邱慧珍

摘 要：本研究的目的是建立測(cè)定西紅柿、蘋果、茶葉中吡蟲啉殘留量的QuECHERS-高效液相色譜法（HPLC），通過加標(biāo)測(cè)定出其回收率、精密度、檢出限均在理想范圍之內(nèi)。具體測(cè)定方法為，樣品經(jīng)1%醋酸乙腈20mL、硫酸鎂6g、醋酸鈉1.5g，渦旋提取，離心，提取液經(jīng)400mg PSA、400mg C18、1200mg MgSO4凈化，吸取上清液上機(jī)測(cè)定。結(jié)果顯示，吡蟲啉在0.2～5.0mg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，R=0.9999，西紅柿、蘋果、茶葉基質(zhì)回收率均在93%～100%范圍內(nèi)，西紅柿、蘋果檢出限0.02mg/kg、定量限0.1mg/kg；茶葉檢出限0.05mg/kg，定量限0.2mg/kg。

關(guān)鍵詞：吡蟲啉 西紅柿 蘋果 茶葉 高效液相色譜法 QuECHERS

1 引言

吡蟲啉屬于煙堿類超高效殺蟲劑，不僅有廣譜、高效、低毒、低殘留，害蟲不易產(chǎn)生抗性等優(yōu)點(diǎn)，還具有觸殺、胃毒和內(nèi)吸等多重作用。害蟲接觸藥劑后，會(huì)因中樞神經(jīng)正常傳導(dǎo)受阻而麻痹死亡。目前，吡蟲啉的檢測(cè)方法主要有毛細(xì)管電泳[1]、熒光光譜[2]、膠體金免疫層析[3]、液相色譜、液質(zhì)聯(lián)用等。GB/T 23379-2009《水果、蔬菜及茶葉中吡蟲啉殘留的測(cè)定 高效液相色譜法》中，吡蟲啉的測(cè)定主要通過乙腈提取、鹽析、濃縮液經(jīng)固相萃取凈化、乙腈洗脫、高效液相色譜等程序進(jìn)行檢測(cè)，但該標(biāo)準(zhǔn)方法回收率低、耗時(shí)長，不適用于大批量農(nóng)殘檢測(cè)。本文通過QuECHERS方法選取3個(gè)代表性樣品（西紅柿、蘋果、茶葉）測(cè)定吡蟲啉殘留量，希望建立一種簡(jiǎn)單、快捷、靈敏、價(jià)廉的液相色譜法。

2 材料與方法

2.1 試劑與儀器

吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)品（Dr.Ehrenstorfer GmbH，批號(hào)：G149997 CAS：138261-41-3）；乙腈（德國默克，批號(hào)：JB079830）；QuECHERS提取包（島津，貨號(hào)5010-050020）；QuECHERS凈化包（島津，貨號(hào)5010-015033）；液相色譜儀-二極管陣列檢測(cè)器（Waters，E2695/2998）；電子天平（奧豪斯儀器，AR2140）；離心機(jī)（湖南湘儀有限公司，H1850）；醫(yī)用超純水機(jī)（杭州萬潔水處理設(shè)備有限公司，WJ-RO-70）。

2.2 方法

2.2.1 色譜條件

色譜柱C18（ACE 250×4.6mm，5μm）；進(jìn)樣量：10μL；流速：1.0mL/min；檢測(cè)波長：270nm；流動(dòng)相A：0.1%磷酸水，流動(dòng)相B：乙腈；梯度：0～5min、85%A～80%A，5～15min、80%A～75%A，15～22min、75%A～0%A，22～28min、0%A～85%A。

2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)貯備液

準(zhǔn)確稱取10mg吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)品置于10mL容量瓶中，加入乙腈超聲溶解，定容，得到1000μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)貯備液，于-18℃的冰箱保存。

2.2.3 樣品處理

水果、蔬菜類樣品各稱取10g，茶葉類樣品稱取2g，分別置于50mL離心管中；準(zhǔn)確加入1%醋酸乙腈20mL，劇烈震蕩1min；將離心管置于冰水浴中，加入提取試劑包（6g硫酸鎂、1.5g醋酸鈉），劇烈震蕩1min，離心；準(zhǔn)確移取5mL上清液到凈化管中，劇烈震蕩30s，離心，取上清液，待上機(jī)測(cè)定。

