◎倪洪杰
食品著色劑主要包括天然色素和人工合成色素兩個大類,天然色素主要是從動植物和微生物制取的,安全性較高,但是穩(wěn)定性和著色力一般低于合成品,目前很難滿足日益發(fā)展的食品工業(yè)的需要;人工合成的色素,主要來源于煤焦油及其副產(chǎn)品,資源十分豐富、穩(wěn)定性較好、價格可接受、使用時方便、應(yīng)用較為廣泛。而人工合成色素有一定的毒性,具有較大的安全隱患,有一定的人身安全風(fēng)險,必須嚴(yán)格控制其使用范圍和使用數(shù)量和操作環(huán)境。目前,我國允許使用的合成色素主要有莧菜紅、檸檬黃、赤蘚紅、日落黃、胭脂紅、亮藍(lán)、靛藍(lán)等,這些合成色素都溶于水。
食品著色劑的測定一般是針對合成色素,測定方法主要是高效液相色譜法和深層色譜法等。本文主要就高效液相色譜法測定合成著色劑進(jìn)行研究如下:
1.正己烷,鹽酸,乙酸。
2.甲醇:經(jīng)0.5μm濾膜過濾。
3.聚酰胺粉(尼龍 6):過 200 目篩。
4.乙酸銨溶液(0.02mol/L):稱取 1.54g乙酸銨,加水至1000mL,溶解,經(jīng)0.45μm濾膜過濾。
5.氨水。量取氨水2mL,加水至100mL,混勻。
6.氨水—乙酸銨溶液(0.02mol/L量取氨水0.5mL),加乙酸銨溶液(0.02mol/L至1000mL),混勻。
7.甲醇—甲酸(6+4)溶液。量取甲醇60mL,甲酸 40mL,混勻。
8.檸檬酸溶液。稱取20g檸檬酸(C6H8O7·H2O),加水至 100mL,溶解混勻。
9.無水乙醇—氨水—水(7+2+1)溶液:量取無水乙醇70mL、氨水20mL、水10mL,混勻。
10.三正辛胺正丁醇溶液(5%)。量取三正辛胺5mL,加正乙醇100mL,混勻。
11.飽和硫酸鈉溶液,硫酸鈉溶液(2g/L)。
12.pH為6的水。水加檸檬酸溶液調(diào)pH到6。
13.合成著色劑標(biāo)準(zhǔn)溶液。準(zhǔn)確稱取按其純度折算為100%質(zhì)量的檸檬黃、日拓黃、莧菜紅、胭脂紅、新紅、赤蘚紅、亮藍(lán)、靛藍(lán)各0.100g,置100mL容量瓶中,加pH為6的水到刻度,配成水溶液。
14.合成著色劑標(biāo)準(zhǔn)使用液。使用時,溶液加水稀釋20倍,經(jīng)0.45μm濾膜過濾,配成每毫升相當(dāng)于50.0μg的合成著色劑。
高效液相色譜儀,帶紫外檢測器,254nm波長。
1.樣品處理方法。
第一,橘子汁、果昧水、果子露汽水等,稱取20.0g~40.0g,放入100mL燒杯中,把含二氧化碳樣品加熱驅(qū)除二氧化碳:
第二,配制酒類。稱取20.0g~40.0g,放置在100mL燒杯中,加小碎瓷片幾片,加熱以驅(qū)除乙醇。
第三,硬糖、蜜餞類、淀粉軟糖等。稱5.00g-10.00g粉碎樣品,放入100mL小燒杯中,加水30mL,溫?zé)崛芙?,如果樣品溶液pH較高,用檸檬酸溶液調(diào)pH到6左右。
第四,巧克力豆及著色糖衣制品。稱5.00g-10.00g,放入100mL小燒杯中,用水反復(fù)洗滌色素,到樣品無色素時止,合并色素漂洗液為樣品溶液。
2.色素提取方法。
第一,聚酰胺吸附法。
第二,液一液分配法(適用于含赤蘚紅的樣品)。
3.高效液相色譜的參考條件。
第一,柱。YWG-C1810μm不銹鋼柱4.6mm(1、d)×250mm.
第二,流動相。甲醇—乙酸鐵溶液(pH-4,0.02mol/L)。
第三,梯度洗脫:甲醇:20%-35%,3%/min;35%-98%,9%/min;98%繼 續(xù)6min。
第四,流速:1mL/min。
第五,紫外檢測器,254nm波長。
4.食品著色劑含量的測定方法。
取相同體積樣液和合成著色劑標(biāo)準(zhǔn)使用液,分別注入高效液相色譜儀,保留時間定性。