韓永平 韓 勇 劉玉潔
1.山東省日照市五蓮縣畜牧獸醫(yī)管理服務(wù)中心中至畜牧獸醫(yī)站,山東日照 262300;2.山東省日照市畜牧獸醫(yī)管理服務(wù)中心,山東日照 276800
豬偽狂犬病是由偽狂犬病毒所引起的豬的急性傳染病,該病流行特點(diǎn)是暴發(fā)性,且新生仔豬、斷奶仔豬、成年豬等不同階段、不同類型的豬都易感[1]。偽狂犬病毒是垂直傳播疫病,不僅引起母豬繁殖障礙,還能引起仔豬大量死亡,嚴(yán)重危害畜牧業(yè)。偽狂犬病是需要養(yǎng)殖場(戶)防控凈化的一種主要疫病,近年來越來越受到養(yǎng)殖場(戶)重視。為做好豬偽狂犬病的防控,山東省日照市畜牧獸醫(yī)管理服務(wù)中心結(jié)合春季防疫,抽檢養(yǎng)殖場(戶)8 個,了解豬群偽狂犬病抗體水平,為科學(xué)防控豬偽狂犬病提供技術(shù)支撐。
2019年5月10-20日,本試驗(yàn)在山東省日照市畜牧獸醫(yī)管理服務(wù)中心實(shí)驗(yàn)室開展,方法采用豬偽狂犬病抗體ELISA。
對全市8 家養(yǎng)豬場(戶)進(jìn)行抽樣檢測,共抽查280 份血清。每個豬場采集全血不少于5 mL,分離的血清不少于1 mL。按照群內(nèi)免疫合格率90%、置信水平95%、可接受誤差10%,每個場點(diǎn)采集樣品35 份。2019年5月抽檢8 家,共抽查280 份血清,具體抽樣情況見表1。
表1 日照市養(yǎng)豬場(戶)偽狂犬病監(jiān)測抽樣情況
豬偽狂犬抗體ELISA 檢測試劑盒購自武漢科前生物公司,批號為190313。
酶標(biāo)儀為美國MD 生產(chǎn),型號為SpectraMax 190;恒溫培養(yǎng)箱為上海迅播;移液器為百得公司生產(chǎn)。
每孔加入100 μL 樣品,貼上膜后37 ℃作用45 min,洗板機(jī)洗劑5 次;加入酶標(biāo)物,37 ℃作用20 min,洗板機(jī)洗劑5 次,加入底物反應(yīng)10 min;最后加入終止液,630 nm 測OD 值。
結(jié)果判定:陰性對照孔-陽性對照孔的OD 值>0.3 結(jié)果成立。S 為樣品OD 值,N 為陽性對照孔的OD 值。樣品OD 值/陽性對照孔的OD 值≤0.3 為陽性,>0.3 判為陰性。
檢測結(jié)果顯示(表2):血清檢測280 份,其中免疫合格(判定結(jié)果為陽性)244 份,合格率87.1%,可以看出豬偽狂犬病抗體總體水平>80%。
表2 日照市養(yǎng)豬場(戶)偽狂犬病抗體檢測
全市共抽檢場(戶)8 個,其中種豬場1 個,規(guī)模場5 個,養(yǎng)殖戶2 個,280 份樣品,244 份合格,合格率87.1%,檢測表明日照市豬偽狂犬病抗體總體水平較好。
根據(jù)檢測結(jié)果,日照市豬偽狂犬病抗體水平高達(dá)87.1%,發(fā)生豬偽狂犬病的風(fēng)險較低。種豬場和規(guī)模場免疫效果較好,達(dá)到90%以上,能抵抗病毒的入侵。但一般散養(yǎng)戶由于免疫次數(shù)較少,合格率僅有72.9%,存在一定的疫情風(fēng)險。
本次試驗(yàn)抽樣方法為先抽取場點(diǎn),在場點(diǎn)內(nèi)再抽取個體的抽樣方式開展監(jiān)測采樣。但是由于資金和人力的限制,養(yǎng)殖場抽樣數(shù)量較少,不能最大限度地反映全市豬偽狂犬病免疫抗體的水平。