黑苦蕎黃酮提取工藝及其膠囊制備研究

葛瑞宏，李鵬沖，王 永，王法云，王 慧

（1.上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院公共衛(wèi)生學(xué)院，上海市轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)協(xié)同創(chuàng)新中心-食品安全與毒理學(xué)評(píng)價(jià)中心，上海 200025；2.河南省商業(yè)科學(xué)研究所有限責(zé)任公司，河南鄭州 450002）

0 引言

苦蕎麥（學(xué)名韃靼蕎麥） 屬于蓼科蕎麥屬，是一種獨(dú)特的藥食兩用的糧食作物，在歐亞很多國(guó)家具有多年食用歷史。近年來(lái)，由于其頗高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值引起人們?cè)絹?lái)越多的關(guān)注[1-2]。苦蕎麥中富含蛋白質(zhì)、膳食纖維、抗性淀粉、不飽和脂肪酸、必需氨基酸、維生素、礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)成分[3-5]，活性成分中富含人體不能合成的蘆丁、槲皮素等黃酮類化合物[6-7]，并被認(rèn)為是蘆丁、槲皮素的天然主要來(lái)源之一[8]?？嗍w又分為黑苦蕎和黃苦蕎，黑苦蕎中的蘆丁含量是黃苦蕎的3～5倍[9]。國(guó)內(nèi)外大量試驗(yàn)研究結(jié)果表明，苦蕎黃酮具有輔助降血糖功能，且黑苦蕎黃酮提取率明顯高于黃苦蕎。張?jiān)录t等人[10]通過(guò)體外試驗(yàn)和體內(nèi)試驗(yàn)證明，苦蕎乙醇提取物可降低餐后血糖，可能與其抑制α-葡萄糖苷酶活性有關(guān)。劉薇芝等人[11]研究表明，苦蕎黃酮提取物可降低Ⅱ型糖尿病模型大鼠血糖與血脂水平。鮑濤[12]研究結(jié)果顯示，苦蕎黃酮對(duì)db/db小鼠的糖耐量和胰島素耐量有顯著改善。徐玉潔[13]研究表明，苦蕎種子中性提取物可防治由鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的Ⅱ型糖尿病。薛長(zhǎng)勇[14]研究發(fā)現(xiàn)，苦蕎黃酮具有降低血糖及血脂的作用，其作用途徑可能是通過(guò)抑制糖苷酶、三酰甘油，激活過(guò)氧化物體增殖劑激活型受體γ和α而實(shí)現(xiàn)的。Dong Gi Lee等人[15]以db/db小鼠為試驗(yàn)對(duì)象，評(píng)價(jià)苦蕎乙醇提取物的降血糖功能，結(jié)果表明，服用苦蕎乙醇提取物的降糖效果與口服蘆丁作用相似，具有降血糖功能。

以云南昭通山區(qū)黑苦蕎為原料，以苦蕎黃酮作為功效成分，研制黑苦蕎膠囊保健食品，開(kāi)展功效成分黃酮提取工藝及產(chǎn)品劑型工藝研究，并對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

黑苦蕎，上海極蕎生物科技有限公司提供；蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品（≥98%，批號(hào)100080—201811），中國(guó)食品藥品檢定研究院提供；糊精、微晶纖維素、羧甲基纖維素鈉、預(yù)膠化淀粉、硬脂酸鎂（藥用級(jí)），安徽山河藥用輔料有限公司提供；無(wú)水乙醇，NaNO2，Al（NO3）3，NaOH，CH3COOK，MgCl2，K2CO3，NaBr，NaCl，KCl，KNO3等（分析純），國(guó)藥試劑（上海）有限公司提供；膠囊殼、乙醇（食品級(jí)），上海泰坦科技股份有限公司提供。

DF1000型手提式高速中藥材粉碎機(jī)，江陰市丫勻機(jī)械制造有限公司產(chǎn)品；SXT-06型索氏提取器，上海洪紀(jì)儀器設(shè)備有限公司產(chǎn)品；AB135-S型電子分析天平，上海梅特勒托利多儀器有限公司；Multiskan Spextrum型酶標(biāo)儀，賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司產(chǎn)品；RE-2000B型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器、DZF-6053型真空干燥箱、DHP-9082型電熱恒溫培養(yǎng)箱，上海一恒科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品；PL-810A型水分測(cè)試儀，上海品重檢測(cè)設(shè)備有限公司產(chǎn)品；JL-A3型粉體綜合特性測(cè)試儀，成都精新粉體測(cè)試設(shè)備有限公司產(chǎn)品；LB-2D型崩解儀，上海黃海藥檢儀器有限公司產(chǎn)品；THC-1型數(shù)顯溫濕度計(jì)，廣州樂(lè)享電子有限公司產(chǎn)品。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 黑苦蕎膠囊制備工藝流程

