李婷婷 李玲 邢燕 王敏

摘 要：目的：采用全自動固相萃取—氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用（GC/MS）檢測技術(shù)，建立蔬菜中14種有機(jī)磷類農(nóng)藥的測定方法。方法：利用超聲波輔助乙腈萃取，經(jīng)過全自動固相萃取凈化，氣相色譜質(zhì)譜檢測。結(jié)果：實驗濃度范圍內(nèi)，目標(biāo)物濃度與峰面積線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)在0.997～0.999，檢出限為0.009～0.015 mg/kg；14種有機(jī)磷組分回收率為75%～111%。結(jié)論：該方法的自動化水平、靈敏度和準(zhǔn)確度較高，適用于大批量樣品中有機(jī)磷類農(nóng)藥的檢測。

關(guān)鍵詞：有機(jī)磷；蔬菜；GC/MS；全自動固相萃取

食品安全與人們身體健康密切相關(guān)，并影響著整個社會的和諧與穩(wěn)定。近年來我國經(jīng)濟(jì)發(fā)展速度很快，對蔬菜與水果等的需求變得更大，為了確保提升種植效益，各種農(nóng)藥違規(guī)使用的狀況非常常見，加強(qiáng)對農(nóng)藥殘留量的檢測非常關(guān)鍵。氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜不僅非常靈敏，也具備較好的可選擇性，有效避免各類因素的影響，保證農(nóng)藥殘留檢測更加準(zhǔn)確與可靠。固相萃取凈化中影響農(nóng)藥檢測的因素較多，因為處于有機(jī)溶劑的環(huán)境，將為工作人員身體健康帶來極大危害。全自動固相萃取儀可以實現(xiàn)自動凈化，保證實驗更加順利進(jìn)行，準(zhǔn)確性也可獲得保障[1]。

1 實驗部分

1.1 主要儀器與試劑

GC/MS-QP 2010 Plus氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀、Rtx-5MS 石英毛細(xì)管柱（30 mm×0.25 mm×0.25 μm）、KQ-250B型超聲波清洗器、ST16R型高速離心機(jī)、 Reeko Auto SPE—06C全自動固相萃取儀、CARB/NH2（500 mg/6 mL）固相萃取小柱。

試劑：丙酮、乙腈為色譜純試劑；純水；敵敵畏、滅線磷、甲拌磷、二嗪噥、乙拌磷、氯唑磷、甲基毒死蜱、殺螟松、喹硫磷、殺撲磷、丙溴磷、乙硫磷、三唑磷和伏殺硫磷濃度均為100 μg/mL，標(biāo)準(zhǔn)溶液定值單位均為農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研檢測所[2-3]。

1.2 色譜條件

載氣為高純氦氣（99.999 %）；柱流量：0.85 mL/min[4]；毛細(xì)管柱升溫程序：60 ℃保持1 min，以5 ℃/min升至290 ℃，保持2 min；進(jìn)樣口溫度為260 ℃；不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣體積1 μL。

1.3 質(zhì)譜條件

離子化模式：電子轟擊（EI）離子源；離子源溫度：230 ℃；接口溫度：250 ℃；離子源能量：70 eV；掃描方式：SIM。優(yōu)化后的有機(jī)磷的監(jiān)測參數(shù)見表1。

1.4 樣品處理

樣品提?。壕倪x取蔬菜樣品，并將其粉碎，然后稱取10.0 g樣品，并同乙腈25 mL均勻混合，超聲萃取10 min左右。加入2 g NaCl、2 g無水MgSO4，渦旋10 s。40 ℃水浴下取15 mL上清液，使用氮將其風(fēng)干。最后，加入2 mL丙酮-二氯甲烷溶液復(fù)溶，有利于接下來凈化工作的開展。

全自動固相萃取儀凈化：配齊固相萃取儀各項設(shè)施后，使用5 mL丙酮-二氯甲烷（1∶1）清洗各小柱，并開展萃取操作[5]。再選取科學(xué)合理的洗脫液，對樣品管進(jìn)行全面清洗；選取5 mL丙酮-二氯甲烷（1∶1）淋洗固相萃取柱，慢慢推氣。使用氮氣將洗脫液吹干，再添加丙酮1.0 mL，取1.0 μL進(jìn)樣測定。

2 結(jié)果與討論

2.1 提取溶劑的選擇

農(nóng)藥殘留檢測中，目標(biāo)物結(jié)構(gòu)都不相同，類型也多種多樣，將微量、痕量等目標(biāo)物提取出來，是第一步解決的問題[6]。乙酸乙酯、丙酮和乙腈是農(nóng)藥殘留檢測中常用的萃取溶劑。乙酸乙酯極性不強(qiáng)，個別極性農(nóng)藥無法充分提取有機(jī)溶劑。丙酮具備較強(qiáng)的溶解能力，可以充分溶解葉綠素、碳水化合物等物質(zhì)，并有效提取其中的雜質(zhì)。將丙酮和水充分融合，那么溶劑與樣品將無法徹底的分離。乙腈極性很強(qiáng)，穿透力也很大，使用中可以保證提取的有效性，色素與油脂類雜質(zhì)也不能徹底提取，讓蛋白質(zhì)等雜質(zhì)沉淀下來，故而實驗中所選提取溶劑為乙腈。

2.2 超聲萃取時間的優(yōu)化

萃取時間對萃取效率的影響非常大。實驗中分析了萃取時間不同時的萃取效率，實驗分別考察了5、10、20、30 min與40 min時的超聲萃取效果，提取時間超過10 min時，回收率變化不大，隨時提取時間的增加，液內(nèi)雜質(zhì)也越來越多，樣品重現(xiàn)性將發(fā)生變化。因此應(yīng)將提取時間控制在10 min左右，這樣提取效果將得到保障，也降低了雜質(zhì)的影響，處理效率大大提升[7]。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線及檢出限

溶劑以丙酮為主，使用有機(jī)磷類農(nóng)藥，保證分析的有效進(jìn)行，讓標(biāo)準(zhǔn)溶液測定更加準(zhǔn)確與合理，圖1為標(biāo)準(zhǔn)的總離子流圖。在實驗濃度范圍中，目標(biāo)物濃度與峰面積線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)范圍為0.997～0.999，表 2為統(tǒng)計到的相關(guān)試驗數(shù)據(jù)。以3倍噪聲值表示方法的檢出限，按10.0 g取樣量計算最低檢出濃度，檢出限為0.009～0.015 mg/kg，結(jié)果一并列于表2中。

2.4 方法回收率和精密度

在加標(biāo)回收實驗過程中，基質(zhì)以白菜空白樣品為主，濃度為0.01 mg/kg和0.1 mg/kg[8—9]。實驗前先處理樣品，選用適當(dāng)?shù)臋z測方法，從而得出準(zhǔn)確的回收率。各加標(biāo)平行樣總共6個，計算平均回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，相關(guān)數(shù)據(jù)如表2所示。各類有機(jī)磷組分回收率在75%～111%。

3 結(jié)論

本實驗用全自動固相萃取儀提取凈化蔬菜中有機(jī)磷類農(nóng)藥，優(yōu)化了提取溶劑、超聲提取時間，建立了全自動固相萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測蔬菜中有機(jī)磷類農(nóng)藥的方法。實驗濃度范圍內(nèi)，目標(biāo)物濃度與峰面積線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)在0.997～0.999，檢出限為0.009～0.015 mg/kg[10]。該方法自動化程度高，準(zhǔn)確度高，適用于大批量樣品中有機(jī)磷類農(nóng)藥的檢測。

參考文獻(xiàn)

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