黃祝剛，李亞囡，孫濱濱，賈佳，唐彬，鄭琪欣

（山東齊都藥業(yè)有限公司，山東淄博 255400）

近年來，注射液產(chǎn)品中殘留溶劑的安全性受到更加廣泛的關(guān)注。包裝印有的精美商標(biāo)中往往使用大量印刷油墨、有機溶劑和膠黏劑等，這些包裝輔材中殘留溶劑的單一成分濃度低，但種類多，當(dāng)若干種殘留溶劑共同作用時，其聯(lián)合毒性是不可忽視的，殘留溶劑含量嚴(yán)重時會導(dǎo)致神經(jīng)機能失調(diào)、癡呆及過敏性肺炎。常見的有乙醇、異丙醇、丙酮、丁酮、乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸異丙酯、甲苯、乙苯、二甲苯（含對二甲苯、鄰二甲苯、間二甲苯）等十幾種溶劑［1］。在其干燥過程中，大部分揮發(fā)掉的溶劑會污染大氣，而少量殘留在印刷品中的溶劑則可通過化學(xué)遷移對包裝內(nèi)容物造成污染，存在較大的質(zhì)量安全隱患。因此建立一種能快速測定注射液中有機溶劑殘留的分析方法具有重要的意義。

目前揮發(fā)性物質(zhì)的檢測主要采用氣相色譜法（GC）［2–4］、氣相色譜–質(zhì)譜法（GC-MS）［5–7］?，F(xiàn)有文獻(xiàn)雖有對溶劑殘留進(jìn)行分析的報道，但多針對食品包裝材料及原料藥較多［8–15］，尚未見對葡萄糖氯化鈉注射液中溶劑殘留相關(guān)測定的報道。筆者建立了一種能快速測定葡萄糖氯化鈉注射液中12 種溶劑殘留的分析方法，為注射液產(chǎn)品中十幾種殘留溶劑同時測定提供了一種新的分析手段，可用于注射液產(chǎn)品的質(zhì)量控制。

1 實驗部分

1.1 主要儀器與試劑

氣相色譜儀：Agilent 7890A 型，配FID 檢測器，美國安捷倫科技有限公司；

頂空進(jìn)樣器：Agilent 7697A 型，美國安捷倫科技有限公司；

頂空瓶：20 mL，美國安捷倫科技有限公司；

電子天平：SQP 型，北京賽多利斯科學(xué)儀器有限公司；

立式壓力蒸汽滅菌器：LMQ.C–80E 型，新華醫(yī)療SHINVA；

葡萄糖氯化鈉注射液：100 mL，含5 g 葡萄糖與0.9 g 氯化鈉，三層共擠輸液用袋包裝（彩色印刷），批 號 為8C18102801，8C18102802，8C18102803，山東齊都藥業(yè)有限公司；

氮氣：99.999%，淄博桓臺瑞豐化工有限公司；

乙醇、異丙醇、丙酮、乙酸乙酯、N，N-二甲基甲酰胺（DMF）：分析純，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司；

丁酮、甲苯：分析純，永華化學(xué)科技（江蘇）有限公司；

乙酸丁酯、乙酸正丙酯、乙苯、對二甲苯、間二甲苯：分析純，阿拉丁科技（中國）有限公司

鄰二甲苯：分析純，美國Sigma–Aldrich 公司。

1.2 儀器工作條件

色 譜 柱：HP–INNOWAX 毛 細(xì) 管 色 譜 柱（60 m×320 μm，0.5 μm，美國安捷倫科技有限公司）；升溫程序：起始溫度50℃，以5℃／min 的速率升溫至100℃，維持4 min，然后以30℃／min 的速率升溫至200℃，維持5 min；載氣：氮氣，流量為2.0 mL／min；進(jìn)樣口溫度：200℃；分流比：10∶1；檢測器溫度：250℃；頂空瓶平衡溫度：90℃；平衡時間：30 min。

1.3 溶液配制

混合對照品貯備液：分別精密量取乙醇30.6 μL、異丙醇31.8 μL、丙酮31.9 μL、丁酮31 μL、乙酸乙酯27.7 μL、乙酸丁酯28.3 μL、乙酸正丙酯28.2 μL、甲苯5.14 μL、乙苯12.5 μL、鄰二甲苯12.6 μL、間二甲苯12.3 μL、對二甲苯12.5 μL，置于同一10 mL 量瓶中，用DMF 稀釋定容至標(biāo)線，搖勻，配制成乙醇、異丙醇、丙酮、丁酮、乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸異丙酯、甲苯、乙苯、對二甲苯、鄰二甲苯、間二甲苯的質(zhì)量濃度分別為2 497，2 498，2 503，2 497，2 499，2 498，2 504，4 450，1 088，1 086，1 085，1 082 μg／mL 的混合對照品貯備液。

混合對照品溶液：精密量取混合對照品貯備液20 μL，置于已精密加入2 mL 純化水的頂空瓶中，密封，配制成乙醇、異丙醇、丙酮、丁酮、乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸異丙酯、甲苯、乙苯、對二甲苯、鄰二甲苯、間二甲苯的濃度分別為24.97，24.98，25.03，24.97，24.99，24.98，25.04，4.45，10.88，10.86，10.85，10.82 μg／mL 的混合對照品溶液。

供試品溶液：精密量取葡萄糖氯化鈉注射液2 mL 置20 mL 頂空瓶，精密加入DMF 20 μL，密封。

空白溶劑：取DMF 20 μL，置于預(yù)先加入2 mL純化水的頂空瓶中，密封。

1.4 方法學(xué)驗證

殘留溶劑測定法參考中國藥典2015 年版四部通則0861 殘留溶劑測定法［16］。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜柱的選擇

