四種β-環(huán)糊精制備鞣花酸包合物的抗氧化性研究

婁興維，羅志軍，胡鵬剛 *，李家斌，王紹江，趙玲燕，潘雪梅

（1.貴州大學 釀酒與食品工程學院，貴州 貴陽 550025；2.貴陽單寧科技有限公司，貴州 貴陽 550200）

鞣花酸（ellagic acid，EA）是沒食子酸的二聚衍生物，是一種天然的多酚類化合物，廣泛地存在于石榴、覆盆子、草莓、黑莓、核桃、枸杞等軟果、堅果植物中[1]。鞣花酸具有許多有益的藥理功能，如抗氧化，它具有較強的脂質(zhì)抗氧化和捕捉自由基的能力[2]，早有研究表明在體內(nèi)鞣花酸對線粒體和微粒體中的脂質(zhì)化合物有良好的抑制作用[3]；抗癌、抗突變，特別是對結(jié)腸癌、食管癌、肝癌、肺癌、舌以及皮膚腫瘤等有很好的抑制作用，主要從抑制致癌物的代謝活動、消除致癌物的毒性和清除致癌物[4]等方面來抑制癌癥。此外，鞣花酸還可預防和治療炎癥、糖尿病并發(fā)癥、高血壓和哮喘等[5-6]疾病，它的抗氧化性和增白功效也在化妝品中被普遍的使用。鞣花酸具有優(yōu)異的藥理功能，但它的溶解性卻大大的限制了它的使用，因此需要改善鞣花酸的水溶性。

包合技術(shù)，簡而言之就是將一種分子包藏于另一種分子的空穴結(jié)構(gòu)內(nèi)，形成包合物，常被使用在藥物的制備中。而形成的包合物可以提高藥物的溶解度、液體藥物粉末化和防止揮發(fā)、調(diào)節(jié)藥物釋放速率來提高藥物的生物利用度、掩蓋藥物的特殊氣味和增加藥物的穩(wěn)定性等[7]。β-環(huán)糊精具有“內(nèi)疏水，外親水”的空腔結(jié)構(gòu)，所以常常被用作包合材料。對β-環(huán)糊精（β-cyclodextrin，β-CD）進行化學結(jié)構(gòu)修飾，得到β-CD衍生物，如羥丙基-β-環(huán)糊精（hydroxypropylβ-cyclodextrin，HP-β-CD）、二甲基-β-環(huán)糊精（dimethyl-βcyclodextrin，DM-β-CD）、磺丁基-β-環(huán)糊精（sulfobutyl-βcyclodextrin，SBE-β-CD），這些β-環(huán)糊精衍生物的水溶性就遠遠高于β-環(huán)糊精，包合物之間的水溶性也相差很大[8]。有研究表明，鞣花酸經(jīng)過包合作用后溶解度增加了10倍[9]，包合物有著更好的體外抗炎活性[10-11]，生物利用度也會顯著提高[12]。除此之外，包合技術(shù)應用廣泛，如兒茶素[13]、阿魏酸[14]、白楊素[15]、殼聚糖[16]、芒果苷[17]等許多難溶于水的物質(zhì)，與環(huán)糊精形成包合物后，溶解度顯著增加，抗氧化性、穩(wěn)定性和藥理活性也隨之增加。

利用β-CD、HP-β-CD、DM-β-CD、SBE-β-CD四種環(huán)糊精制備鞣花酸包合物，使其提高鞣花酸溶解度，使用高效液相色譜（high performance liquid chromatography，HPLC）測定其包合物中鞣花酸的含量和包合率，采用傅里葉紅外光譜（fourier transfer infrared spectroscopy，F(xiàn)T-IP）、X-射線衍射（x-ray diffraction，XRD）、差示掃描量熱分析、掃描電鏡表征包合物是否形成，同時通過自由基清除能力評價鞣花酸包合物的抗氧化性強弱，為進一步開發(fā)和有效利用鞣花酸抗氧化性作為保健食品、化妝品等領域提供了一定的理論依據(jù)和參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

