic acid medium （0.84 g）> tyrosine medium（0.52 g）> valine medium（0.45 g）> methionine medium（0.36 g）. The content of DON toxin was the highest in the fermentation broth of lysine medium， which reached 2 951 μg/L. The content of DON toxin in the fermentation broth of different nitrogen sources followed the order of tyrosine medium（1 418 μg/L）> glutamic acid medium（240 μg/L）> sodium nitrate medium （224 μg/L）> valine medium（214 μg/L）> methionine medium（50 μg/L）. Toxin content was positively correlated with nitrogen source addition. The results of bioassay showed that lysine liquid medium had the most obvious inhibitory effect on seed germination， radicle and germ， inhibition rates were 63.0%， 60.9% and 63.0% ， respectively， followed by tyrosine medium（41.0%， 34.4%， 34.8%）， glutamate medium （26.0%， 18.8%， 23.9%） ， sodium nitrate medium （25.0%， 15.6%， 21.7%）， valine medium （25.0%， 14.1%， 21.7%）， methionine medium（7.0%， 9.4%， 17.4%）. When lysine was used as the only nitrogen source， it had significant effect on the growth and toxin production of Fusarium Graminearum， which could increase the ability of pathogen to infect and colonize the host plant， and induce stem rot.

Key words：Fusarium graminearum;amino acid nitrogen;lysine;DON toxin

土壤有機態(tài)氮是土壤氮素的主要存在形式，占土壤全氮的90%以上 [1]，其中氨基酸態(tài)氮占全氮的40%，直接影響著土壤肥力和供氮能力[2]。因此，以往有關土壤氮素的研究主要集中在2個方面：一是土壤不同形態(tài)氮肥對作物產(chǎn)量和品質(zhì)的影響[3];二是土壤微生物在土壤氮素轉(zhuǎn)化中的作用以及如何提高土壤氮肥利用率[4]。但有關土壤氮素種類及其轉(zhuǎn)化對土壤有害微生物的影響卻鮮見報道，因此，闡明土壤不同氮素形態(tài)尤其是有機氮形態(tài)與土壤有害生物種群發(fā)生、發(fā)展的關系及其對有害生物代謝的影響，無論在理論上豐富耕地地力培肥理論及土壤有害生物防治理論，還是在實踐上提出和采取切實可行的措施，將耕地地力培肥與土壤有害生物防治有機地結(jié)合起來都具有重要意義。

由于禾谷鐮刀菌（Fusarium graminearum）廣泛分布于世界各地，習居于各種不同類型土壤中，是小麥、玉米、水稻三大禾谷類作物土傳病害的主要病原菌，每年不僅直接導致農(nóng)作物減產(chǎn)，而且還導致農(nóng)產(chǎn)品失去食用價值[5-7]。因此，為了探明東北玉米主產(chǎn)區(qū)玉米莖腐病逐年加重趨勢是否與玉米根際分泌的主要氨基酸種類和濃度有關[8-9]，本試驗初步研究5種氨基酸態(tài)氮對禾谷鐮刀菌生長及DON毒素產(chǎn)生的影響，以此為闡明土傳病害的發(fā)生機制及其防治提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1供試材料和培養(yǎng)基

禾谷鐮刀菌（Fusarium graminearum）：在試驗田玉米莖腐病的病變組織中分離得到。谷氨酸、賴氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、酪氨酸，北京索來寶生物科技有限公司產(chǎn)品。玉米品種為吉農(nóng)大58。Czapek培養(yǎng)基[10]：硝酸鈉2 g，磷酸氫二鉀1 g，硫酸鎂（MgSO4·7H2O）0.5 g，氯化鉀0.5 g，硫酸亞鐵0.01 g，蔗糖30 g，蒸餾水1 000 ml，高溫高壓滅菌（121 ℃，2.4×105 Pa，20 min）后使用。固體培養(yǎng)基：每1 000 ml培養(yǎng)基加入20 g瓊脂。禾谷鐮刀菌產(chǎn)孢培養(yǎng)基[11]：1 g/L NH4NO3，1 g/L KH2PO4，15 g/L羧甲基纖維素鈉，1 g/L酵母粉，0.5 g/L MgSO4·7H2O。