黑苦蕎→粉碎→乙醇回流提取→抽濾→真空濃縮→真空干燥→混合輔料→制?！z囊灌裝→成品。

1.2.2 操作要點(diǎn)

（1）原料處理。優(yōu)選云南山區(qū)黑苦蕎原料，清洗后烘干，粉碎、過(guò)篩。

（2）黑苦蕎黃酮提取制備。準(zhǔn)確稱取制備的黑苦蕎粉，按照一定料液比，使用乙醇溶液回流提取一定時(shí)間后，真空抽濾得苦蕎黃酮提取液。

（3）黑苦蕎黃酮粉制備。提取的黑苦蕎黃酮提取液真空濃縮后，60～80℃真空干燥至含水量低于6%，得到黑苦蕎黃酮粉。

（4）原輔料混合。以黑苦蕎黃酮粉為主要成分，按比例添加輔料，混合均勻。

（5）制粒、裝膠囊、包裝。將一定體積分?jǐn)?shù)的乙醇作為潤(rùn)濕劑加入到原料粉中進(jìn)行制粒。

用40目篩網(wǎng)制成濕顆粒，取40～60目的顆粒灌裝膠囊、包裝。

1.2.3 指標(biāo)測(cè)定

（1） 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作。采用亞硝酸鈉-硝酸鋁比色法測(cè)定苦蕎乙醇提取液中黃酮類化合物含量，以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品于波長(zhǎng)510 nm處測(cè)吸光度[16]。蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品100℃烘干至質(zhì)量恒定后，用體積分?jǐn)?shù)60%的乙醇配制成質(zhì)量濃度0.625 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。精確吸取該標(biāo)準(zhǔn)品 0，0.4，0.8，1.2，1.6，2.0，2.4 mL，置于25 mL具塞試管中，用60%乙醇定容至12.5 mL刻度，加入0.7 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%的NaNO2溶液，搖勻、靜置6 min，再加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%的 Al（NO3）3溶液 0.7 mL，搖勻、放置 6 min，加質(zhì)量分?jǐn)?shù)4%的NaOH溶液2 mL，用60%乙醇定容至刻度，搖勻、放置10 min后，以60%乙醇為空白對(duì)照，測(cè)定其在波長(zhǎng)510 nm處的吸光度。以標(biāo)準(zhǔn)液質(zhì)量濃度C（mg/mL） 為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性回歸方程Y=10.789X+0.094 8，R2=0.999 2（質(zhì)量濃度為 0.01～0.06 mg/mL）。

（2）總黃酮提取率測(cè)定。將苦蕎黃酮提取液定容后準(zhǔn)確移取1 mL置于25 mL具塞試管，按照標(biāo)準(zhǔn)曲線制作的方法測(cè)定其在波長(zhǎng)510 nm處的吸光度，總黃酮提取率按下式計(jì)算。

（3）吸濕率的測(cè)定。將底部盛有氯化鈉過(guò)飽和溶液的玻璃干燥器置于25℃的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)48 h，此時(shí)干燥器內(nèi)的相對(duì)濕度為75%。在已恒質(zhì)量的稱量瓶底部放入厚約2 mm的藥粉，準(zhǔn)確稱量后置于上述玻璃干燥器內(nèi)（稱量瓶蓋打開(kāi)）25℃保存，定時(shí)（4，8，24，48，72，96，120 h） 稱量，按下式計(jì)算吸濕率，并以吸濕率為縱坐標(biāo)，時(shí)間為橫坐標(biāo)作圖[17]。

（4）休止角測(cè)定。使用綜合粉體測(cè)試儀測(cè)定粉體休止角，考查其流動(dòng)性。讀出圓錐體的直徑和高度，計(jì)算出粉體的休止角（tgα=H/R），重復(fù)3次，取平均值[18]。以休止角來(lái)評(píng)價(jià)粉體的流動(dòng)性，一般認(rèn)為休止角大于40°時(shí)流動(dòng)性不好，休止角小于40°時(shí)可直接充填[19]。