鞣花酸原樣（純度≥90%）：貴陽倍隆生物科技公司；β-環(huán)糊精、羥丙基-β-環(huán)糊精、磺丁基-β-環(huán)糊精：山東濱州智源生物科技有限公司；二甲基-β-環(huán)糊精、鄰苯三酚（均為分析純）：美國阿拉丁公司；鞣花酸標準品（純度≥99%）：美國Sigma公司；1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）：梯希愛（上海）化成工業(yè)發(fā)展有限公司；2,2'-聯(lián)氮-雙-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸（2,2'-azinobis（3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid），ABTS）：上海源葉生物科技有限公司；三（羥甲基）氨基甲烷（tris（hydroxymethyl）aminomethane，Tris）：國藥集團化學試劑有限公司；鄰菲羅啉、硫酸鐵（均為分析純）：天津市政遠化學試劑有限公司；過硫酸鉀（分析純）：天津市大茂化學試劑有限公司。

1.2 儀器與設備

ATY224電子分析天平：日本島津公司；HY-5回旋振蕩器：金壇市富華儀器有限公司；-86 ℃冰箱：中國AUCMA股份有限公司；SCIENTZ-10N冷凍干燥機：寧波新芝生物科技股份有限公司；UV-2700紫外可見分光光度計：日本島津公司；L6-P6高效液相色譜儀：北京譜析通用儀器有限公司；Bruker D8型X射線衍射儀：德國布魯克公司；Nicolet IS50傅里葉變換紅外光譜儀：美國賽默飛世爾科技公司；ΣIGMA+X-Max20電子掃描顯微鏡能譜儀：德國蔡司公司。

1.3 方法

1.3.1 包合物的制備

根據(jù)范高福等[9]制備石榴鞣酸-羥丙基-β-環(huán)糊精的方法，稍加修改制備四種鞣花酸包合物。精密稱取鞣花酸樣品0.151 0 g，加入乙醇溶解，同時按照摩爾比1∶2準確稱取四種環(huán)糊精，分別用純水溶解。將制取好的鞣花酸溶液在攪拌下緩慢滴入到環(huán)糊精溶液中，超聲20 min后在室溫下振蕩攪拌36 h，再使用0.45 μm微孔濾膜過濾混合溶液，混合溶液放入-80 ℃冰箱中預凍24 h后放入真空冷凍干燥機干燥，即得包合物。

1.3.2 物理混合物的制備

精密稱取鞣花酸樣品0.151 0 g，按照摩爾比1∶2分別準確稱取四種環(huán)糊精，將稱取好的鞣花酸與環(huán)糊精直接混合即得。

1.3.3 鞣花酸包合物溶解度的測定

精密稱取0.002 4 g鞣花酸標準品于100 mL容量瓶中用水定容，超聲30 min，配制成0.024 mg/mL的標準品溶液待用。再分別取標準品0.024 mg/mL標準品溶液1 mL、2 mL、3 mL、4 mL、5 mL于10 mL容量瓶中加水定容。配制成0.0024mg/mL、0.0048 mg/mL、0.007 2mg/mL、0.009 6 mg/mL、0.012 0 mg/mL的鞣花酸標準品溶液，于波長254 nm條件下測定吸光度值，以鞣花酸標準溶液質(zhì)量濃度為橫坐標（X）、對應吸光度值（Y）為縱坐標繪制標準曲線，并對標準曲線進行線性回歸，得回歸方程。取10 mL水溶液于燒杯中，分別加入過量的鞣花酸和四種鞣花酸包合物，使之得到鞣花酸和鞣花酸包合物的飽和溶液，將飽和溶液經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過濾，分別稀釋一定倍數(shù)后在254 nm處測量吸光度值，代入標準曲線回歸方程，計算得到鞣花酸和鞣花酸包合物的溶解度。

1.3.4 鞣花酸包合物的包合率

鞣花酸包合物的包合率采用高效液相色譜（high performance liquid chromatography，HPLC）法進行測定，其色譜條件為[18]：Pgrandsil-STC-C18色譜柱（4.6 mm×150 mm），流動相乙腈-甲酸（1 mL/L）（17∶83，V/V），檢測波長254 nm，進樣量10 μL，流速1.0 mL/min，柱溫30 ℃。