1.2不同氨基酸對禾谷鐮刀菌生長的影響試驗

在無氮的Czapek基礎培養(yǎng)基中分別添加質(zhì)量濃度梯度為0.05 g/L、0.10 g/L、0.20 g/L、0.40 g/L 5種氨基酸（谷氨酸、賴氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、酪氨酸），作為氨基酸培養(yǎng)基，對照為Czapek培養(yǎng)基，3次重復。

液體培養(yǎng)：100 ml不同氨基酸培養(yǎng)基接種0.5 ml禾谷鐮刀菌孢子懸液[11]（1×106CFU/ml的孢子懸液），25 ℃，120 r/min振蕩培養(yǎng)7 d，整瓶采樣，進行抽濾。抽濾后放置于105 ℃的烘箱中4 h，菌絲烘干，稱質(zhì)量，菌絲質(zhì)量=總質(zhì)量-濾紙質(zhì)量。

固體培養(yǎng)：上述各不同氮源添加量的液體培養(yǎng)基中加入瓊脂，制成固體培養(yǎng)基。用滅菌后的打孔器，在禾谷鐮刀菌平板上打取5 mm菌碟[12]，放置于各種氮源固體培養(yǎng)基中，恒溫培養(yǎng)箱中25 ℃培養(yǎng)，在1 d、2 d、3 d、4 d、5 d、6 d、7 d的同一時間，采用十字交叉法[13]，測量菌落直徑。

1.3不同氨基酸對DON毒素產(chǎn)生的影響試驗

采用FD-600型嘔吐毒素快速檢測儀[14]（上海飛測生物科技有限公司）檢測液體培養(yǎng)基發(fā)酵液中的DON毒素。

液體搖床培養(yǎng)階段完成后的6組發(fā)酵液，經(jīng)過濾滅菌后?。?.00±0.02） ml于10 ml離心管中，加入5 ml提取液（V甲醇∶V水=4∶1），使用漩渦混勻器振蕩5 min后，4 000 r/min離心1 min，取上清液。取100 μl離心上清液加入1 000 μl樣品稀釋液中，用漩渦混勻器混勻3～5 s，然后取100 μl加入到嘔吐毒素熒光定量檢測試紙條的加樣孔中。置于37 ℃恒溫孵育器中溫育8 min，8 min后將試紙條插入熒光免疫定量分析儀中讀數(shù)，讀數(shù)值即為樣品的實際檢測濃度。每組重復3次，取平均值。

1.4代謝產(chǎn)物毒性測定

挑取長勢均勻、顆粒飽滿的玉米種子，放入2%次氯酸鈉溶液中浸泡10 min，然后無菌水沖洗3次。將已經(jīng)滅菌的雙層濾紙放入培養(yǎng)皿中，取出完成培養(yǎng)后的液體培養(yǎng)基發(fā)酵液，過濾掉菌絲后，高溫高壓滅菌（121 ℃，2.4×105 Pa，20 min），取15 ml發(fā)酵液倒入培養(yǎng)皿中，以加入不含氮源的Czapek液體培養(yǎng)基作為對照，將已消毒的玉米種子放入培養(yǎng)基中，每個培養(yǎng)基中放10粒種子，3次重復，置于光照培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)7 d，取樣。記錄玉米種子萌發(fā)狀況、胚芽長度、胚根長度。計算種子萌發(fā)抑制率和對胚根、胚芽的生長抑制率[15]，萌發(fā)抑制率=[（對照萌發(fā)率-處理萌發(fā)率）/對照萌發(fā)率]×100%，胚根（胚芽）生長抑制率=[（對照平均長度-處理平均長度）/對照平均長度]×100%。