（5）顆粒成型率測(cè)定。顆粒成型率為整粒后粒度在40～60目的顆粒占總顆粒的比例。制得的40～60目大小的顆粒數(shù)量占總顆粒數(shù)比例低于20%者為成型性差；高于20%而低于50%者為成型性一般；高于50%者為成型性好[20]。

（6） 堆密度的測(cè)定。采用量筒法，精密稱取3份一定量的黑苦蕎降血糖顆粒，將其置于10 mL的量筒中，輕輕敲打量筒的外壁，使顆粒均勻填充于量筒中，讀出體積并計(jì)算顆粒的堆密度。

（7）臨界相對(duì)濕度的測(cè)定。膠囊內(nèi)容物生產(chǎn)封裝過(guò)程中環(huán)境因素會(huì)直接影響產(chǎn)品的質(zhì)量，在生產(chǎn)過(guò)程中相對(duì)濕度是主要的影響因素，對(duì)膠囊內(nèi)容物通過(guò)平衡吸濕性試驗(yàn)，繪制吸濕平衡曲線，得到顆粒的臨界相對(duì)濕度，具體操作步驟如下：

取膠囊的填充物料顆粒6份，分別置于已干燥恒質(zhì)量的稱量瓶中，精密稱定；將稱量瓶在開(kāi)蓋狀態(tài)下，分別置于底部盛有7種飽和溶液的玻璃干燥器中，于不同濕度的干燥器中在25℃的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)放置96 h；取出稱量瓶加蓋精密稱定，計(jì)算顆粒的吸濕率；以吸濕率為縱坐標(biāo)，相對(duì)濕度為橫坐標(biāo)繪制曲線，分析得到顆粒的臨界相對(duì)濕度值，進(jìn)而確定生產(chǎn)環(huán)境的相對(duì)濕度[22-24]。

（8）水分測(cè)定。取黑苦蕎膠囊適量，傾出內(nèi)容物，混合均勻，取約1 g左右的顆粒置于快速水分測(cè)定儀中，測(cè)定內(nèi)容物的水分，每批次樣品測(cè)定3次，連續(xù)測(cè)定3個(gè)批次的樣品。

（9）裝量差異[25]。取3批黑苦蕎膠囊，每批樣品10粒，精密稱定各膠囊的質(zhì)量后，將內(nèi)容物傾出，操作過(guò)程不得損壞膠囊殼，并用小刷將膠囊殼刷凈，精密稱定囊殼質(zhì)量，計(jì)算出每粒內(nèi)容物的裝量，并將每粒裝量與平均裝量比較。

（10） 崩解時(shí)限[25]。根據(jù)中國(guó)藥典（2015版） 膠囊劑崩解時(shí)限的測(cè)定方法，測(cè)定3批黑苦蕎膠囊的崩解時(shí)限，每批樣品取6粒，置于崩解儀中測(cè)定。

1.2.4 工藝優(yōu)化試驗(yàn)

先通過(guò)單因素試驗(yàn)分別考查苦蕎粉粒徑、提取溶劑濃度、提取時(shí)間、提取溫度、料液比等因素對(duì)苦蕎總黃酮提取率的影響，再通過(guò)正交試驗(yàn)確定最佳工藝條件。

（1）苦蕎粉粒徑對(duì)總黃酮提取率的影響?？嗍w粉碎后，分別過(guò)80，100，120，140，160目篩網(wǎng)，收集不同粒徑的苦蕎粉，在提取溫度80℃，料液比1∶30（g∶mL），提取時(shí)間2.5 h的條件下，使用70%乙醇回流提取黃酮，考查苦蕎粉粒徑對(duì)總黃酮提取率的影響。

（2）乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)總黃酮提取率的影響。設(shè)置提取溫度80℃，料液比1∶30（g∶mL），提取時(shí)間2.5 h，分別用50%，60%，70%，80%，90%，100%體積分?jǐn)?shù)的乙醇對(duì)苦蕎黃酮進(jìn)行提取，考查不同乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)總黃酮提取率的影響。