精密稱取鞣花酸標準品12.30 mg，甲醇溶解，分別稀釋成質(zhì)量濃度為0.123 μg/mL、0.615 μg/mL、1.23 μg/mL、2.46 μg/mL、4.92 μg/mL、9.84 μg/mL、19.68 μg/mL的對照品溶液，使用HPLC測定其對應質(zhì)量濃度下的峰面積，以溶液質(zhì)量濃度（X）為橫坐標、對應峰面積（Y）為縱坐標繪制標準曲線，并對標準曲線進行線性回歸，得回歸方程。再精密稱取四種鞣花酸包合物適量，測定其峰面積，將測得的峰面積代入測得的線性回歸方程得到四種包合物中鞣花酸的質(zhì)量濃度，根據(jù)質(zhì)量濃度計算包合物中鞣花酸的量，進一步求得到包合物的包合率，包合率計算公式如下：

1.3.5 傅里葉紅外光譜表征包合物

分別取適量的鞣花酸、環(huán)糊精、物理混合物、包合物放入研缽中，加入溴化鉀（KBr），研磨均勻后分別壓片掃描，波數(shù)范圍4 000～400 cm-1，分辨率4 cm-1。

1.3.6 X-射線衍射表征包合物

分別取適量的鞣花酸、環(huán)糊精、物理混合物、包合物，在CuKα輻射，管電壓40 kV，管電流40 mA，所有樣品均在10～80°之間的2θ角范圍內(nèi)測量，掃描速率10°/min，步長為0.017°。

1.3.7 掃描電鏡表征包合物

分別取鞣花酸、環(huán)糊精、物理混合物、包合物適量，在加速電壓5.0 kV下分別掃描各樣品的形態(tài)。

1.3.8 抗氧化活性

（1）DPPH自由基清除試驗

采用饒鳳等[19]的方法，稍加修改測量鞣花酸包合物對DPPH自由基的清除率。分別稱取四種鞣花酸包合物適量，配制成質(zhì)量濃度為2.0μg/mL、4.0μg/mL、6.0μg/mL、8.0μg/mL、10.0 μg/mL鞣花酸包合物樣品溶液。再準確稱取DPPH 0.019 7 g，甲醇定容至100 mL得儲備液，取10 mL儲備液定容至100 mL量瓶中待用。在試管中加入1 mL樣品溶液與3 mL DPPH溶液，混勻后在室溫下避光靜置30 min后，在波長517 nm條件下測定吸光度值A1。以1 mL甲醇代替樣品溶液測定吸光度值A0，以3 mL甲醇代替DPPH溶液測定吸光度值A2。DPPH自由基清除率由以下公式計算：

（2）ABTS自由基清除試驗

參照徐洪宇等[20]的方法，稍加修改。將7 mmol/L的ABTS溶液與2.45 mmol/L的過硫酸鉀溶液等體積混合，室溫下避光靜置16 h，即得ABTS自由基儲備液。用無水乙醇稀釋該儲備液，使其在734 nm處的吸光度值為0.7±0.2，即得ABTS自由基工作液。取不同鞣花酸包合物樣品溶液1 mL，ABTS自由基工作液4 mL加入到試管中，靜置6 min后于734 nm處測吸光度值，按以下公式計算ABTS自由基清除率：

式中：AB、AE分別為空白組和樣品組的吸光度值。

（3）羥基自由基清除試驗

按照表1[21]反應液的組成，在試管中一次加入磷酸緩沖溶液、鄰菲羅啉、硫酸鐵溶液、樣品溶液、蒸餾水和過氧化氫。然后將試管置于37 ℃恒溫水浴鍋中保溫60 min，在波長510 nm處測定各組吸光度值，按照以下公式計算羥基自由基清除率：

表1 反應液的組成Table 1 Compositions of reaction solution

（4）超氧陰離子自由基清除試驗

以柏宏偉等[22]的方法，略作修改。向pH=8.2、5.7 mL、50 mmol/L Tris-HCl緩沖溶液中加入0.2 mL的四種鞣花酸包合物不同濃度的樣品溶液，在25 ℃下保溫10 min，然后加入25 ℃預熱6 mmol/L的鄰苯三酚0.1 mL，總體積6 mL。迅速搖勻反應1 min后在波長320 nm下測定吸光度值A，同時用相同濃度的樣品溶液作參比，扣除樣品本身顏色的干擾；另取試劑同上，等體積的Tris-HCl緩沖溶液＋鄰苯三酚溶液代替樣品溶液，Tris-HCl緩沖溶液作空白，測定反應1 min時的吸光度值A0。按照以下公式計算超氧陰離子自由基率：