1.5數(shù)據(jù)分析

運用Excel、IBM Spss Statistic 24進行統(tǒng)計分析。

2結(jié)果與分析

2.1不同氨基酸對禾谷鐮刀菌生長的影響

培養(yǎng)基中菌絲干質(zhì)量變化如圖1所示，氮源添加量為0.40%時，以賴氨酸為氮源的菌絲干質(zhì)量顯著高于其他氮源，培養(yǎng)基中菌絲干質(zhì)量23.5 g/L，大于硝態(tài)氮氮源的硝酸鈉培養(yǎng)基中菌絲干質(zhì)量，硝酸鈉培養(yǎng)基中菌絲干質(zhì)量為16.5g/L，因此賴氨酸對禾谷鐮刀菌的生長促進作用最強，其次為硝酸鈉，蛋氨酸對禾谷鐮刀菌的生長促進作用較小。在氮源添加量為0.20%時，賴氨酸培養(yǎng)基中菌絲干質(zhì)量最大，為12.7 g/L，對禾谷鐮刀菌的生長促進作用最強，其次為硝酸鈉和谷氨酸，其培養(yǎng)基中菌絲干質(zhì)量分別到達了8.8 g/L和8.4g/L，蛋氨酸對禾谷鐮刀菌的生長促進作用最小。在氮源添加量為0.10%時，賴氨酸對禾谷鐮刀菌的生長促進作用最強，菌絲干質(zhì)量達到了7.0 g/L，其次為硝酸鈉和谷氨酸，其培養(yǎng)基中菌絲干質(zhì)量分別為5.8 g/L和5.5g/L，蛋氨酸培養(yǎng)基的菌絲干質(zhì)量最小。在0.05%氮源添加量下，賴氨酸對禾谷鐮刀菌的生長促進作用最強，培養(yǎng)基中菌絲干質(zhì)量4.1 g/L，蛋氨酸對禾谷鐮刀菌的生長促進作用最小。綜上所述，培養(yǎng)基中菌絲干質(zhì)量與氮源添加量呈正相關關系，不同氨基酸對禾谷鐮刀菌的生長促進作用存在差異，其大小順序為，賴氨酸>硝酸鈉>谷氨酸>酪氨酸>纈氨酸>蛋氨酸。

在0.05%氮源添加量下，不同氮源賴氨酸、硝酸鈉、谷氨酸、酪氨酸、纈氨酸、蛋氨酸對禾谷鐮刀菌菌落生長的促進作用不同（圖2），其促進作用順序為賴氨酸>硝酸鈉>谷氨酸>酪氨酸>纈氨酸>蛋氨酸。與液體培養(yǎng)試驗結(jié)果相一致。0.10%氮源添加量下，與0.05%氮源添加量的菌落相比，菌落直徑明顯增加，培養(yǎng)7 d時賴氨酸培養(yǎng)基中菌落直徑達到8.5 cm。0.20%氮源添加量下，相對于0.05%、0.10%氮源添加量，培養(yǎng)基中菌落生長速度較快，不同氮源對禾谷鐮刀菌菌落的生長促進作用表現(xiàn)出差異性。0.40%氮源添加量下，各培養(yǎng)基中菌落生長速度較快，7 d時菌落直徑都到達培養(yǎng)皿直徑。賴氨酸對于禾谷鐮刀菌菌落的生長促進作用最強，蛋氨酸對禾谷鐮刀菌菌落的生長促進作用最弱，其促進順序為賴氨酸>硝酸鈉>谷氨酸>酪氨酸>纈氨酸>蛋氨酸。根據(jù)菌落直徑的變化趨勢，將不同氮源對禾谷鐮刀菌菌落的生長促進作用分為3個等級：第1等級，賴氨酸;第2等級，硝酸鈉、谷氨酸;第3等級，酪氨酸、纈氨酸、蛋氨酸。

無論是液體培養(yǎng)試驗還是固體培養(yǎng)試驗，都驗證了不同氨基酸對禾谷鐮刀菌的生長存在不同的促進作用，不同氮源對禾谷鐮刀菌生長的促進作用順序為賴氨酸>硝酸鈉>谷氨酸>酪氨酸>纈氨酸>蛋氨酸。