（3）料液比對(duì)總黃酮提取率的影響。設(shè)置提取溫度80℃，乙醇體積分?jǐn)?shù)70%，提取時(shí)間2.5 h，料液比分別在 1∶10，1∶20，1∶30，1∶40，1∶50，1∶60（g∶mL） 的條件下對(duì)苦蕎黃酮進(jìn)行提取，考查不同料液比對(duì)總黃酮提取率的影響。

（4）提取時(shí)間對(duì)總黃酮提取率的影響。設(shè)置提取溫度80℃，乙醇體積分?jǐn)?shù)70%，料液比1∶30（g∶mL），分別對(duì)苦蕎黃酮進(jìn)行 1.5，2.0，2.5，3.0，3.5，4.0 h的提取，考查不同提取時(shí)間對(duì)總黃酮提取率的影響。

（5）提取溫度對(duì)總黃酮提取率的影響。設(shè)置料液比1∶30（g∶mL），乙醇體積分?jǐn)?shù)70%，提取時(shí)間2.5 h，分別在50，60，70，80，90℃提取溫度條件下對(duì)苦蕎黃酮進(jìn)行提取，考查提取溫度對(duì)總黃酮提取率的影響。

（6）苦蕎黃酮提取正交試驗(yàn)。在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)。

苦蕎黃酮提取工藝正交試驗(yàn)因素與水平設(shè)計(jì)見(jiàn)表1。

表1 苦蕎黃酮提取工藝正交試驗(yàn)因素與水平設(shè)計(jì)

（7）膠囊劑型中輔料的篩選。苦蕎黃酮粉吸濕性較強(qiáng)，直接填充膠囊會(huì)出現(xiàn)質(zhì)量差異大、膠囊殼易脆裂等情況，影響產(chǎn)品的品質(zhì)。為改善粉體的性質(zhì)，可加入合適的輔料。輔料能一定程度上改善主藥的吸濕情況，防止吸潮[21]。試驗(yàn)篩選微晶纖維素、糊精、預(yù)膠化淀粉、羧甲基纖維素鈉4種輔料，按照質(zhì)量比1∶1與苦蕎黃酮粉混合后，測(cè)定各組樣品的吸濕率，通過(guò)比較確定適宜的輔料。

（8）輔料添加量的確定。將苦蕎黃酮粉與優(yōu)選輔料分別按照質(zhì)量比2.0∶1.0，1.5∶1.0，1.0∶1.0，1.0∶1.5，1.0∶2.0均勻混合，以吸濕率為指標(biāo)，考查不同原輔料比例對(duì)吸濕率的影響，確定輔料適宜的添加量。

（9） 制粒工藝中潤(rùn)濕劑考查。稱取6份苦蕎黃酮與輔料的混合粉，分別用75%，80%，85%，90%，95%，100%乙醇進(jìn)行制粒，用40目篩網(wǎng)制成濕顆粒，并觀察制軟材及軟材過(guò)篩情況，于60℃真空干燥，再通過(guò)40目篩整粒，60目篩去細(xì)粉，收集顆粒稱量，計(jì)算顆粒成型率。

（10）黑苦蕎膠囊質(zhì)量分析。在最優(yōu)工藝條件下連續(xù)制備3批黑苦蕎膠囊樣品，進(jìn)行水分含量、裝量差異、崩解時(shí)限的檢測(cè)與評(píng)價(jià)。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用正交設(shè)計(jì)助手ⅡV3.1統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行正交試驗(yàn)結(jié)果分析，圖形制作采用Excel和Origin 8.0數(shù)據(jù)處理軟件。

2 結(jié)果與分析

2.1 乙醇回流法提取苦蕎黃酮工藝研究

2.1.1 苦蕎粉粒徑對(duì)總黃酮提取率的影響

苦蕎粉粒徑對(duì)總黃酮提取率的影響見(jiàn)圖1。

圖1 苦蕎粉粒徑對(duì)總黃酮提取率的影響

由圖1可知，苦蕎總黃酮提取率隨著粒徑的減小而增大，苦蕎粒徑從80目減小到100目，總黃酮提取率顯著增加（p＜0.05）?？赡苁怯捎诳嗍w粉碎后，顆粒粒度變小，單位質(zhì)量藥材的總比表面積增大，促進(jìn)溶劑的滲透及活性物質(zhì)黃酮的提取速度，有利于提高提取效率[26]?？嗍w粒徑從100目增加到160目，總黃酮提取率變化不大，因此可將苦蕎粉粒徑控制在100目。