2 結(jié)果與分析

2.1 鞣花酸包合物溶解度的檢測

圖1 鞣花酸紫外吸收光譜Fig.1 Ultraviolet absorption spectrum of ellagic acid

取標準品溶液適量，以空白水溶液為對照，在200～800 nm波長下全波段掃描，結(jié)果見圖1。由圖1可知，測得鞣花酸的最大紫外吸收波長為254 nm，以鞣花酸質(zhì)量濃度（X）為橫坐標、吸光度值（Y）為縱坐標繪制標準曲線回歸方程為Y=8.166 7X-0.006，相關(guān)系數(shù)R2=0.999 7。結(jié)果表明，鞣花酸在0.002 4～0.012 0 mg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。經(jīng)檢測幾種鞣花酸包合物的溶解度從低到高分別為：EA=0.011mg/mL、EA/β-CD包合物=0.0373mg/mL、EA/DM-β-CD包合物=0.0938mg/mL、EA/SBE-β-CD包合物=0.0956mg/mL、EA/HP-β-CD包合物=0.123 2 mg/mL，四種鞣花酸包合物相比單體鞣花酸，溶解度增加了240%、750%、770%、102‰。

2.2 HPLC法測定鞣花酸包合物的包合率

以鞣花酸質(zhì)量濃度（X）為橫坐標、對應峰面積（Y）為縱坐標，繪制標準曲線回歸方程為Y=98 153X+2 670.9，相關(guān)系數(shù)R2=0.999 5，結(jié)果表明，在0.123～19.68 μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。測得EA/β-CD包合物、EA/HP-β-CD包合物、EA/DM-β-CD包合物、EA/SBE-β-CD包合物中的鞣花酸包合率分別為82.58%、89.80%、87.42%、84.64%。

2.3 鞣花酸包合物的表征

2.3.1 傅里葉紅外光譜分析

四種鞣花酸包合物的傅里葉變換紅外光譜圖見圖2。

圖2 鞣花酸包合物的傅里葉紅外光譜圖Fig.2 Fourier transfer infrared spectroscopy of ellagic acid inclusion complexes

由圖2可知，鞣花酸在波數(shù)3 474 cm-1處為-OH伸縮振動吸收峰，波數(shù)1 720 cm-1處為C=O伸縮振動吸收峰，波數(shù)1 617 cm-1、1 583 cm-1、1 510 cm-1處是苯環(huán)的典型特征吸收峰。β-CD、HP-β-CD、DM-β-CD、SBE-β-CD的FT-IR譜圖分別在波數(shù)3 381 cm-1、3 414 cm-1、3 440 cm-1、3 432 cm-1處顯示的寬吸收峰為-OH伸縮振動吸收峰。物理混合物的FT-IR譜圖中觀察到鞣花酸的特征吸收峰，可以看出為鞣花酸與四種環(huán)糊精的FT-IR譜圖的疊加。四種包合物EA/β-CD、EA/HP-β-CD、EA/DM-β-CD、EA/SBE-β-CD分別在波數(shù)3 385 cm-1、3 410 cm-1、3 419 cm-1、3 425 cm-1處有-OH的寬吸收峰，鞣花酸的-OH特征吸收峰消失，苯環(huán)特征吸收峰消失或減弱，包合物的C=O伸縮振動吸收峰已位移變化至波數(shù)1 641 cm-1、1 633 cm-1、1710 cm-1、1 654 cm-1處，表明鞣花酸已經(jīng)包合在環(huán)糊精的空腔中，形成包合物。

2.3.2 X-射線衍射分析

四種鞣花酸包合的X-射線衍射見圖3。

圖3 鞣花酸包合物的X-射線衍射圖Fig.3 X-ray diffraction of ellagic acid inclusion complexes

由圖3可知，鞣花酸在13.98°、20.89°、23.68°、26.13°、28.01°、29.11°處有強烈特征尖峰，表明鞣花酸有晶體性質(zhì)，β-CD在10.69°、11.7°、12.48°、14.71°、15.40°、16.09°、17.11°、18.86°、19.58°、20.77°、22.72°、24.30°、27.08°處有強烈特征尖峰，表明β-CD有晶體性質(zhì)，且與EA晶體性質(zhì)不同，其余三種環(huán)糊精的XRD譜圖中顯示出寬峰，無晶體衍射峰，無晶體性質(zhì)。物理混合物的XRD譜圖可以看出，物理混合物中可以找出鞣花酸的特征峰，表明物理混合物XRD譜圖只是簡單的疊加。然而在EA/β-CD包合物的XRD譜圖中顯示在11.97°、17.54°處出現(xiàn)新的晶體峰，鞣花酸的特征峰消失或減弱，表明EA/β-CD包合物形成。在其余三種鞣花酸包合物中也未出現(xiàn)鞣花酸的特征峰，表明鞣花酸已經(jīng)被包合在環(huán)糊精的腔中，形成包合物。