2.2不同氨基酸對禾谷鐮刀菌產(chǎn)生DON毒素的影響

不同培養(yǎng)基發(fā)酵液的DON毒素含量如表1所示，0.40%氮源添加量下，賴氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液中毒素含量最高，達到4 524 μg/L，其次為酪氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液，其DON含量為2 271 μg/L，蛋氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液中DON毒素含量為91 μg/L，蛋氨酸對禾谷鐮刀菌產(chǎn)DON毒素的促進作用最低;在0.20%氮源添加量下，賴氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液中毒素含量最高，其培養(yǎng)基發(fā)酵液中DON含量為2 951 μg/L，其次為酪氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液，蛋氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液中DON毒素含量為50 μg/L;在0.10%氮源添加量下，賴氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液中毒素含量最高，DON含量為1 752 μg/L，其次為酪氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液，蛋氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液中DON毒素含量為31 μg/L;在0.05%氮源添加量下，賴氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液中毒素含量最高，DON含量為799 μg/L，其次為酪氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液，蛋氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液中DON毒素含量為11 μg/L。綜上所述，不同氮源對禾谷鐮刀菌產(chǎn)DON毒素的促進作用存在差異，大小順序為賴氨酸>酪氨酸>谷氨酸>硝酸鈉>纈氨酸>蛋氨酸，并且谷氨酸、硝酸鈉、纈氨酸對禾谷鐮刀菌產(chǎn)DON毒素的促進作用相互之間差異不顯著。促進禾谷鐮刀菌生長的氨基酸，不一定促進禾谷鐮刀菌產(chǎn)DON毒素的能力，反之亦然。

2.3不同氮源添加量的培養(yǎng)基發(fā)酵液對玉米種子萌發(fā)的影響

在0.05%氮源添加量下，培養(yǎng)基發(fā)酵液對玉米種子萌發(fā)的影響如表2所示。賴氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液對玉米種子萌發(fā)的抑制效果顯著，其萌發(fā)抑制率達到了38.0%，胚根抑制率35.9%，胚芽抑制率26.1%;酪氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液的抑制效果低于賴氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液，萌發(fā)抑制率23.0%，胚根抑制率21.9%，胚芽抑制率19.6%。谷氨酸、硝酸鈉、纈氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液對玉米種子萌發(fā)的抑制效果差異不明顯，蛋氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液對玉米種子萌發(fā)的抑制效果最弱。

在0.10%氮源添加量下，各氨基酸培養(yǎng)基發(fā)酵液對玉米種子萌發(fā)的影響如表3所示。賴氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液對玉米種子萌發(fā)的抑制效果明顯，萌發(fā)抑制率達到了48.0%，胚根抑制率45.3%，胚芽抑制率41.3%;酪氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液的抑制效果低于賴氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液，萌發(fā)抑制率27.0%，胚根抑制率26.6%，胚芽抑制率23.9%。谷氨酸、硝酸鈉、纈氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液對玉米種子萌發(fā)的抑制效果差異不明顯，蛋氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液對玉米種子萌發(fā)的抑制效果最弱。

在0.20%氮源添加量下，各氨基酸培養(yǎng)基發(fā)酵液對玉米種子萌發(fā)的影響如表4所示。賴氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液對玉米種子的萌發(fā)抑制效果明顯，萌發(fā)抑制率達到了63.0%，胚根抑制率60.9%，胚芽抑制率63.0%;酪氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液的抑制效果低于賴氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液，萌發(fā)抑制率41.0%，胚根抑制率34.4%，胚芽抑制率34.8%。谷氨酸、硝酸鈉、纈氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液對玉米種子萌發(fā)的抑制率效果差異不明顯，蛋氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液對玉米種子萌發(fā)的抑制效果最弱。

