金偉,朱磊,馬曉荷,汪敏,郭見多,張世清

氯硝柳胺是一種殺軟體動物劑，于1961年首次被合成生產(chǎn)，因其對血吸蟲中間寄主螺類的滅殺效果高效持久，且對哺乳動物毒性低而被廣泛深入應(yīng)用。氯硝柳胺是世界衛(wèi)生組織唯一推薦使用的殺釘螺劑，也是我國目前最常用的殺釘螺藥物[1]。氯硝柳胺對鯽魚、草魚、鰱魚等常見魚類的毒性極大。既往研究表明，草魚在氯硝柳胺0.227 6 mg/L 濃度以上，1 h 內(nèi)100%死亡，鰱魚在氯硝柳胺0.295 9 mg/L 濃度以上，1 h內(nèi)100%死亡[2]。目前安徽省有螺面積26 520.76 hm2，其中23 036.01 hm2為湖沼地區(qū)[3]，占全省有螺面積的86.7%。在湖沼地區(qū)開展藥物滅螺不可避免的造成魚類死亡。由于湖沼地區(qū)農(nóng)民有在野外水域放養(yǎng)鴨、鵝、番鴨等水禽的傳統(tǒng)，一些疫區(qū)農(nóng)民反映家鴨在食用被四聚·殺螺胺懸浮劑毒殺的魚后出現(xiàn)疑似中毒死亡現(xiàn)象。針對此類情況，我們在安徽省當(dāng)涂縣的試驗(yàn)現(xiàn)場開展了四聚·殺螺胺懸浮劑致死鯽魚對雛鴨的急性毒性試驗(yàn)，對食用四聚·殺螺胺毒殺魚類是否會導(dǎo)致雛鴨急性中毒進(jìn)行論證。

材料與方法

1試驗(yàn)材料

1.1生物試材試驗(yàn)中所用鯽魚為當(dāng)?shù)厮a(chǎn)市場采購體重30～50 g 之間的活體鯽魚，總數(shù)為150條。試驗(yàn)所用雛鴨為當(dāng)?shù)仫曫B(yǎng)場采購的生長時(shí)間滿60 d體重不超過1 200 g 的雛鴨，總數(shù)為20只。

1.2試驗(yàn)藥劑本次試驗(yàn)所用氯硝柳胺制劑為江蘇艾津農(nóng)化有限公司生產(chǎn)的26%四聚·殺螺胺，產(chǎn)品農(nóng)藥登記號為WP20110222，產(chǎn)品生產(chǎn)批號為2017021001?？瞻讓φ諡槊撀人?。

2試驗(yàn)方法

2.1試驗(yàn)環(huán)境本次試驗(yàn)選擇安徽省馬鞍山市當(dāng)涂縣湖陽鎮(zhèn)作為試驗(yàn)現(xiàn)場。在當(dāng)?shù)厥屎虊瓮膺x擇一處平坦空地制作圈養(yǎng)鐵籠并搭建簡易雨棚，對試驗(yàn)用雛鴨實(shí)施圈養(yǎng)。試驗(yàn)實(shí)施時(shí)間為2018年7～8月期間，試驗(yàn)期間的室外環(huán)境溫度為30 ～35℃，室外環(huán)境相對濕度40%～65%。

2.2試驗(yàn)用魚的分組處理從150條魚中挑選100條活力較好的隨機(jī)分為2 組，每組50條，分別作為試驗(yàn)組和對照組。試驗(yàn)開始前1 h將試驗(yàn)組的魚以氯硝柳胺有效成分濃度20 g/L 的四聚·殺螺胺懸浮液浸殺處死，并在處死后繼續(xù)在藥液中浸泡30 min以上，對照組魚采用離水后自然死亡的方式予以處死。兩組鯽魚在處理完畢后分別予以切碎并按照40 g 一份每組各稱取10份備用。

2.3試驗(yàn)實(shí)施將20只雛鴨隨機(jī)分為2 組，每組10 只并進(jìn)行編號，其中1～10 號為對照組，11～20號為試驗(yàn)組。由于家養(yǎng)雛鴨正常喂食規(guī)律為每日喂食三次，每次喂食的間隔時(shí)間約為6 h，因此本次試驗(yàn)在試驗(yàn)開始前6 h對試驗(yàn)用雛鴨予以禁食以確保試驗(yàn)時(shí)雛鴨有足夠進(jìn)食需求。在開始喂食碎魚肉前將兩組雛鴨分別稱重并記錄，之后按照試驗(yàn)組和對照組分別喂食相應(yīng)分組的碎魚肉，每只雛鴨喂食一份碎魚肉。喂食后再次禁食6 h。在禁食6 h期間觀察行為有無異常[4]。之后恢復(fù)正常喂食規(guī)律，每隔6 h以稻谷喂食一次，下午第三次喂食后夜間不予喂食。按需給食，喂食量至所有家鴨停止進(jìn)食為宜。試驗(yàn)從喂食魚肉起持續(xù)觀察168 h，每次喂食同時(shí)分別觀察兩組家鴨的行為、進(jìn)食及排便狀況。觀察滿168 h后對每組家鴨再次禁食6h，之后進(jìn)行稱重。對比兩組雛鴨試驗(yàn)168 h后的體重變化，初步判斷食用經(jīng)四聚·殺螺胺浸殺處死的鯽魚對雛鴨是否存在毒性。