2.3.3 掃描電鏡分析

四種鞣花酸包合物的掃描電鏡圖見圖4。

由圖4可知，鞣花酸形態(tài)呈不規(guī)則絮狀結(jié)構(gòu)，β-CD、HP-β-CD、SBE-β-CD、DM-β-CD四種環(huán)糊精分別呈不規(guī)則塊狀結(jié)構(gòu)、球形腔、球體腔、腔體碎片結(jié)構(gòu)，在物理混合物中，可以觀察出是鞣花酸與環(huán)糊精的混合形態(tài)結(jié)構(gòu)，表明鞣花酸與環(huán)糊精是簡單的混合，主客分子之間的形態(tài)并未改變，而包合物顯示的結(jié)構(gòu)中完全與物理混合物截然不同，EA/β-CD包合物呈現(xiàn)出規(guī)則的塊狀結(jié)構(gòu)，EA/HP-β-CD、EA/DM-β-CD、EA/SBE-β-CD三種包合物中的球形腔體結(jié)構(gòu)完全消失，表明包合物形成。

圖4 鞣花酸包合物的電鏡掃描圖Fig.4 Scanning electron microscope of ellagic acid inclusion complexes

2.4 鞣花酸包合物抗氧化性試驗

2.4.1 DPPH自由基清除分析

圖5 DPPH自由基清除率Fig.5 Scavenging rate of DPPH free radical

由圖5可知，在質(zhì)量濃度2～10 μg/mL范圍內(nèi)，隨著質(zhì)量濃度的增加，鞣花酸以及四種包合物對DPPH自由基的清除率也隨之增加，達到一定質(zhì)量濃度時，清除率逐漸趨于平穩(wěn)，這與刁玉林等[23]測定秀麗莓中鞣花酸抗氧化性得到的數(shù)據(jù)結(jié)果變化相似，只是達到相同清除率所需鞣花酸濃度不同，原因可能為不同樣品之間含量不同。半數(shù)清除率半數(shù)清除率（50%elimination ratio，EC50）可以判斷抗氧化能力的強弱，EC50值越小，表明物質(zhì)抗氧化能力越強。鞣花酸和四種鞣花酸包合物EA/β-CD、EA/HP-β-CD、EA/DM-β-CD、EA/SBE-β-CD的EC50值分別為6.47 μg/mL、6.31 μg/mL、3.45 μg/mL、3.63 μg/mL、3.92 μg/mL，DPPH自由基的清除能力順序為：EA/HP-β-CD＞EA/DM-β-CD＞EA/SBE-β-CD＞EA/β-CD＞EA。從EC50值可以得到鞣花酸包合物對DPPH自由基清除能力都高于鞣花酸，EA/HP-β-CD、EA/DM-β-CD、EA/SBE-β-CD包合物的DPPH自由基清除率相差不大，但明顯高于EA，說明包合作用可以增加EA對DPPH自由基的清除能力。

2.4.2 ABTS自由基清除分析

圖6 ABTS自由基清除率Fig.6 Scavenging rate of ABTS free radical

由圖6可知，EA/β-CD、EA/HP-β-CD、EA/DM-β-CD、EA/SBE-β-CD四種鞣花酸包合物對ABTS均有較好的清除作用，隨著質(zhì)量濃度的加大，ABTS自由基的清除率也隨之加大，達到一定濃度時，清除率趨于平穩(wěn)。EA和EA/β-CD、EA/HP-β-CD、EA/DM-β-CD、EA/SBE-β-CD包合物的EC50值分別為13.53 μg/mL、12.11 μg/mL、7.00 μg/mL、7.66 μg/mL、7.77μg/mL，ABTS自由基的清除能力順序為：EA/HP-β-CD＞EA/DM-β-CD＞EA/SBE-β-CD＞EA/β-CD＞EA。EA/HPβ-CD包合物清除ABTS自由基能力最強，EA/DM-β-CD、EA/SBE-β-CD包合物沒有太大懸殊，但與EA相差很大，說明包合作用可以提高EA對ABTS自由基的清除能力。