在0.40%氮源添加量下，各氨基酸培養(yǎng)基發(fā)酵液對玉米種子萌發(fā)的影響如表5所示。賴氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液對玉米種子萌發(fā)的抑制效果顯著，萌發(fā)抑制率達到了81.0%，胚根抑制率84.4%，胚芽抑制率83.0%;酪氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液的抑制效果低于賴氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液，萌發(fā)抑制率50.0%，胚根抑制率41.0%，胚芽抑制率47.8%。谷氨酸、硝酸鈉、纈氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液對玉米種子萌發(fā)的抑制效果差異不明顯，蛋氨酸培養(yǎng)基發(fā)酵液對玉米種子萌發(fā)的抑制效果最弱。

氨基酸培養(yǎng)基發(fā)酵液對玉米種子萌發(fā)存在一定的抑制效果，抑制玉米種子萌發(fā)的培養(yǎng)基氮源順序為賴氨酸>酪氨酸>谷氨酸>硝酸鈉>纈氨酸>蛋氨酸，這與DON毒素試驗的結(jié)果一致，說明禾谷鐮刀菌所產(chǎn)的DON毒素會直接作用于種子，從而影響種子的萌發(fā)及胚根、胚芽的生長。

2.4DON毒素與玉米種子萌發(fā)的皮爾森相關性分析

0.05%氮源添加量下，培養(yǎng)基發(fā)酵液中毒素含量與玉米種子萌發(fā)抑制率、胚根抑制率、胚芽抑制率的相關性分析結(jié)果顯示，毒素含量與萌發(fā)抑制率的相關系數(shù)r=0.972，毒素含量與胚根抑制率的相關系數(shù)r=0.986，毒素含量與胚芽抑制率的相關系數(shù)r=0.946，毒素含量與種子萌發(fā)抑制率、胚根抑制率、胚芽抑制率均呈極顯著正相關關系（表6）。0.10%氮源添加量下，培養(yǎng)基發(fā)酵液中DON毒素含量與玉米種子萌發(fā)抑制率的相關系數(shù)r=0.978，毒素含量與胚根抑制率的相關系數(shù)r=0.985，毒素含量與胚芽抑制率的相關系數(shù)r=0.990，毒素含量與種子萌發(fā)抑制率、胚根抑制率、胚芽抑制率均呈極顯著正相關關系（表7）。0.20%氮源添加量下，培養(yǎng)基發(fā)酵液中DON毒素含量與玉米種子萌發(fā)抑制率的相關系數(shù)r=0.947，毒素含量與胚根抑制率的相關系數(shù)r=0.994，毒素含量與胚芽抑制率的相關系數(shù)r=0.991，毒素含量與種子萌發(fā)抑制率、胚根抑制率、胚芽抑制率均呈極顯著正相關關系（表8）。0.40%氮源添加量下，培養(yǎng)基發(fā)酵液中DON毒素含量與玉米種子萌發(fā)抑制率的相關系數(shù)r=0.923，毒素含量與胚根抑制率的相關系數(shù)r=0.924，毒素含量與胚芽抑制率的相關系數(shù)r=0.982，毒素含量與種子萌發(fā)抑制率、胚根抑制率、胚芽抑制率均呈極顯著正相關關系（表9）。

