申修賢 黃純楊 于曉飛 商勝華 王秀琴 王小彥 劉明宏 楊茂發(fā)

摘? 要：為篩選出對(duì)食蚜癭蚊安全的生物農(nóng)藥，選用5種常用的生物農(nóng)藥對(duì)煙蚜及食蚜癭蚊幼蟲（噴霧法）和食蚜癭蚊成蟲（藥膜法）進(jìn)行了毒力測(cè)定和安全性評(píng)估。結(jié)果表明，無(wú)論處理24 h還是48 h，對(duì)煙蚜毒力較高的是甲維鹽和苦參堿，LC₅₀分別為2.166和3.695 mg/L（24 h），1.567和2.874 mg/L（48 h）;對(duì)食蚜癭蚊幼蟲的毒力較高的是魚藤酮，LC₅₀為18.137 mg/L（24 h）、13.771 mg/L（48 h），對(duì)成蟲的毒力較高的是多殺菌素，LC₅₀為7.249 mg/L（24 h）、4.125 mg/L（48 h）。因此5種生物農(nóng)藥中苦參堿、甲維鹽、蘇云金桿菌對(duì)煙蚜和食蚜癭蚊的選擇性較高，適宜在田間與食蚜癭蚊聯(lián)合應(yīng)用防控?zé)熝痢?/p>

關(guān)鍵詞：煙蚜;食蚜癭蚊;生物農(nóng)藥;毒力測(cè)定;安全性評(píng)價(jià)

Safety Evaluation and Toxicity Determination of 5 Biopesticides toMyzus persicae（Sulzer） andAphidoletes aphidimyza?（Rondani）

SHEN Xiuxian¹， HUANG Chunyang²， YU Xiaofei³， SHANG Shenghua⁴，

WANG Xiuqin¹， WANG Xiaoyan²， LIU Minghong^2*， YANG Maofa^1，3*

（1. Institute of Entomology of Guizhou University， Provincial Key Laboratory for Agricultural Pest Management of the Mountainous Regions， Guiyang 550025， China; 2. Guizhou Tobacco Company， Zunyi Branch Company， Zunyi， Guizhou 563000， China; 3. College of Tobacco Science of Guizhou University， Guiyang 550025， China; 4. Guizhou Academy of Tobacco Sciences， Guiyang 550081， China）

Abstract： To screen for biopesticides safe toAphidoletes aphidimyza（Rondani） in tobacco fields， the toxicities of five kinds of biopesticides againstMyzus persicae， as well as three instars larvae （spray method） and adults ofA. aphidimyza?were evaluated. The results showed that the highest toxicity onM. persicaewas from emamectin benzoate and matrine both at 24 h and 48 h after treatment， with LC₅₀2.166 and 3.695 mg/L （24 h）， 1.567 and 2.874 mg/L （48 h）， respectively. The highest toxicity on larva ofA. aphidimyzawas from rotenone， with LC₅₀18.137 mg/L （24 h） and 13.771 mg/L （48 h）. The highest toxicity on adults ofA. aphidimyzawas from spinosad， with LC₅₀7.249 mg/L （24 h） and 4.125 mg/L （48 h）. Therefore， matrine， emamectin benzoate andBacillus thuringgiensisin the five biological pesticides have higher selectivity toM. persicaeandA. aphidimyza， so they are suitable for the combined application of biopesticides andA. aphidimyza?in the field to controlM. persicae.

Keywords：Myzus persicae（Sulzer）;Aphidoletes aphidimyza（Rondani）; biopesticides; toxicity; safety evaluation

煙蚜Myzus persicae（Sulzer），屬半翅目，蚜科，又名桃蚜、桃赤蚜，是一種重要的刺吸類害蟲，其寄主范圍廣，可以危害茄科、十字花科、豆科等50多科400多種植物^[1]，煙蚜以群集方式刺吸植物汁液，不但造成植物的營(yíng)養(yǎng)缺乏與組織破壞，嚴(yán)重時(shí)可使植物死亡^[2]，而且煙蚜及其分泌物還會(huì)導(dǎo)致多種植物病毒，嚴(yán)重為害農(nóng)作物^[3-4]，每年桃蚜為害帶來(lái)的經(jīng)濟(jì)損失為10%～15%，嚴(yán)重時(shí)達(dá)50%～80%^[5]。