2.4.3 羥基自由基清除分析

圖7 羥基自由基清除率Fig.7 Scavenging rate of hydroxyl free radical

由圖7可知，四種不同鞣花酸包合物對羥基自由基均有清除作用，在0.05～0.15 μg/mL時，鞣花酸和鞣花酸包合物對羥基自由基的清除率和鞣花酸質(zhì)量濃度存在線性正比關(guān)系，0.15～0.25 μg/mL時，隨著質(zhì)量濃度的變化，羥基自由基的清除率變化逐漸平緩，雖與崔珊珊等[24]在研究樹莓鞣花酸羥基自由基清除試驗中濃度變化不同，但數(shù)據(jù)趨勢變化類似。EA和EA/β-CD、EA/HP-β-CD、EA/DM-β-CD、EA/SBE-β-CD 包合物的EC50值分別 為0.133 6 μg/mL、0.136 3 μg/mL、0.108 2 μg/mL、0.108 3 μg/mL、0.105 5 μg/mL，羥基自由基的清除能力順序為：EA/SBE-β-CD＞EA/HP-β-CD＞EA/DM-β-CD＞EA＞EA/β-CD，從EC50的數(shù)值得到，與其他類型自由基清除相比，羥基自由基EC50值的變化沒有那么顯著，但根據(jù)EC50值微弱的變化，以及圖像中的清除率的變化，基本可以得出鞣花酸包合物的羥基自由基清除能力高于EA，說明包合作用可以提高EA對羥基自由基的清除能力。

2.4.4 超氧陰離子自由基清除分析

圖8 超氧陰離子自由基清除率Fig.8 Scavenging rate of superoxide anion free radical

由圖8可知，四種不同鞣花酸包合物對超氧陰離子自由基都具有較強的清除能力，與其他三種自由基清除有著類似情形，隨著濃度的增加，自由基清除率也會隨之增加，這與楊笑笑[25]提取石榴中鞣花酸超氧自由基清除試驗得到的結(jié)果相似。EA和EA/β-CD、EA/HP-β-CD、EA/DM-β-CD、EA/SBE-β-CD包合物的EC50值分別為89.41 μg/mL、59.71 μg/mL、55.20 μg/mL、58.32 μg/mL、55.29 μg/mL，超氧自由基清除能力順序為：EA/HP-β-CD＞EA/SBE-β-CD＞EA/DM-β-CD＞EA/β-CD＞EA。從EC50值可以看出，其中EA/HP-β-CD的超氧陰離子自由基的清除能力最好，與EA/DM-β-CD、EA/SBE-β-CD包合物差異不大，但四種鞣花酸包合物的明顯高于EA，可以得出包合作用可以提高EA對超氧自由基的清除能力。

3 結(jié)論

本研究通過四種不同環(huán)糊精制備鞣花酸包合物，并使用HPLC測定包合物中鞣花酸的含量和包合率，采用傅里葉紅外光譜、X-射線衍射、差示掃描量熱分析、掃描電鏡四種方法進行包合物的鑒定，同時通過自由基清除能力評價鞣花酸包合物的抗氧化性強弱。實驗結(jié)果表明，EA/β-CD、EA/DM-β-CD、EA/SBE-β-CD和EA/HP-β-CD包合物的溶解度與單體鞣花酸相比，四種鞣花酸包合物溶解度分別增加了240%、750%、770%、102‰。四種包合物的DPPH自由基清除能力：EA/HP-β-CD＞EA/DM-β-CD＞EA/SBE-β-CD＞EA/β-CD＞EA，ABTS自由基清除能力：EA/HP-β-CD＞EA/DM-β-CD＞EA/SBE-β-CD＞EA/β-CD＞EA，羥基自由基清除能力EA/SBE-β-CD＞EA/HP-β-CD＞EA/DM-β-CD＞EA＞EA/β-CD，超氧自由基清除能力：EA/HP-β-CD＞EA/SBE-β-CD＞EA/DM-β-CD＞EA/β-CD＞EA。四種鞣花酸包合物的溶解度和清除自由基能力都優(yōu)于單體鞣花酸，結(jié)果表明包合作用可以提高鞣花酸的溶解度與抗氧化性。