曾占壯，張新艷，王劍鋒，余培建

(福建省淡水水產(chǎn)研究所，福建 福州 350002)

棘胸蛙(Ranaspinosa)，又名石蛙、石雞、石鱗、石凍、谷凍等，是我國特有的大型食用蛙類，因其肉質(zhì)細(xì)嫩、味道甘美、營養(yǎng)豐富，且具有滋補強(qiáng)身、清心潤肺等保健與藥用價值，備受人們青睞，但由于過度抓捕及人類活動(化肥、農(nóng)藥污染水源，濫砍濫伐等)對其野生生境的破壞，致使其野生種群數(shù)量大幅下降，導(dǎo)致市場價格逐年上漲，人們只得轉(zhuǎn)而尋求人工養(yǎng)殖，因而棘胸蛙被認(rèn)為是最具市場潛力的養(yǎng)殖品種之一。

我國棘胸蛙的人工養(yǎng)殖始于20世紀(jì)80年代，然而隨著人工養(yǎng)殖的發(fā)展，以及養(yǎng)殖密度的提高，病害發(fā)生的影響也日益突出，日漸成為制約棘胸蛙養(yǎng)殖業(yè)可持續(xù)健康發(fā)展的主要因素之一。本文針對福建省棘胸蛙養(yǎng)殖過程中各類病害的發(fā)生與流行進(jìn)行調(diào)查，以期掌握福建省棘胸蛙養(yǎng)殖過程中病害的發(fā)生情況，為養(yǎng)殖生產(chǎn)中的病害防控提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 調(diào)查點設(shè)置

在南平市順昌縣、漳州市華安縣、龍巖市武平縣、寧德市屏南縣、福州市閩侯縣和閩清縣選取7個具有一定養(yǎng)殖規(guī)模和技術(shù)力量的棘胸蛙養(yǎng)殖場作為固定調(diào)查點，總養(yǎng)殖面積17.53 hm2，各固定調(diào)查點周圍的養(yǎng)殖場作為聯(lián)系調(diào)查點。

1.2 調(diào)查時間及頻率

對固定調(diào)查點的調(diào)查從2015年9月持續(xù)至2017年12月，在高溫季節(jié)(5月至9月)每月進(jìn)行2次，其余時間(10月至翌年4月)每月進(jìn)行1次。

1.3 調(diào)查方法

通過向各固定調(diào)查點發(fā)放《養(yǎng)殖棘胸蛙病害調(diào)查表》，由各調(diào)查點填寫病害發(fā)生情況及水質(zhì)狀況并定期回收，形成以固定病害調(diào)查點監(jiān)測病害發(fā)生情況，輔以門出診和不定期巡回調(diào)查方式進(jìn)行面上普查，向養(yǎng)殖業(yè)者了解病害發(fā)生、流行情況和死亡情況，建立以點輻射至面的調(diào)查模式。調(diào)查期間，病害的診斷采用目檢和鏡檢的方式進(jìn)行[1-2]。

根據(jù)各調(diào)查點填寫并反饋的《棘胸蛙養(yǎng)殖病害調(diào)查表》及巡回普查所得數(shù)據(jù)，計算各種病害的發(fā)病率和死亡率[2-3]。

發(fā)病率=調(diào)查的發(fā)病面積/調(diào)查的養(yǎng)殖面積×100%

死亡率=發(fā)病面積內(nèi)的死亡數(shù)/調(diào)查面積內(nèi)的總放養(yǎng)數(shù)×100%

2 結(jié)果與分析

2.1 棘胸蛙養(yǎng)殖病害發(fā)生總體狀況

病害調(diào)查結(jié)果顯示，福建省棘胸蛙養(yǎng)殖過程中發(fā)生的病害主要有17種。在蝌蚪期和幼成蛙期，發(fā)生的病害種類并不相同，在蝌蚪期發(fā)生的病害有10種，在幼成蛙期發(fā)生的病害有7種。

調(diào)查發(fā)現(xiàn)，就具體病害而言，福建省棘胸蛙養(yǎng)殖過程中，危害最嚴(yán)重的是蝌蚪期的六鞭毛蟲病，其年平均發(fā)病率和年平均死亡率分別為22.5%和13.1%；第二為蝌蚪期的吸管蟲病，其年平均發(fā)病率和年平均死亡率分別為25.2%和12.4%；第三為幼成蛙期的歪頭病，其年平均發(fā)病率和年平均死亡率分別為16.5%和8.6%；第四為蝌蚪期的爛鰓病，其年平均發(fā)病率和年平均死亡率分別為11.3%和6.7%；其余疾病的危害不是太嚴(yán)重，發(fā)病率和死亡率均較低。

具體病害種類及其年平均發(fā)病率、年平均死亡率詳見表1、圖1和圖2。

表1 棘胸蛙養(yǎng)殖病害發(fā)生總體情況

注：圖1、2病名同表1。

Note:The name of diseases in figure 1 and figure 2 were the same as table 1.