生物農(nóng)藥和天敵昆蟲是防控?zé)熝恋闹匾胧?/p>

利用白僵菌、青霉菌、蘇云金桿菌、阿維菌素等微生物源生物農(nóng)藥對(duì)煙蚜有很好防治效果^[6-10]，利用苦參堿、魚藤酮、印楝素、百部-川楝-苦參堿等植物源生物農(nóng)藥對(duì)煙蚜也有很好的控制作用^[11-18]。利用天敵昆蟲防治煙蚜同樣具有很好的控制效果^[19-22]，其中食蚜癭蚊Aphidoletes aphidimyza（Rondani）作為蚜蟲的捕食性天敵，其幼蟲能取食80多種蚜蟲^[23-25]，尤其對(duì)煙蚜有很好的控制作用，1頭幼蟲一生可捕食28頭小桃蚜^[26]，1頭3齡幼蟲對(duì)煙蚜最大日捕食量為10頭^[27]。在蔬菜溫室、拱棚、大棚內(nèi)以1∶20的益害比釋放食蚜癭蚊成蟲，10 d后單株煙蚜量減退80%以上^[25]。在煙田以1：15的益害比釋放2次食蚜癭蚊蛹，可以達(dá)到64%的防治效果^[28]。與其他天敵相比，食蚜癭蚊具有獨(dú)特優(yōu)點(diǎn)：繁殖、搜索和分散能力強(qiáng);對(duì)蚜蟲不但有取食作用，而且還有殺傷作用;適宜大批量繁殖，易于貯存和運(yùn)輸，便于生產(chǎn)應(yīng)用等^[29-30]。

由于任何防控措施均有各自的優(yōu)點(diǎn)和不足，聯(lián)合防控在害蟲的防治實(shí)踐中就越來(lái)越受到重視，特別是生物農(nóng)藥與天敵昆蟲的聯(lián)合防控。但若長(zhǎng)期不正當(dāng)使用生物農(nóng)藥會(huì)降低天敵昆蟲的防治效果^[14-16]。因此本文選用常用的5種生物農(nóng)藥，測(cè)定其對(duì)煙蚜以及煙蚜的捕食性天敵食蚜癭蚊的毒力，評(píng)價(jià)其對(duì)食蚜癭蚊的安全性，以期為煙田利用食蚜癭蚊和生物農(nóng)藥聯(lián)合防控?zé)熝恋奶峁┘夹g(shù)指導(dǎo)。

1? 材料與方法

1.1? 試驗(yàn)材料

1.1.1? 供試?yán)ハx ?在遵義市鳳岡縣煙草天敵昆蟲繁育中心，于人工氣候室中，飼養(yǎng)食蚜癭蚊、煙蚜3代以上，備用。

1.1.2? 人工氣候室? 溫度（24±0.5） ℃、光周期L∶D=16 h∶8 h、相對(duì)濕度65%±5%。

1.1.3 ?供試藥劑? 70%甲維鹽、98%魚藤、50000 Iu/mg蘇云金桿菌（中山凱中有限公司），98%苦參堿、99%多殺菌素（江蘇長(zhǎng)青農(nóng)化股份有限公司），丙酮（分析純，汕頭市西隴化工有限公司）。

用適量的丙酮（1 g/L）將各生物農(nóng)藥原藥配成以下相應(yīng)的5個(gè)濃度梯度（表1），按照該生物農(nóng)藥對(duì)煙草害蟲的田間推薦使用量計(jì)算而得。

1.2? 試驗(yàn)方法

1.2.1?? 生物農(nóng)藥對(duì)煙蚜的毒力測(cè)定 ?采用噴霧法

進(jìn)行測(cè)定。挑選體型一致的3～4齡無(wú)翅煙蚜，分別將不同濃度梯度的藥劑噴灑于帶蚜煙葉的正反兩面，靜置1 min;接入事先放入新鮮煙草葉片（60 mm×60 mm）的布丁盒中，煙葉下方放置濕潤(rùn)的吸水紙用于保濕。每盒煙蚜蟲數(shù)為25頭，4次重復(fù)。以清水噴霧的煙蚜處理為對(duì)照，蓋上帶孔的蓋子（用昆蟲1號(hào)針均勻扎9個(gè)孔）。置于人工氣候室，分別于24 h和48 h后統(tǒng)計(jì)煙蚜的死亡數(shù)，在視頻顯微鏡下觀察，以小毛筆輕觸無(wú)任何部位活動(dòng)作為死亡標(biāo)準(zhǔn)。

