王蕊
(吉林省延吉市延邊中心血站,吉林 延吉 133000)
1.1 標(biāo)本來源于處理 研究過程中使用的樣本對象來自于2018年延邊無償獻(xiàn)血人員,在確定樣本之后,采取ELISA對血液樣本進(jìn)行處理,對于檢測過程中發(fā)現(xiàn)的不合格血液,進(jìn)行淘汰處理。檢測合格的血液樣本則繼續(xù)進(jìn)行核算檢測??紤]到核酸檢測的需求,對于相關(guān)樣本進(jìn)行無菌處理,并進(jìn)行4 h的離心處理,處理后,將標(biāo)本保存在4oC的環(huán)境之中。
1.2 試劑及儀器
1.2.1 檢測試劑 在整個(gè)檢測環(huán)節(jié),主要涉及到ELISA檢驗(yàn)方法,以及在此方法下所使用的的各類檢測試劑;相關(guān)抗原,抗-HCV(上??迫A有限公司和北京萬泰有限公司)和HIV(廈門新創(chuàng)有限公司和北京萬泰生物藥業(yè)公司4代),梅毒螺旋體抗體(上??迫A有限公司和廈門新創(chuàng)有限公司),丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶ALT(深圳邁瑞有限公司)。核酸檢測試劑HBV、HCV、HIV-1型由上海科華公司提供。
1.2.2 檢測儀器 在進(jìn)行相關(guān)檢驗(yàn)的過程中,根據(jù)不同的檢測項(xiàng)目,針對性地選擇相對應(yīng)的檢測設(shè)備,例如對于酶聯(lián)免疫檢測,選擇全自動(dòng)酶聯(lián)免疫分析設(shè)備,并在操作過程中,嚴(yán)格遵循相關(guān)要求,確保檢測質(zhì)效。核酸檢測:所用儀器上??迫A核酸檢測系統(tǒng);Hamilton TAR匯集提取儀ABI 7500實(shí)時(shí)熒光擴(kuò)增分析儀;全自動(dòng)脫蓋機(jī)。
1.3 方法
1.3.1 標(biāo)志物的ELISA法 分別使用兩個(gè)不同廠家的試劑,并由兩位不同的人員,根據(jù)試劑使用說明,進(jìn)行兩次檢測。其中對于酶聯(lián)免疫4項(xiàng)檢測,兩種試劑的檢測結(jié)果均顯示為陽性,具體來看,在使用單試劑進(jìn)行初次篩選的過程中,出現(xiàn)雙孔復(fù)試反應(yīng),反應(yīng)結(jié)果呈現(xiàn)為陽性。雙試劑檢測過程中,檢測結(jié)果為陰性。
1.3.2 HBV、HCV、HIV-1型核酸多人份檢測(NAT) 對于通過血清檢測的血液標(biāo)本進(jìn)行核酸檢測,在整個(gè)檢測環(huán)節(jié),待檢核算樣本應(yīng)當(dāng)放置于生物安全柜之中,借助于相關(guān)設(shè)備,對核酸進(jìn)行提取處理,在完成提取處理的基礎(chǔ)上,通過PCR法,對提取到的核算進(jìn)行擴(kuò)增處理,對于擴(kuò)增后的核算,進(jìn)行HBV、HCV和HIV3等項(xiàng)目的檢測。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 為確保研究結(jié)果的有效性,在整個(gè)研究過程中,使用SPSS 13.2數(shù)據(jù)處理軟件,對整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中獲取的數(shù)據(jù)信息進(jìn)行全面梳理以及檢驗(yàn)。
2017-2018 年無償獻(xiàn)血ELISA法檢測陰性NAT檢測陽性統(tǒng)計(jì)中,HBV檢出率較高,目前HCV、HIV檢出率低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表1。
表1 檢測結(jié)果
為進(jìn)一步提升臨床輸血的安全性,需要開展必要的血液篩查工作,通過篩查增強(qiáng)血液制品的安全系數(shù)以及臨床使用價(jià)值。ELISA檢測的是抗原抗體,其會(huì)造成病毒檢測的失效,無法滿足實(shí)際的輸血需求。從臨床來看,NAT具有極強(qiáng)的敏感性,通過NAT能夠?qū)ρ褐泻械牟《竞怂徇M(jìn)行準(zhǔn)確的檢測評估,縮短病毒檢測的周期,從而大大增強(qiáng)了整個(gè)檢測工作的準(zhǔn)確性以及有效性,避免了病毒隱秘的風(fēng)險(xiǎn),實(shí)現(xiàn)了遺漏項(xiàng)的科學(xué)高效排除。在這種情況下,不斷增強(qiáng)臨床輸血的安全性以及管理能力,從而有效阻斷各類血液性疾病的傳播路徑,構(gòu)建成熟高效的血液篩查機(jī)制,為各類臨床質(zhì)量工作的開展奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。