3討論

本試驗證明促進禾谷鐮刀菌生長的氮源順序為賴氨酸>硝酸鈉>谷氨酸>酪氨酸>纈氨酸>蛋氨酸，促進禾谷鐮刀菌產(chǎn)DON毒素的氮源順序為賴氨酸>酪氨酸>谷氨酸>硝酸鈉>纈氨酸>蛋氨酸。相對于酪氨酸，谷氨酸更能促進禾谷鐮刀菌的生長，但對于禾谷鐮刀菌產(chǎn)DON毒素的促進作用卻低于酪氨酸?？梢姡龠M禾谷鐮刀菌生長的氨基酸，不一定促進禾谷鐮刀菌產(chǎn)生DON毒素，反之亦然。相對于硝態(tài)氮，賴氨酸不僅能促進禾谷鐮刀菌的生長，而且可以促進禾谷鐮刀菌DON毒素的產(chǎn)生，而谷氨酸、酪氨酸、纈氨酸、蛋氨酸對禾谷鐮刀菌生長的促進作用低于硝態(tài)氮;賴氨酸、酪氨酸、谷氨酸對禾谷鐮刀菌產(chǎn)DON毒素的促進作用強于硝態(tài)氮，纈氨酸、蛋氨酸弱于硝態(tài)氮。纈氨酸、蛋氨酸對于禾谷鐮刀菌的生長和產(chǎn)DON毒素的作用較小。試驗中賴氨酸促進產(chǎn)毒這一現(xiàn)象，與Gardiner等 [16-17]結(jié)論不一致。馬躍亭[18]使用多種氨基酸作為氮源培養(yǎng)禾谷鐮刀菌，發(fā)現(xiàn)賴氨酸作為氮源時，對禾谷鐮刀菌產(chǎn)生DON毒素有刺激作用，由此推測與Gardiner等 [16-17]結(jié)論不一致的原因是地域因素。氨基酸作為氮源，可以強烈刺激禾谷鐮刀菌中Tri5基因的表達，從而促使禾谷鐮刀菌增加DON毒素的產(chǎn)生[19]。氨基酸作為氮源可以刺激禾谷鐮刀菌產(chǎn)DON毒素，本試驗中硝酸鈉作為禾谷鐮刀菌的氮源時，對禾谷鐮刀菌生長的促進作用強于谷氨酸、酪氨酸，但對禾谷鐮刀菌產(chǎn)毒性的促進作用卻弱于二者。

單端孢霉烯毒素是最常見的禾谷鐮刀菌毒素，單端孢霉烯產(chǎn)物的丟失不會影響病菌侵染小麥或玉米的能力，但它會影響病菌對寄主植物的整個侵染過程，說明單端孢霉烯族毒素在小麥和玉米上是影響侵染進程的致病力因子[20-24]。本試驗結(jié)果表明賴氨酸作為禾谷鐮刀菌的生長氮源時，可以促進其DON毒素的產(chǎn)生，而DON毒素為莖腐病的致病性因子，DON毒素含量增加，會導致禾谷鐮刀菌的致病性增強，從而誘導莖腐病病害發(fā)生。

禾谷鐮刀菌的主要產(chǎn)毒類群有3類：3-AcDON型、15-AcDON型、NIV型。3-AcDON型、15-AcDON型可產(chǎn)生DON毒素，NIV型可以產(chǎn)生雪腐鐮刀菌烯醇（NIV）。DON型群體比NIV型群體產(chǎn)生的毒素多，對寄主植物的侵染率高，致病力強;3-AcDON型群體比15-AcDON型產(chǎn)生的毒素多[25-29]。在侵染植物寄主時，DON毒素的毒力強于NIV毒素，說明DON毒素是導致植株感病的主要毒素。本試驗結(jié)果證明賴氨酸不僅能促進禾谷鐮刀菌生長，而且促使其DON毒素產(chǎn)生。如果土壤環(huán)境中存在過多的賴氨酸，會加快禾谷鐮刀菌的生長及其DON毒素的產(chǎn)生。DON毒素作為莖腐病的主要致病因子，在土壤環(huán)境下過多的存在，會提高病原菌侵染植株、定殖寄主植物的能力，從而誘導莖腐病發(fā)生。

本試驗結(jié)果證明，5種氨基酸作為唯一氮源時，對禾谷鐮刀菌生長的作用順序為賴氨酸>谷氨酸>酪氨酸>纈氨酸>蛋氨酸，對禾谷鐮刀菌產(chǎn)DON毒素的作用順序為賴氨酸>酪氨酸>谷氨酸>纈氨酸>蛋氨酸，并且促進效果隨著氨基酸添加量的增加而增大。賴氨酸作為唯一氮源時，對禾谷鐮刀菌的生長和產(chǎn)毒作用顯著，能提高病原菌的侵染、定殖寄主植物的能力，從而誘導莖腐病的發(fā)生。

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（責任編輯：張震林）