2.2 棘胸蛙養(yǎng)殖主要病害的流行病學(xué)特征

2.2.1 棘胸蛙養(yǎng)殖病害發(fā)生總體時間分布

病害調(diào)查結(jié)果顯示(圖3)，在福建省棘胸蛙養(yǎng)殖過程中，病害的發(fā)生與死亡均主要集中于7—10月的夏秋高溫季節(jié)，而在冬春低溫季節(jié)，其病害的發(fā)生率與死亡率均較低。

2.2.2 養(yǎng)殖棘胸蛙主要病害的流行與危害

1)六鞭毛蟲病

六鞭毛蟲病發(fā)生于棘胸蛙蝌蚪期，病原為六鞭毛蟲(Hexamita)。六鞭毛蟲蟲體呈卵圓型，游動活潑、迅速，大小約(6～8)(10～12)μm，具四對鞭毛，前鞭毛三對，游離于蟲體前端，后鞭毛一對，沿蟲體向后延伸，細(xì)胞核一對，位于蟲體前端，為卵圓型或香腸型(圖4)。病原體寄生于蝌蚪消化道，少量寄生時蝌蚪無癥狀，只有大量寄生時蝌蚪才發(fā)病。臨床癥狀主要為患病蝌蚪食欲減退，體色變淺，游動遲緩，形體消瘦，腹部膨脹，解剖可見腹腔嚴(yán)重積水。

本病一年四季皆可發(fā)生，流行于春末至秋初高溫季節(jié)，流行高峰為6—9月，水源為山泉水的養(yǎng)殖場易發(fā)生；危害嚴(yán)重，發(fā)病池塘的蝌蚪嚴(yán)重的日死亡率可達(dá)5%～10%，部分養(yǎng)殖場的總體死亡率則在90%以上，甚至全軍覆沒，是影響棘胸蛙蝌蚪養(yǎng)殖成活率的主要疾病之一(圖5)。

2)吸管蟲病

吸管蟲病發(fā)生于棘胸蛙蝌蚪期，病原為吸管蟲(Suctorida)。棘胸蛙寄生的吸管蟲蟲體側(cè)扁，厚、寬比約2∶3，體部呈細(xì)長的高杯狀，長約80～120 μm，寬約40～60 μm。鞘面光滑，鞘包被整個蟲體，鞘與柄的結(jié)合處無結(jié)節(jié)。兩乳狀突起伸出鞘外，每個突起上布滿長約30～50μm 的吸管(圖6)。病原體寄生于蝌蚪體表和鰓部，臨床癥狀主要為患病蝌蚪于水中打轉(zhuǎn)，最終蝌蚪體力衰竭或窒息而亡。

本病一年四季皆可發(fā)生，流行于夏秋高溫季節(jié)，流行高峰為7—8月，危害嚴(yán)重，引起的死亡率高，也是影響棘胸蛙蝌蚪養(yǎng)殖成活率的主要疾病之一(圖7)。

3)歪頭病

歪頭病是近年棘胸蛙養(yǎng)殖中新發(fā)現(xiàn)的一種疾病，疑為細(xì)菌引起[4-6]。典型癥狀表現(xiàn)為病蛙體色發(fā)黑或變淺，頭歪斜、失明，游動時于水中打轉(zhuǎn)，肝、腎、腸、胃等器官充血或出血。本病一年四季皆可發(fā)生，流行于春、夏和秋季，流行高峰為5—9月，流行水溫為20～25℃。幼蛙和成蛙均可感染，發(fā)病率和死亡率均較高，對幼蛙的危害尤其嚴(yán)重，病程長且防治困難，發(fā)病后死亡率可達(dá)15%以上(圖8)。

4)爛鰓病

爛鰓病是發(fā)生于棘胸蛙蝌蚪期的一種細(xì)菌性疾病，病原為柱狀黃桿菌(Flavobacteriumcloumnare)，該菌曾名黏球菌(Myxococcuspiscicola)[7-9]。臨床癥狀主要為鰓絲腐爛、缺損，于水面緩慢游動，呼吸困難。本病一般流行于4—10月，夏秋季為流行高峰，在養(yǎng)殖密度高或水質(zhì)受污染或池水老化的養(yǎng)殖池中易發(fā)生，尤其是暴雨過后水質(zhì)惡化時極易發(fā)生。對蝌蚪的危害較大，發(fā)病后可造成蝌蚪大量死亡(圖9)。