2.1.2 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)總黃酮提取率影響

乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)總黃酮提取率的影響見(jiàn)圖2。

圖2 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)總黃酮提取率的影響

由圖2可知，結(jié)果表明當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)小于60%時(shí)，總黃酮提取率隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的增加而升高，由于乙醇體積分?jǐn)?shù)增大，其極性變小，有利于極性較小的黃酮類化合物的溶出，故得率呈上升趨勢(shì)[27]。乙醇體積分?jǐn)?shù)為60%時(shí)，總黃酮提取率最高。當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)大于60%時(shí)，總黃酮提取率隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的增加呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，可能是由于一些醇溶性雜質(zhì)、色素、親脂性成分的溶出量增加，與黃酮類化合物競(jìng)爭(zhēng)乙醇，從而導(dǎo)致黃酮類化合物的得率降低[28]。因此，確定提取乙醇體積分?jǐn)?shù)為60%。

2.1.3 料液比對(duì)總黃酮提取率的影響

料液比對(duì)總黃酮提取率的影響見(jiàn)圖3。

圖3 料液比對(duì)總黃酮提取率的影響

由圖3可知，料液比大于1∶30時(shí)，總黃酮提取率隨著料液比的減少呈現(xiàn)上升趨勢(shì)；料液比為1∶30時(shí)，總黃酮提取率最高；料液比低于1∶30時(shí)，總黃酮提取率隨著料液比的降低呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。料液比影響溶劑的極性，從而影響不同極性黃酮類的溶解性，同時(shí)能耗也隨著料液比的降低而增大[29]。因此，確定料液比為1∶30。

2.1.4 提取時(shí)間對(duì)總黃酮提取率的影響

提取時(shí)間對(duì)總黃酮提取率的影響見(jiàn)圖4。

圖4 提取時(shí)間對(duì)總黃酮提取率的影響

由圖4可知，提取時(shí)間小于2.5 h時(shí)，總黃酮提取率隨著提取時(shí)間的增加而提高；提取時(shí)間2.5 h時(shí)，總黃酮提取率達(dá)最大值；提取時(shí)間超過(guò)2.5 h后，總黃酮提取率隨著提取時(shí)間增加呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，原因可能是時(shí)間的增大有利于黃酮類物質(zhì)的溶出，超過(guò)最佳提取時(shí)間后，部分黃酮類物質(zhì)隨著加熱時(shí)間的延長(zhǎng)而分解，導(dǎo)致得率下降[30-31]。因此，將提取時(shí)間確定為2.5 h。

2.1.5 提取溫度對(duì)總黃酮提取率的影響

提取溫度對(duì)總黃酮提取率的影響見(jiàn)圖5。

由圖5可知，總黃酮提取率隨著提取溫度的升高而增加，提取溫度從60℃增加到80℃，總黃酮提取率顯著增加（p＜0.05），在80℃時(shí)達(dá)到最高點(diǎn)。溫度繼續(xù)增加，總黃酮提取率變化不大。因此，確定提取溫度為80℃。

2.1.6 苦蕎乙醇回流提取正交試驗(yàn)

圖5 提取溫度對(duì)總黃酮提取率的影響

苦蕎黃酮提取正交試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 苦蕎黃酮提取正交試驗(yàn)結(jié)果

由表2的因素極差值大小可以看出，以總黃酮提取率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，影響苦蕎黃酮提取試驗(yàn)因素的主次順序?yàn)?C＞B＞D＞A，最優(yōu)條件組合是 A2B3C2D2。經(jīng)過(guò)3次試驗(yàn)得出平均總黃酮提取率為44.68±2.29 mg/g，高于正交試驗(yàn)中A3B3C2D1最佳組合，因此最終確定A2B3C2D2為最優(yōu)組合，即乙醇體積分?jǐn)?shù)60%，料液比1∶35（g∶mL），提取時(shí)間150 min，提取溫度80℃。

