李麗
(思南縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,貴州 思南 565100)
抗核抗體也被稱為抗核酸抗原抗體,其主要由患者細(xì)胞內(nèi)的RNA、DNA和蛋白質(zhì)共同產(chǎn)生的一種自身抗體,其能夠?qū)Ω鞣N細(xì)胞核的組成成分進(jìn)行確定,從而有利于診斷各種自身免疫性疾病,在進(jìn)行抗核抗體診斷的過(guò)程中,部分免疫系統(tǒng)疾病的患者抗核抗體譜呈現(xiàn)陰性,從而導(dǎo)致診斷結(jié)果失誤的情況出現(xiàn),所以這就需要將抗核抗體與抗核抗體譜相聯(lián)合進(jìn)行檢測(cè),以更好的對(duì)患者病情進(jìn)行確定,提升預(yù)后效果。
1.1 患者資料 將2018年11月-2019年12月本院306例患者,其中男126例,女180例,年齡4-82歲,平均年齡49歲。
1.2 標(biāo)本采集 間接免疫熒光法(IIF)采用歐蒙抗核抗體IgG試劑盒,以Hep-2細(xì)胞和猴肝為抗原基質(zhì)??崭共杉谢颊叩撵o脈血3-5 mL,對(duì)其靜脈血進(jìn)行離心分離處理(每分鐘3000 r/min,離心10 min),當(dāng)日不能做的-20oC冰箱保存。
1.3 檢測(cè)方法 將血清樣本進(jìn)行稀釋,血清稀釋度為1:100、1:320、1:1000、1:3200設(shè)陰陽(yáng)性對(duì)照,用熒光顯微鏡觀察細(xì)胞和組織內(nèi)有無(wú)熒光,有熒光顯示滴度大于或等于1:100斷定為陽(yáng)性[2]。抗核抗體譜采用免疫印跡法(IBT)對(duì)特異性自身抗體進(jìn)行檢測(cè),試劑盒為歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷股份公司生產(chǎn),可檢測(cè)抗nRNP/Sm、Sm、SS-A、Ro-52、SS-B、ScI-70、PM-ScI、Jo-1、CENPB、PCNA、dsDNA、核小體、組蛋白、核糖體P蛋白、AMA-M2等15種不同抗原IgG類抗體。嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,用全自動(dòng)免疫印跡儀(EUROBlotMasterII)進(jìn)行掃描,并采用EUROLineScan軟件評(píng)價(jià)結(jié)果。
306 份血標(biāo)本中ANA檢測(cè)陽(yáng)性96例,陽(yáng)性率占31.37%(96/306)。熒光核型核顆粒型占37.50%(36/96),胞漿顆粒型占27.08%(26/96),核均質(zhì)型占14.58%(14/96),著絲點(diǎn)型占7.29(7/96),核仁型占5.21%(5/96),核周型占2.08%(2/96),具有2種核型的占6.25%(6/96),96例陽(yáng)性中1:100者32例,占33.33%%(32/96),1:320者36例,占37.50%(36/96),1:1000者20例,占20.83%(20/96),1:3200者8例(8/96),占8.33%。抗核抗體的滴度與抗核抗體譜及自身免疫性疾病例數(shù)的關(guān)系見(jiàn)表1。
306 份血標(biāo)本抗核抗體譜檢測(cè)陽(yáng)性80例,陽(yáng)性率為26.14%,(80/306),抗體單項(xiàng)陽(yáng)性占36.25%(29/80),抗體兩種及兩種以上陽(yáng)性率占63.75%(51/80),陽(yáng)性抗體居前的是抗SS-A抗體,抗Ro-52,抗Sm抗體。
306 份血標(biāo)本96例ANA陽(yáng)性中,ANAs陰性者16例(有3例臨床診斷為自身免疫性疾病,有13例患者經(jīng)長(zhǎng)期隨訪后確診為其他病癥,有4例患者為ANA陰性及ANAs陽(yáng)性,其中包括1例患者最終診斷為自身免疫性疾病,ANA和ANAs二者均為陽(yáng)性76例(有72例診斷為AID,4例患者診斷為其他疾病,96例患者中72例經(jīng)IIF檢驗(yàn)后確診為AID病癥,所占比例為75%,80例ANAs患者中有72例經(jīng)IBT檢驗(yàn)確診為AID,所占比例為90%,同時(shí)應(yīng)用兩種方式進(jìn)行檢驗(yàn)后,76例患者中有72例被確診為AID,所占比例為94.74%。
表1 抗核抗體與抗核抗體譜聯(lián)合及確診患者自身免疫性病癥情況分析
為保證有效篩查自身抗體,采用IIF法對(duì)抗核抗體進(jìn)行檢驗(yàn)是十分有效的,采用免疫熒光染色模型對(duì)患者自身抗原進(jìn)行鑒別也有利于鑒別患者病癥,因?yàn)榧?xì)胞具有較為復(fù)雜的內(nèi)部結(jié)構(gòu),再加之每種成分存在不同的抗原,抗核抗體與特異性自身抗體檢測(cè)方式相聯(lián)合,有利于對(duì)免疫性結(jié)締組織進(jìn)行有效診斷,且抗核抗體與特異性自身抗體可能存在于同一種免疫性阻止疾病之中,在健康人群或者非免疫系統(tǒng)病癥的患者中也可能存在一定的抗核抗體,而且自身抗體成分中,AID組成不同,最終導(dǎo)致特征性抗體譜的形成。檢測(cè)期間,自身抗體抗原的明確在檢測(cè)自身抗體特異性中具有積極作用。那么將抗核抗體與特異性自身抗體聯(lián)合進(jìn)行檢測(cè)就顯得十分重要。IBT法可根據(jù)組合內(nèi)容,一次性對(duì)諸多特異性抗體進(jìn)行檢測(cè),此外該方法優(yōu)點(diǎn)較多,包括操作簡(jiǎn)單、方便、快捷等。
綜上所述,AlD指的是患者機(jī)體受到多種作用影響,導(dǎo)致多器官功能性障礙,只有能夠合理對(duì)患者體內(nèi)的AID進(jìn)行檢驗(yàn),才能夠有效鑒別患者病癥,當(dāng)前臨床研究已經(jīng)正式通過(guò)檢驗(yàn)ANA和ANAs能夠診斷AID病癥,且ANA的臨床檢驗(yàn)敏感程度更高,只能作為篩查試驗(yàn),而ANAs特異性高,兩者聯(lián)合檢測(cè)在AID診斷中具有一定互補(bǔ)性,可減少漏診或誤診。但要注意二者均為非特異性指標(biāo),檢測(cè)結(jié)果需結(jié)合臨床癥狀及其他檢測(cè)綜合分析,才能作出正確判斷。