1.2.2? 生物農(nóng)藥對(duì)食蚜癭蚊3齡幼蟲的毒力測(cè)定 ?采用噴霧法進(jìn)行測(cè)定。對(duì)帶有食蚜癭蚊幼蟲的煙苗分別噴施不同濃度藥液，然后挑選體型一致的浸藥食蚜癭蚊3齡幼蟲，按照每盒25頭的標(biāo)準(zhǔn)，分別放入布丁盒內(nèi)，蓋上帶孔的蓋子（用昆蟲1號(hào)針均勻扎9個(gè)孔）。以噴施清水的相同數(shù)量食蚜癭蚊幼蟲為對(duì)照。每處理4次重復(fù)。置于人工氣候室，分別于24 h和48 h后統(tǒng)計(jì)食蚜癭蚊幼蟲的死亡數(shù)，在視頻顯微鏡下觀察，以小毛筆輕觸無(wú)任何部位活動(dòng)作為死亡標(biāo)準(zhǔn)。

1.2.3?? 生物農(nóng)藥對(duì)食蚜癭蚊成蟲的毒力測(cè)定 ?采用藥膜法進(jìn)行測(cè)定。用小型滴管吸取足量的藥劑注入玻璃試管中，搖勻后倒出多余的藥劑，待藥劑充分形成藥膜后，挑選同一天羽化的體型一致的食蚜癭蚊成蟲10頭放入其中，每處理重復(fù)5次;空白對(duì)照為清水。并用少量10%蜂蜜水濕潤(rùn)脫脂棉團(tuán)封好管口，然后置于人工氣候室。分別于24 h和48 h后統(tǒng)計(jì)食蚜癭蚊成蟲的死亡數(shù)，日光照射下輕敲試管不動(dòng)即判定食蚜癭蚊死亡。

1.3? 數(shù)據(jù)分析

1.3.1 ?毒力回歸方程? 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel 2010統(tǒng)計(jì)，使用SPSS 24.0軟件擬合毒力回歸方程，計(jì)算5種生物農(nóng)藥對(duì)煙蚜及食蚜癭蚊的LC₅₀值。煙葉生產(chǎn)中常用苦參堿來(lái)防治煙蚜，故以苦參堿對(duì)食蚜癭蚊的LC₅₀值為參考標(biāo)準(zhǔn)，相對(duì)毒力指數(shù)為1。

相對(duì)毒力指數(shù)=測(cè)試藥劑LC₅₀/苦參堿LC₅₀值。

1.3.2 ?安全性評(píng)價(jià)? 以各種生物農(nóng)藥的田間推薦使用有效濃度與食蚜癭蚊致死中濃度LC₅₀相比，求得安全系數(shù)^[31]，安全系數(shù)（t）=天敵的LC₅₀/田間推薦使用有效濃度。t≤0.05為極高風(fēng)險(xiǎn)性生物農(nóng)藥;0.05<t≤0.5為高風(fēng)險(xiǎn)性生物農(nóng)藥;0.5<t≤5為中等風(fēng)險(xiǎn)性生物農(nóng)藥;t>5為低風(fēng)險(xiǎn)性生物農(nóng)藥。

以毒性選擇指數(shù)評(píng)價(jià)各生物農(nóng)藥對(duì)食蚜癭蚊的安全性^[32]。毒性選擇指數(shù)（STR）為生物農(nóng)藥對(duì)天敵的致死中濃度（LC₅₀）與對(duì)害蟲的致死中濃度（LC₅₀）的比值，即：毒性選擇指數(shù)（STR）=天敵的LC₅₀/害蟲的LC₅₀。毒性選擇指數(shù)的值STR≤1時(shí)，則表明該生物農(nóng)藥對(duì)食蚜癭蚊的毒性比煙蚜更高，屬于非選擇性農(nóng)藥;毒性選擇指數(shù)的值STR>1時(shí)，則表明該生物農(nóng)藥對(duì)食蚜癭蚊的毒性比煙蚜更低，屬于選擇性農(nóng)藥。