苦蕎黃酮提取方差分析（α=0.05） 見(jiàn)表3。

表3 苦蕎黃酮提取方差分析（α=0.05）

由表3可知，因素B料液比和因素C提取時(shí)間的差異在α=0.05水平上都是顯著的。

2.2 黑苦蕎膠囊工藝研究

2.2.1 輔料的篩選

不同輔料對(duì)吸濕率的影響見(jiàn)圖6。

圖6 不同輔料對(duì)吸濕率的影響

由圖6可知，在24 h內(nèi)，各種粉體的吸濕率隨著時(shí)間的增加迅速增加，24 h后吸濕率趨于相對(duì)穩(wěn)定；輔料添加后能夠明顯降低苦蕎黃酮粉的吸濕率，以添加微晶纖維素的粉體吸濕率降低最多，120 h時(shí)間內(nèi)吸濕率均低于9%，中國(guó)藥典規(guī)定膠囊劑的含水量不得超過(guò)9%。選擇微晶纖維素作為添加輔料。

2.2.2 輔料用量考查

將苦蕎黃酮粉與微晶纖維素按不同比例進(jìn)行混合，考查不同原輔料比例對(duì)吸濕率的影響。

苦蕎黃酮粉與微晶纖維素不同質(zhì)量比對(duì)吸濕率的影響見(jiàn)圖7。

圖7 苦蕎黃酮粉與微晶纖維素不同質(zhì)量比對(duì)吸濕率的影響

由圖7可知，不同原輔料比例吸濕性呈現(xiàn)相似的規(guī)律，在24 h內(nèi)，吸濕率隨著時(shí)間增加迅速升高，24 h后吸濕率趨于穩(wěn)定?？嗍w黃酮粉與微晶纖維素質(zhì)量比為1.0∶1.5和1.0∶2.0時(shí)吸濕率最低，然而二者質(zhì)量比在1.5∶1.0時(shí)，吸濕率即低于9%，結(jié)合產(chǎn)品配方考慮，確定苦蕎黃酮粉與微晶纖維素質(zhì)量比為1.5∶1.0。

2.2.3 制粒工藝

（1）粉體休止角測(cè)定。將苦蕎黃酮粉與微晶纖維素按優(yōu)選質(zhì)量比均勻混合，用綜合粉體測(cè)定儀進(jìn)行休止角測(cè)定。

粉體休止角測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 粉體休止角測(cè)定結(jié)果

由表4可知，休止角測(cè)定結(jié)果大于40°，說(shuō)明粉體流動(dòng)性不夠，通過(guò)制?？梢栽黾游锪系牧鲃?dòng)性，因此進(jìn)行制粒工藝研究。

（2）制粒工藝中潤(rùn)濕劑的確定。

潤(rùn)濕劑對(duì)顆粒成型率的影響見(jiàn)表5。

表5 潤(rùn)濕劑對(duì)顆粒成型率的影響

由表5可知，乙醇體積分?jǐn)?shù)為85%時(shí)顆粒成型率最高；制粒過(guò)程中，當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)低于85%時(shí)，雖然容易制粒但是物料容易起團(tuán)；乙醇體積分?jǐn)?shù)高于85%時(shí)，雖然不易起團(tuán)，但是制粒較困難；而當(dāng)85%乙醇作為潤(rùn)濕劑時(shí)物料容易制粒且不易起團(tuán)，故采用85%乙醇作為潤(rùn)濕劑用于顆粒制備。

（3）內(nèi)容物休止角。取制粒后的內(nèi)容物進(jìn)行休止角的測(cè)定，平行測(cè)定3次。

膠囊內(nèi)容物的休止角見(jiàn)表6。

表6 膠囊內(nèi)容物的休止角

內(nèi)容物的休止角均小于40°，表明其流動(dòng)性符合膠囊的灌裝要求[19]。

（4）膠囊型號(hào)的考查。

顆粒堆密度測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表7。

表7 顆粒堆密度測(cè)定結(jié)果

由表7可知，顆粒的堆密度為0.657 g/mL。前期研究表明，每天需服用的產(chǎn)品劑量為2.7 g，若分為2次服用，每次3粒，則每粒的質(zhì)量為0.45 g，根據(jù)顆粒堆密度計(jì)算所需膠囊的體積為0.68 mL，故選用0號(hào)膠囊殼用于黑苦蕎降血糖顆粒的灌裝。

（5）臨界相對(duì)濕度的測(cè)定。以吸濕率為縱坐標(biāo)，相對(duì)濕度為橫坐標(biāo)做不同環(huán)境下吸濕率曲線圖，再作曲線的切線，其交點(diǎn)橫坐標(biāo)即為臨界相對(duì)濕度。

