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      PCR技術(shù)在兒科支原體肺炎診斷中的應(yīng)用

      2020-04-11 14:14:50楊俠
      臨床檢驗(yàn)雜志(電子版) 2020年3期
      關(guān)鍵詞:支原體嬰幼兒陰性

      楊俠

      (河北省唐山市遷西縣計(jì)劃生育技術(shù)服務(wù)站,河北 唐山 064300)

      肺炎支原體是小兒肺炎的主要原因,也是非典型肺炎的主要病原體。MP肺炎作為非典型肺炎的一種,可導(dǎo)致多種并發(fā)癥,且無(wú)主要癥狀,給鑒別診斷帶來(lái)極大困難。因此,MP肺炎的早期診斷和治療,應(yīng)重點(diǎn)引起醫(yī)務(wù)工作者的重視。隨著技術(shù)的發(fā)展更新,近年來(lái)多種多樣的檢驗(yàn)方法出現(xiàn)在我們的視野,如分離培養(yǎng)法等各種方法。目前PCR技術(shù)檢測(cè)MP DNA已趨近成熟。我們對(duì)836例肺炎患兒采用咽拭子標(biāo)本法進(jìn)行MP DNA檢測(cè),同時(shí)用間接血凝實(shí)驗(yàn)(IHA)檢測(cè)血清抗MP-IgM。

      1 資料與方法

      1.1 一般資料 選取本院836例門(mén)診肺炎患兒,年齡分布如下:1-2歲233例,2-3歲212例,3-4歲225例,4歲以上166例。其中,400例為男性,436例為女性。正常對(duì)照組為300例。

      1.2 方法

      1.2.1 PCR 設(shè)置陰性組、陽(yáng)性組兩組對(duì)照組。操作嚴(yán)格依照說(shuō)明書(shū)指示。實(shí)驗(yàn)中在紫外透射反射儀下觀察擴(kuò)增產(chǎn)物電泳后反應(yīng),以144 bp處出現(xiàn)橙黃色帶或標(biāo)本擴(kuò)增帶與陽(yáng)性對(duì)照擴(kuò)增帶在同一水平位置判斷為陽(yáng)性。反之則為陰性。記錄兩組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

      1.2.2 IHA法 滴度≥1:32判斷為陽(yáng)性。

      2 結(jié)果

      2.1 正常對(duì)照組 300例健康嬰幼兒中5例血清抗MP-IgM結(jié)果為陽(yáng)性,陽(yáng)性率2.5%。50例血清抗MP-IgM陰性患者取咽拭子痰液樣本測(cè)MP DNA,結(jié)果亦均為陰性。

      2.2 檢測(cè)結(jié)果 見(jiàn)表1。

      2.3 陽(yáng)性病例相關(guān)資料

      2.3.1 一般資料 共選取43例,其中男性20例,女性23例。同時(shí),22例來(lái)自城市,其他來(lái)自農(nóng)村。在PCR法MPDNA陽(yáng)性和抗MP-IgM陽(yáng)性者均診斷為MP肺炎,占同期肺炎住院病例的5.1%。其中4歲以上15例,占1.8%;2-3歲的占比3.35%,為28例;1-2歲的占比1.4%,為12例。

      2.3.2 起病時(shí)間與檢測(cè)結(jié)果關(guān)系 研究發(fā)現(xiàn):PCR法能測(cè)定1周內(nèi)起病的病例,且效果顯著。

      2.3.3 病程與預(yù)后 本組病例預(yù)后良好,平均輸液天數(shù)為10d,僅5例治療周期時(shí)間超過(guò)2周以上。

      表1 PCR法MP DNA與IHA血清抗MP-IgM結(jié)果對(duì)比

      3 討論

      隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)的迅速發(fā)展,二胎政策的全面開(kāi)放,嬰幼兒的增多為無(wú)數(shù)家庭帶去了歡樂(lè),但同時(shí)帶來(lái)的龐大醫(yī)療壓力也不可忽視。近年來(lái),兒童疾病感染數(shù)量不斷增加,在這之中,肺炎支原體是學(xué)齡兒童呼吸道感染的重要病原體之一,而且危害較大,嚴(yán)重威脅嬰幼兒的健康。對(duì)于此類(lèi)疾病,能夠盡早進(jìn)行診斷和治療是醫(yī)務(wù)工作者義不容辭的使命。但目前,限于技術(shù)的普及和局限,支原體肺炎未能得到早且有效的治療。

      MP的培養(yǎng)過(guò)程缺點(diǎn)極多,性?xún)r(jià)比低。IHA法檢測(cè)抗體雖方法簡(jiǎn)便,但敏感性不夠,在臨床上應(yīng)用領(lǐng)域終究有限。以上種種問(wèn)題不能得到有效解決,以致其作為感染的早期診斷不夠使人滿(mǎn)意。在此之際,我們發(fā)現(xiàn)PCR技術(shù)具有強(qiáng)大的擴(kuò)增能力,有靈敏度高,特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。國(guó)內(nèi)外大量資料表明,利用PCR技術(shù)對(duì)MP DNA進(jìn)行檢測(cè)是MP感染的早期實(shí)驗(yàn)診斷的重要手段。

      通過(guò)本文的研究發(fā)現(xiàn)PCR技術(shù)確實(shí)是一種早期診斷的有效檢測(cè)方法,同時(shí)陽(yáng)性發(fā)現(xiàn)的時(shí)間差也向我們提示對(duì)于感染病程超過(guò)一周的患兒PCR并不是唯一選擇,但是病程一周內(nèi)的幼兒,PCR技術(shù)是最佳選擇。同時(shí),對(duì)于幼小嬰兒和免疫力低下的患兒,由于抗體不足,PCR法應(yīng)為首選最佳。本研究發(fā)現(xiàn)本市兒童支原體肺炎的感染狀況,占小兒肺炎的31.7%,而發(fā)病年齡趨向于嬰幼兒,3歲以下高達(dá)84%,需要得到重視和有效控制。

      研究中通過(guò)對(duì)結(jié)果分析,我們認(rèn)為兩種方法同時(shí)使用檢測(cè)精度更高,同時(shí)在健康幼兒的對(duì)照組中,MP的陽(yáng)性率也高達(dá)2.5%,表明健康兒童中也不乏有隱性感染的患兒。以上問(wèn)題,仍需我們繼續(xù)進(jìn)行研究、探索。

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