2? 結(jié)? 果

2.1 ?5種生物農(nóng)藥對(duì)煙蚜的毒力

5種生物農(nóng)藥對(duì)煙蚜的毒力測(cè)定結(jié)果如表2所示。當(dāng)浸藥24 h時(shí)，對(duì)煙蚜毒力大小次序?yàn)椋杭拙S鹽>苦參堿>蘇云金桿菌>多殺菌素>魚藤酮，其中甲維鹽對(duì)煙蚜的毒力最高，LC₅₀為2.166 mg/L，魚藤酮對(duì)煙蚜的毒力最低，LC₅₀為21.541 mg/L，其相對(duì)毒力指數(shù)是甲維鹽的9.947倍。48 h時(shí)，對(duì)煙蚜毒力大小次序與24 h相同，其中甲維鹽對(duì)煙蚜的毒力最高，LC₅₀為1.567 mg/L，魚藤酮對(duì)煙蚜的毒力最低，LC₅₀為15.131 mg/L。較24 h相比，甲維鹽毒力上升了27.65%，魚藤酮毒力上升了29.76%。5種生物農(nóng)藥隨著時(shí)間的延長(zhǎng)對(duì)煙蚜的毒力都有一定程度的增強(qiáng)。

2.2? 5種生物農(nóng)藥對(duì)食蚜癭蚊幼蟲的毒力

結(jié)果如表3所示。當(dāng)浸藥24 h時(shí)，所選藥劑對(duì)食蚜癭蚊幼蟲的毒力大小次序?yàn)椋呼~藤酮>多殺菌素>苦參堿>蘇云金桿菌>甲維鹽，敏感性水平依次減弱。其中魚藤酮對(duì)食蚜癭蚊幼蟲的毒力最高，LC₅₀為18.137 mg/L，相對(duì)毒力指數(shù)最小為0.900;甲維鹽對(duì)食蚜癭蚊幼蟲的相對(duì)毒力指數(shù)最大為1.093，對(duì)應(yīng)的LC₅₀為22.014 mg/L。48 h時(shí)，對(duì)食蚜癭蚊幼蟲毒力大小次序：多殺菌素>魚藤酮>苦參堿>蘇云金桿菌>甲維鹽。其中多殺菌素對(duì)食蚜癭蚊幼蟲的毒力超過(guò)了魚藤酮，即多殺菌素對(duì)食蚜癭蚊幼蟲的毒力最高，LC₅₀為13.606 mg/L，甲維鹽對(duì)食蚜癭蚊幼蟲的毒力最低，LC₅₀為15.975 mg/L。隨著時(shí)間的增加，食蚜癭蚊幼蟲對(duì)5種生物農(nóng)藥的敏感性均增加。

2.3? 5種生物農(nóng)藥對(duì)食蚜癭蚊成蟲的毒力測(cè)定

如表4所示。處理時(shí)間不同，食蚜癭蚊成蟲對(duì)生物農(nóng)藥的敏感性不相同。處理24 h時(shí)，食蚜癭蚊成蟲對(duì)5種生物農(nóng)藥的敏感性依次為：多殺菌素>魚藤酮>甲維鹽>蘇云金桿菌>苦參堿。毒性最大的為多殺菌素，其LC₅₀為7.249 mg/L。最低的是苦參堿，LC₅₀為14.408 mg/L。處理 48 h 時(shí)，甲維鹽對(duì)食蚜癭蚊成蟲的毒力超過(guò)了魚藤酮，較24 h相比，甲維鹽毒力上升了49.32%。隨著時(shí)間的增加，5種生物農(nóng)藥對(duì)食蚜癭蚊成蟲的毒性均有增加。

2.4? 5種生物農(nóng)藥對(duì)食蚜癭蚊幼蟲和成蟲的安全性評(píng)價(jià)

從5種生物農(nóng)藥有效田間濃度對(duì)食蚜癭蚊的安全系數(shù)來(lái)看（表5、6），蘇云金桿菌和甲維鹽對(duì)食蚜癭蚊幼蟲安全性最高，安全系數(shù)分別為2.766～4.149和7.862～10.483（24 h）、2.215～3.190和5.705～7.607（48 h）;對(duì)癭蚊成蟲安全性較高的是甲維鹽、苦參堿，分別為1.470～2.450和4.099～5.466（24 h）、1.118～1.864和2.078～2.270（48 h）。從5種生物農(nóng)藥有效田間濃度對(duì)食蚜癭蚊的毒性選擇指數(shù)來(lái)看（表5、6），苦參堿、甲維鹽對(duì)食蚜癭蚊幼蟲選擇性毒力指數(shù)較高，分別為5.452、10.163（24 h）和5.412、10.195（48 h）;24 h時(shí)，苦參堿、甲維鹽對(duì)食蚜癭蚊成蟲的選擇性毒力指數(shù)較高，分別為3.889、5.299（24 h）;48 h時(shí)，對(duì)食蚜癭蚊成蟲的選擇性毒力指數(shù)較高的是苦參堿、蘇云金桿菌，分別為3.814、2.272（48 h）。