3統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)使用WPS表格錄入計(jì)算機(jī)，分別計(jì)算試驗(yàn)前后兩組雛鴨的體重均數(shù)及體重增加值均數(shù)，使用t檢驗(yàn)分別對比兩組雛鴨試驗(yàn)前和試驗(yàn)后的體重狀況。

結(jié)果

1喂食后雛鴨行為觀察

喂食后6 h 期間分別對兩組雛鴨的活動狀況進(jìn)行觀察，均未發(fā)現(xiàn)活動異常。在禁食滿6 h 的首次喂食中，兩組雛鴨均表現(xiàn)出強(qiáng)烈食欲，進(jìn)食積極迅速。在之后每次喂食均對兩組雛鴨進(jìn)食情況進(jìn)行觀察，兩組雛鴨在試驗(yàn)后的6 h 到168 h 期間，每次喂食均表現(xiàn)積極迅速，未發(fā)現(xiàn)有厭食、喂食時(shí)不活動或行動遲緩等情況。兩組雛鴨在每次進(jìn)食后均正常排便，未觀察到不排便或大便性狀異常。

2兩組雛鴨的體重對比

在試驗(yàn)開始前和試驗(yàn)結(jié)束后分別對兩組雛鴨進(jìn)行稱重，并計(jì)算各試驗(yàn)對象個(gè)體在試驗(yàn)期間的體重增加值，結(jié)果見表1。

分別計(jì)算兩組雛鴨試驗(yàn)前和試驗(yàn)后的體重均數(shù)以及體重增加值均數(shù)，并對兩組雛鴨的三項(xiàng)均數(shù)進(jìn)行t檢驗(yàn)。結(jié)果顯示，試驗(yàn)組和對照組雛鴨在試驗(yàn)前體重均數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在試驗(yàn)后，其體重均數(shù)無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但是其體重增加值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，試驗(yàn)組體重增加值低于對照組。見表2。

表1試驗(yàn)組和對照組雛鴨試驗(yàn)前后的體重值(單位:g)

表2兩組雛鴨試驗(yàn)前后的體重對比

討 論

已有研究表明，氯硝柳胺乙醇胺鹽對雛鴨無急性毒性作用，對3 ～4 w 的雛鴨1 次口服劑量達(dá)到100 mg/只時(shí)并未出現(xiàn)臨床癥狀[5]。 吳月英等在施用氯硝柳胺的荒地中放養(yǎng)成年鴨子，經(jīng)2 個(gè)月持續(xù)觀察，鴨子未出現(xiàn)不良反應(yīng)[6]。 汪偉明[7]等對家鴨分別進(jìn)行了氯硝柳胺直接喂食和喂食氯硝柳胺毒殺死魚的試驗(yàn)，結(jié)果也未觀察到家鴨的急性中毒現(xiàn)象。

氯硝柳胺在中毒的魚體內(nèi)主要以氯硝柳胺原形、與氯硝柳胺結(jié)合的葡萄糖苷酸以及氯硝柳胺硫酸酯等形式存在[8]。 本次試驗(yàn)中，雛鴨在食用四聚·殺螺胺毒殺的鯽魚后6 h 內(nèi)未出現(xiàn)急性中毒癥狀，也未出現(xiàn)其它不良反應(yīng)。 在之后每次喂食的觀察中均表現(xiàn)出較強(qiáng)食欲，進(jìn)食積極快速，未出現(xiàn)厭食、活動力減弱或行動遲緩等癥狀；每次進(jìn)食后均正常排便，大便未見異常性狀。 試驗(yàn)觀察滿168 h 未見異常。據(jù)此結(jié)果可以認(rèn)為四聚·殺螺胺懸浮劑中氯硝柳胺及其它主要成分在魚體內(nèi)的各代謝產(chǎn)物對雛鴨不會造成急性中毒，該結(jié)論與既往研究基本一致。

本次試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)組雛鴨體重增長有所減緩，該結(jié)果與汪偉明[7]研究中觀察到的家鴨體重下降現(xiàn)象基本一致。 對于該現(xiàn)象，汪偉明認(rèn)為與氯硝柳胺的刺激性氣味影響家鴨食欲有關(guān)，對于該觀點(diǎn)筆者表示認(rèn)同。

綜上，通過本次研究，可以認(rèn)為四聚·殺螺胺毒殺的鯽魚不會造成雛鴨的急性中毒，但由于氯硝柳胺的氣味刺激等因素可能會造成雛鴨短期食欲下降并導(dǎo)致體重增長放緩。 由于本次研究重點(diǎn)關(guān)注急性毒性，因此未對兩組雛鴨進(jìn)行更長時(shí)間持續(xù)觀察，對于試驗(yàn)組雛鴨在試驗(yàn)結(jié)束后的長期體重增長情況尚缺乏觀察數(shù)據(jù)。 由于氯硝柳胺是一種對魚類和部分兩棲動物有較強(qiáng)毒性的滅螺藥，因此在滅螺工作中須謹(jǐn)慎控制施藥區(qū)域，避免過度施藥造成環(huán)境污染，也易造成滅螺工作與水產(chǎn)養(yǎng)殖的矛盾。