臨界相對(duì)濕度的測(cè)定見(jiàn)表8，膠囊內(nèi)容物的臨界相對(duì)濕度曲線見(jiàn)圖8。

從圖8可看出，該品的臨界相對(duì)濕度為67.85%，當(dāng)相對(duì)濕度＜67.85%時(shí)，粉末的吸濕性不強(qiáng)，當(dāng)相對(duì)濕度＞67.85%時(shí)，粉末吸濕性明顯增加，故生產(chǎn)環(huán)境相對(duì)濕度應(yīng)控制在67.85%以下。

表8 臨界相對(duì)濕度的測(cè)定

圖8 膠囊內(nèi)容物的臨界相對(duì)濕度曲線

2.3 黑苦蕎膠囊質(zhì)量分析

2.3.1 水分

黑苦蕎膠囊水分含量測(cè)定見(jiàn)表9。

表9 黑苦蕎膠囊水分含量測(cè)定

由表9可知，3批樣品的水分含量分別為5.12%±0.29%，5.10%±0.48%，5.33%±0.29%，符合中國(guó)藥典（2015版） 膠囊劑中水分不得高于9%的質(zhì)量要求[25]。

2.3.2 裝量差異

中國(guó)藥典（2015版） 中膠囊劑裝量差異要求，平均裝量或標(biāo)示裝量0.30 g及0.30 g以上裝量差異限度為±7.5%。取3批黑苦蕎膠囊，每批樣品10粒，測(cè)定裝量差異。

黑苦蕎膠囊裝量差異見(jiàn)表10。

由表10可知，3批樣品均未超出裝量差異限度，符合2015版《中國(guó)藥典》的要求。

2.3.3 崩解時(shí)限

根據(jù)中國(guó)藥典（2015版）膠囊劑崩解時(shí)限的測(cè)定方法，測(cè)定3批黑苦蕎膠囊的崩解時(shí)限，每批樣品取6粒，置于崩解儀中測(cè)定[25]。結(jié)果顯示，3批樣品的崩解時(shí)限分別為6，7，6 min， 均符合中國(guó)藥典（2015版）膠囊劑崩解時(shí)限的質(zhì)量要求。

3 結(jié)論

苦蕎黃酮具有輔助降血糖功能。以苦蕎黃酮作為功效成分，選用黃酮提取率較高的黑苦蕎為原料，制備膠囊保健食品，對(duì)制備工藝進(jìn)行研究，并對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量進(jìn)行檢測(cè)評(píng)價(jià)。

表10 黑苦蕎膠囊裝量差異

以總黃酮提取率為指標(biāo)，對(duì)黑苦蕎黃酮的提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，確定苦蕎粉粒徑100目，最優(yōu)提取條件為乙醇體積分?jǐn)?shù)60%，料液比1∶35（g∶mL），提取溫度80℃，提取時(shí)間150 min；膠囊劑型工藝研究中，為改善膠囊內(nèi)容物的性質(zhì)，篩選微晶纖維素作為輔料，并確定適宜添加量，苦蕎黃酮粉與微晶纖維素質(zhì)量比1.5∶1。

為改善粉體的流動(dòng)性，對(duì)粉體進(jìn)行制粒，以顆粒成型率為評(píng)價(jià)指標(biāo)篩選85%乙醇作為潤(rùn)濕劑。制粒后顆粒休止角小于40°，流動(dòng)性滿足生產(chǎn)要求；最后通過(guò)顆粒堆密度的測(cè)量，選定0號(hào)膠囊灌裝；通過(guò)臨界相對(duì)濕度的測(cè)定確定生產(chǎn)環(huán)境相對(duì)濕度控制在67.85%以下。

最后對(duì)黑苦蕎膠囊進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)，3批樣品的水分含量未超過(guò)9.0%，裝量差異未超過(guò)±7.5%，崩解時(shí)限未超過(guò)30 min，均符合中國(guó)藥典規(guī)定。

在接下來(lái)的工作中，將開(kāi)展黑苦蕎膠囊的功能學(xué)動(dòng)物試驗(yàn)研究，對(duì)其功能性進(jìn)行檢測(cè)和評(píng)價(jià)。