結(jié)合安全系數(shù)和毒性選擇指數(shù)的結(jié)果表明，甲維鹽、苦參堿、蘇云金桿菌對(duì)食蚜癭蚊安全。

3? 討? 論

苦參堿和魚藤酮屬于植物源生物農(nóng)藥，主要用于防治蚜蟲和鱗翅目害蟲^[33-34]。多殺菌素、甲維鹽和蘇云金桿菌屬于農(nóng)用抗生素類生物農(nóng)藥，主要用于防治鱗翅目害蟲^[35]。煙田主要以煙蚜、小地老虎、煙青蟲和斜紋夜蛾等為主要害蟲^[36]，當(dāng)噴施低毒、高效的生物農(nóng)藥防治煙田主要害蟲時(shí)，是否會(huì)對(duì)煙蚜的天敵食蚜癭蚊造成影響，目前少有報(bào)道。本試驗(yàn)結(jié)果表明，苦參堿、魚藤酮、多殺菌素、甲維鹽、蘇云金桿菌5種生物農(nóng)藥對(duì)食蚜癭蚊的幼蟲和成蟲LC₅₀差異明顯，24 h時(shí)，魚藤酮對(duì)食蚜癭蚊幼蟲的殺傷力最大，相對(duì)毒力指數(shù)為0.900，這與尹園園等^[37]研究結(jié)果一致;多殺菌素對(duì)成蟲的毒性最大。有研究報(bào)道多殺菌素對(duì)小菜蛾的天敵菜蛾絨繭蜂有很強(qiáng)的毒性^[38]。蘇云金桿菌對(duì)煙蚜的防治效果不好，而報(bào)道蘇云金桿菌對(duì)小菜蛾有很好的防治^[39]，這可能是不同類型的動(dòng)物解毒機(jī)制不同，從而導(dǎo)致結(jié)果不同。但是無(wú)論是防治煙蚜還是防治小菜蛾，蘇云金桿菌對(duì)天敵昆蟲都是相對(duì)安全的，本研究結(jié)果也是。

由安全性系數(shù)可知，苦參堿、蘇云金桿菌安全系數(shù)為5>t>0.5是中等風(fēng)險(xiǎn)，甲維鹽的安全系數(shù)>5是低等風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)食蚜癭蚊影響較小。有研究報(bào)道苦參堿對(duì)蚜蟲有很好的防治效果，對(duì)天敵昆蟲也很安全^{[20-21，37]}。也有研究報(bào)道甲維鹽對(duì)花椒棉蚜有很好的防治效果^[40]，對(duì)異色瓢蟲的幼蟲、巴氏新小綏螨相對(duì)安全^[41]。伍紹龍等^[42]研究發(fā)現(xiàn)，甲維鹽對(duì)煙青蟲和斜紋夜蛾有很好的防治效果，但是對(duì)天敵蜘蛛、草蛉、隱翅蟲有抑制作用。與本研究結(jié)果不同，這可能是不同天敵對(duì)藥劑的敏感性不同。

本研究表明，5種生物農(nóng)藥對(duì)煙蚜毒力差異不同，無(wú)論24 h還是48 h，甲維鹽和苦參堿對(duì)煙蚜的毒力相對(duì)較高，食蚜癭蚊成蟲對(duì)多殺菌素最敏感，幼蟲對(duì)魚藤酮最敏感。本試驗(yàn)只考慮了食蚜癭蚊成蟲或高齡幼蟲，生物農(nóng)藥對(duì)其卵、蛹、低齡幼蟲的毒性大小以及后代種群的影響還需進(jìn)一步研究。

4? 結(jié)? 論

通過(guò)測(cè)定5種生物農(nóng)藥對(duì)煙蚜和食蚜癭蚊的毒力，評(píng)價(jià)了它們對(duì)食蚜癭蚊的安全性。結(jié)果表明，苦參堿、甲維鹽和蘇云金桿菌對(duì)食蚜癭蚊幼蟲和成蟲安全系數(shù)較高，屬于中等至低風(fēng)險(xiǎn)，且對(duì)煙蚜和食蚜癭蚊的選擇性較高，在田間可與食蚜癭蚊聯(lián)合應(yīng)用防控?zé)熝痢?/p>

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