在現(xiàn)有的試驗條件下，選擇不同極性的毛細(xì)管柱DB–624，DB–WAX，HP–INNOWAX 進(jìn)行比較，試驗結(jié)果表明HP–INNOWAX 柱的分離效果最好，靈敏度高，且無干擾，故選擇HP–INNOWAX 毛細(xì)管柱為工作色譜柱。

2.2 頂空平衡時間、平衡溫度、柱流速的確定

考察了85，90，95℃平衡30 min 對各待測成分測定的影響，發(fā)現(xiàn)溫度升高促進(jìn)靈敏度提高，綜合考慮各溶劑靈敏度增加程度，儀器性能的參數(shù)，最終選擇90℃作為平衡溫度。

分別于90℃平衡25，30，35 min 后進(jìn)樣分析，結(jié)果表明，30 min 時各主成分的色譜峰面積最大，故選擇平衡時間為30 min。

考察了柱流量分別為1.0，1.8，2.0，2.2 mL／min對各待測成分測定結(jié)果的影響。結(jié)果表明，柱流量為2.0 mL／min 時，分離效果最好，故選擇柱流量為2.0 mL／min。

2.3 專屬性試驗

在1.2 色譜條件下，分別取空白溶劑、混合對照品溶液依次頂空進(jìn)樣分析，色譜圖見圖1、圖2。丙酮、乙酸乙酯、丁酮、異丙醇、乙醇、乙酸正丙酯、甲苯、乙酸丁酯、乙苯、對二甲苯、間二甲苯、鄰二甲苯各峰之間的分離度分別為10.7，3.6，3.3，2.1，9.9，22.9，6.7，20.1，2.6，2.3，15.2，符合檢測要求?？瞻兹軇┰谙鄳?yīng)的保留時間處均無色譜峰出現(xiàn)，對檢測無干擾。由此可見，該方法專屬性符合要求。

圖1 空白溶劑

圖2 混合對照品溶液色譜圖

2.4 檢出限與定量限

通過逐級降低濃度進(jìn)樣測定，檢出限按信噪比S／N=3 計算，定量限按信噪比S／N=10 計算。丙酮、乙酸乙酯、丁酮、異丙醇、乙醇、乙酸正丙酯、甲苯、乙酸丁酯、乙苯、對二甲苯、間二甲苯、鄰二甲苯檢出限分別為0.055，0.019，0.023，0.070，0.155，0.013，0.003，0.009，0.004，0.004，0.004，0.005 μg／mL；定量限分別為0.170，0.058，0.069，0.210，0.464，0.038，0.009，0.029，0.013，0.013，0.013，0.016 μg／mL。

2.5 線性回歸方程與線性范圍

選擇定量限濃度作為線性下限濃度，選擇1.5倍混合對照品溶液濃度作為上限濃度，另外再選取兩個濃度間的3 個不同濃度的溶液進(jìn)行試驗，色譜峰面積與12 種溶劑的質(zhì)量濃度成良好的線性關(guān)系，結(jié)果見表1。

表1 12 種殘留溶劑的線性范圍、線性方程與相關(guān)系數(shù)

2.6 精密度試驗

依法制備對照品溶液，并同法制備供試品溶液。取對照品溶液連續(xù)進(jìn)樣2 次、供試品溶液連續(xù)進(jìn)樣6 次，記錄色譜圖，按外標(biāo)法計算供試品中各物質(zhì)的含量。丙酮、乙酸乙酯、丁酮、異丙醇、乙醇、乙酸正丙酯、甲苯、乙酸丁酯、乙苯、對二甲苯、間二甲苯、鄰二甲苯含量測定結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為2.4%，2.9%，2.9%，2.4%，2.2%，3.1%，3.6%，2.9%，5.1%，5.6%，5.1%，4.5%（n=6），表明該方法重復(fù)性良好。

2.7 溶液穩(wěn)定性試驗

按實驗方法制備對照品溶液，分別于0，2，4，6，8，12 h進(jìn)樣測定，記錄色譜峰面積。結(jié)果表明，丙酮、乙酸乙酯、丁酮、異丙醇、乙醇、乙酸正丙酯、甲苯、乙酸丁酯、乙苯、對二甲苯、間二甲苯、鄰二甲苯色譜峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為6.02%，7.18%，6.67%，5.44%，4.90%，7.46%，6.09%，7.58%，6.01%，5.86%，5.62%，5.74%，表明溶液在12 h 內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.8 加標(biāo)回收試驗

按1.4 平行制備9 份供試品溶液，將供試品溶液分成3 組，分別加入限量濃度的80%，100%，120%的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，進(jìn)行加標(biāo)回收試驗，結(jié)果列于表2。由表2 可知，12 種殘留溶劑的加標(biāo)回收率為90.6%～109.0%，表明該方法具有較高的準(zhǔn)確度。

表2 加標(biāo)回收試驗結(jié)果

3 結(jié)語

建立了彩色印刷包裝的葡萄糖氯化鈉注射液中12 種殘留溶劑（乙醇、異丙醇、丙酮、丁酮、乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸異丙酯、甲苯、乙苯、對二甲苯、鄰二甲苯、間二甲苯）的測定方法。該方法集樣品前處理，進(jìn)樣于一體，操作簡便、穩(wěn)定、重復(fù)性好，測定結(jié)果準(zhǔn)確可靠。該方法適用于注射液中殘留溶劑檢測，為注射液中十幾種殘留溶劑同時測定提供了一種新的分析手段。