徐長斌 黎毅 胡玖和

【摘 要】目的：驗證某國產總蛋白測定試劑盒在貝克曼AU680全自動生化分析儀上的性能指標是否滿足臨床相關法規(guī)和產品說明書的要求。方法：參考WS/T420-2013文件制定性能驗證方案，對精密度（批內精密度和批間精密度）、正確度、線性范圍和參考區(qū)間進行驗證。結果：批內精密度為0.37%，批間精密度為0.81%，正確度相對偏差為0.88%，線性范圍為0～100.00g/L（r=0.9994），參考區(qū)間驗證結果顯示所選擇樣本均在參考值范圍之內。結論：所驗證國產總蛋白測定試劑盒性能指標能夠滿足臨床相關法規(guī)和產品說明書的要求，驗證通過。

【關鍵詞】總蛋白;精密度;正確度;線性范圍;參考區(qū)間

【中圖分類號】R318.6【文獻標識碼】A【文章編號】1005-0019（2020）06--01

血清總蛋白（Total Protein，TP）是指所有循環(huán)蛋白的總和，它是血液的主要成分，在機體中具有重要的生理功能。血清蛋白具有維持血液正常膠體滲透壓和PH、運輸多種代謝物、調節(jié)被運輸物質的生理作用、免疫作用以及營養(yǎng)作用等多種功能。疾病時體內蛋白質的結構、種類、含量、分布和功能均會發(fā)生變化，因此測定總蛋白對于涉及肝臟、腎臟或骨髓的各種疾病以及其它代謝和營養(yǎng)失調疾病的診斷和治療具有重要價值[1]。

近年來國內市場出現(xiàn)了多個廠家生產的國產總蛋白測定試劑盒，然而所用國產試劑盒在各實驗室全自動生化分析儀上的性能指標是否符合臨床相關法規(guī)和產品說明書的要求有待進一步驗證。依據WS/T 420-2013（臨床實驗室對商品定量試劑盒分析性能的驗證）文件的要求，臨床實驗室在使用新的體外診斷試劑盒之前，應對所選購的商品定量試劑盒進行檢查，以保證所選用的試劑盒達到臨床實驗室要求的臨床性能、分析性能、經濟性能等各方面的要求;其中，分析性能是這些要求中重要的一個方面，包括精密度、正確度、線性范圍和參考區(qū)間等指標[2-4]。本文試驗主要對某國產總蛋白測定試劑盒在貝克曼AU680全自動生化分析儀上的各項分析性能指標進行驗證，觀察其是否符合臨床相關法規(guī)和產品說明書的要求。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑 儀器：貝克曼AU680全自動生化分析儀;試劑：某國產總蛋白測定試劑盒與配套校準品。

1.2 方法

1.2.1 精密度 批內精密度驗證方案為使用一個濃度水平的質控品，采用同一試劑連續(xù)測定20次，計算測定結果變異系數CV，結果應符合試劑說明書的規(guī)定（CV≤4%）。批間精密度驗證方案為取一個濃度水平的質控品，每天測定四次，每次檢測之間間隔2小時，連續(xù)檢測5天，一共收集20個數據進行計算，計算CV，結果應符合試劑說明書的規(guī)定（CV≤6%）。

1.2.2 正確度 定值血清質控試驗，取一個濃度水平定值質控品連續(xù)監(jiān)測三次，計算均值與靶值的相對偏差（T%），結果應符合試劑說明書的規(guī)定（T%≤10%）。

1.2.3 線性范圍 取高濃度的總蛋白血清樣本，接近試劑盒線性范圍上限， 用生理鹽水按0、 1/8 、1/4 、1/2及原倍稀釋成5個稀釋濃度（Xi），每個濃度測定三次取平均值（i），除去離群值做補充試驗后，以稀釋濃度（Xi）為自變量，以檢測結果均值（i）為因變量求出線性回歸方程，計算相關系數（r）。判斷線性是否達到試劑說明書的要求（r≥0.9900）。

1.2.4 參考范圍 采集體檢正常人樣本20份，和常規(guī)方法一樣進行測定，檢測結果在參考區(qū)間（參考范圍：60-85g/L）之外的樣本應不超過2例。

2 驗證數據及結果

2.1 精密度 所選濃度水平質控樣本的批內CV值0.37%，小于4.0%;批間CV值0.81%，小于6.0%，符合說明書規(guī)定，驗證通過，結果如表1所示。

2.2 正確度 定值血清質控品測定均值與靶值的相對偏差為0.88%，小于10.0%，驗證通過，結果如表2所示。

2.3 線性范圍 以理論值（xi）作為自變量，以測定值（yi）作為因變量，得到線性回歸方程y =0.9977x+0.2798，相關系數r=0.9994>0.9900。相關系數符合試劑說明書規(guī)定，驗證通過，結果如表3所示。

2.4 參考范圍

所選擇20個樣本檢測結果如表4所示，超出參考區(qū)間的樣本數為1例，驗證通過。

3 討論

精密度，指在常規(guī)檢測條件下對同一待測物進行檢測所獲得結果的接近程度。精密度是衡量體外診斷試劑批內和批間變異的重要指標，通常包括批內和批間精密度。本文實驗結果顯示批內CV值為0.37%，符合廠家聲明批內CV≤4.0%，批間CV值為0.81%，符合廠家聲明批間CV≤6.0%。正確度，指多次測量結果的均值與真值之間的一致程度。正確度是檢驗科為臨床醫(yī)生與患者提供準確可靠檢驗結果的前提條件。本文實驗結果顯示正確度相對偏差為0.88%，符合廠家聲明的相對偏差≤10.0%的要求。線性范圍，是指系統(tǒng)最終的輸出值與被分析物的濃度或活性成比例的范圍。線性范圍的測量即測定濃度曲線接近直線的程度，它反映整個系統(tǒng)的輸出特性。本文實驗結果顯示線性范圍0-100g/L（r=0.9994），符合說明書上的1.4-100g/L（r≥0.9900）線性范圍要求。

綜上所述，該國產總蛋白測定試劑盒在檢驗科貝克曼AU680全自動生化分析儀上的精密度、正確度、線性范圍、參考區(qū)間性能指標均符合臨床相關法規(guī)和產品說明書的相關要求。說明該國產總蛋白檢測試劑盒，在檢驗科貝克曼AU680全自動生化分析儀上具有可靠的性能狀態(tài)，能為臨床醫(yī)生與患者提供準確可靠的總蛋白測定結果，更好的為臨床服務。

參考文獻

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