3 結(jié)果

3.1 色譜條件選擇

在200～400nm波長范圍內(nèi)對(duì)吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行掃描，發(fā)現(xiàn)在269.8nm處有最大吸收，故選擇270nm為檢測(cè)波長。對(duì)GB/T 23379-2009中流動(dòng)相梯度進(jìn)行優(yōu)化，于15min時(shí)提高有機(jī)相比例。該色譜條件下，吡蟲啉于13min出現(xiàn)峰值，24～28min處有背景雜峰，因此洗脫時(shí)間由46min縮短至30min，以節(jié)約分析時(shí)間。

3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線和精密度

標(biāo)準(zhǔn)貯備液“2.2.2”分別逐級(jí)稀釋成濃度為0.2、0.5、1.0、2.0、5.0μg/mL的系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照“2.2.1”色譜條件上機(jī)測(cè)定，以吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)（X），峰面積為縱坐標(biāo)（Y），得線性方程Y=9.4×104X；R=0.9999。在0.2～5.0mg/L范圍內(nèi)，吡蟲啉的進(jìn)樣質(zhì)量濃度與其對(duì)應(yīng)的峰面積線性關(guān)系良好。2μg/mL濃度標(biāo)液連續(xù)進(jìn)樣6針，RSD為0.4%，精密度良好。

3.3 樣品測(cè)定和加標(biāo)回收

在空白的蘋果樣本中添加不同濃度的吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)溶液，添加濃度分別為0.4、1.0、2.0mg/kg，每個(gè)濃度做6個(gè)平行樣品。結(jié)果顯示，回收率分別為95%～100%、 94%～96%、93%～95%，相對(duì)應(yīng)的RSD分別為2.7%、1.2%、0.9%。

在空白的西紅柿樣本中添加不同濃度的吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)溶液，添加濃度分別為0.4、1.0、2.0mg/kg，每個(gè)濃度做6個(gè)平行樣品。結(jié)果顯示，回收率分別為95%～100%、94%～96%、94%～96%，相對(duì)應(yīng)的RSD分別為2.7%、0.9%、0.8%。

在空白的茶葉樣本中添加不同濃度的吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)溶液，添加濃度分別為2.0、5.0、10mg/kg，每個(gè)濃度做6個(gè)平行樣品。結(jié)果顯示，回收率分別為100%、96%～98%、93%～96%，相對(duì)應(yīng)的RSD分別為0%、1.1%、1.3%。

3.4定量限和檢出限

空白蘋果基質(zhì)加標(biāo)，當(dāng)加標(biāo)水平為0.1mg/kg時(shí)，信噪比S/N值大于10，定量限為0.1mg/kg；當(dāng)加標(biāo)水平為0.02mg/kg時(shí)，信噪比S/N值大于3，檢出限為0.02mg/kg?？瞻撞枞~基質(zhì)加標(biāo)，當(dāng)加標(biāo)水平為0.2mg/kg時(shí)，信噪比S/N值大于10，定量限為0.2mg/kg；當(dāng)加標(biāo)水平為0.05mg/kg時(shí)，信噪比S/N值大為3，檢出限為0.05mg/kg。

4 結(jié)論

本研究選取蔬菜、水果、茶葉為典型樣本，按照QuECHERS前處理方法，結(jié)合高效液相色譜法測(cè)定吡蟲啉的含量。結(jié)果表明，上述實(shí)驗(yàn)方法的檢出限、加標(biāo)回收率、精密度和重復(fù)性均符合要求，且基質(zhì)效應(yīng)不明顯。另外，QuECHERS還具有簡(jiǎn)便、快捷、節(jié)省溶劑，以及對(duì)實(shí)驗(yàn)室前處理設(shè)備條件要求低等優(yōu)點(diǎn)，因此更適合大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行批量檢測(cè)篩查。

參考文獻(xiàn)：

[1] 孫娟，陳冠華，王坤，等.毛細(xì)管電泳在線電推掃測(cè)定蔬菜中3中氯化煙堿類農(nóng)藥殘留[J].分析化學(xué)，2020，38（8）：1151-1155.

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