5)紅腿病

紅腿病發(fā)生于蝌蚪變態(tài)期及幼成蛙期，病原為嗜水氣單胞菌(A.hydrophila)[9-11]。典型癥狀表現(xiàn)為腿部皮膚出血發(fā)紅，后肢無力發(fā)抖，頭部伏地不吃不動，胃腸壁可見出血點，肝、腎、肺充血發(fā)紅。本病周年發(fā)生，流行水溫為20～25℃，故其一年有兩個流行高峰，即春末夏初與秋季，在炎熱的夏季其發(fā)病率和死亡率反而略有下降(圖10)?？傮w而言，本病在福建省近年棘胸蛙養(yǎng)殖中危害并不嚴(yán)重。

6)出血性敗血癥

出血性敗血癥在蝌蚪和幼成蛙中均可發(fā)生，病原為嗜水氣單胞菌(A.hydrophila)、鮑曼不動桿菌(Acinetobacterbaumannii)等[10-13]，其癥狀主要表現(xiàn)為患病蛙呈呆滯狀，或潛浮水中，活力差并停止進(jìn)食，體表尤其腹部出血發(fā)紅，腹腔內(nèi)積血水，皮下積水，肌肉有出血斑，腸道嚴(yán)重充血。本病一般流行于5—10月，夏秋季為流行高峰，是棘胸蛙養(yǎng)殖過程中危害嚴(yán)重的另一種細(xì)菌性疾病，表現(xiàn)為暴發(fā)性發(fā)生，且傳染性很強(qiáng)，引起的死亡率高(圖11)。

3 討論

3.1 棘胸蛙養(yǎng)殖病害的種類

目前無論國外還是國內(nèi)，蛙類病害的研究主要針對的是牛蛙(R.catesbiana)、 豹蛙(R.pipiens)、 虎紋蛙(R.rugulosa)和樹蛙(Rhacophorus)等種類，尤其是牛蛙，因其人工養(yǎng)殖最早、養(yǎng)殖范圍最廣，因此其病害研究也最為深入[10]。有關(guān)養(yǎng)殖棘胸蛙的病害，鮮見系統(tǒng)調(diào)查與研究的報道。

本文調(diào)查發(fā)現(xiàn)，棘胸蛙與其他水產(chǎn)動物一樣，在其養(yǎng)殖過程中，發(fā)生的病害可分為侵襲性疾病和非侵襲性疾病兩大類。養(yǎng)殖棘胸蛙的侵襲性疾病包括歪頭病、出血性敗血癥、吸管蟲病、六鞭毛蟲病、爛鰓病、水霉病等，共計15種，非侵襲性疾病包括氣泡病、彎體病2種，這與已有的少量報道一致[14-16]。由于本文系采用傳統(tǒng)的目檢和鏡檢方法對病害進(jìn)行診斷，未對各類病害進(jìn)行病原的實驗室分離鑒定或檢測，因此無法明確除了4種寄生蟲病1種真菌性疾病和2種非侵襲性病害外本文調(diào)查到的其他10種病害的類別屬性，但根據(jù)這10種病害的臨床表現(xiàn)及已有的研究報道，本文傾向判定這10種病害為細(xì)菌性疾病。因此，本文調(diào)查結(jié)果提示，福建省棘胸蛙養(yǎng)殖的主要病害有4類17種，分別為：寄生蟲疾病4種，細(xì)菌性疾病10種，真菌性疾病1種，非侵襲性疾病2種；蝌蚪期的病害有10種，幼成蛙期的病害有7種。

作為水產(chǎn)動物侵襲性疾病中的重要一類——病毒性疾病，國內(nèi)外在其他蛙類中已有很多研究與報道，感染蛙類的病毒主要為虹彩病毒科(Iridoviridae)蛙病毒屬(Ranavirus)的種類[17-23]，但有關(guān)棘胸蛙的病毒性疾病，國內(nèi)僅見胡金春等報道自棘胸蛙中分離到棘胸蛙虹彩病毒(QSIV)[24]。由于本文未對調(diào)查中發(fā)現(xiàn)的各類病害進(jìn)行病毒分離培養(yǎng)或檢測，各種病害尤其是具出血癥狀的紅腿病和出血性敗血癥中是否存在病毒感染，尚未可知。因而，在福建的棘胸蛙養(yǎng)殖中有無病毒性疾病的存在，還有待進(jìn)一步的研究。

3.2 棘胸蛙養(yǎng)殖病害的危害

調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在棘胸蛙養(yǎng)殖過程中，各類病害的危害隨不同養(yǎng)殖階段而有差異。在蝌蚪期，發(fā)生的病害有10種，危害最嚴(yán)重的是寄生蟲病，其中六鞭毛蟲病和吸管蟲病的危害尤其嚴(yán)重，且防治困難，兩者的年平均發(fā)病率分別為22.5%和25.2%，年平均死亡率分別為13.1%和12.4%，是目前影響棘胸蛙蝌蚪養(yǎng)殖成活率最主要的因素；爛鰓病的危害也較為嚴(yán)重，年平均發(fā)病率和年平均死亡率分別為11.3%和6.7%，其余7種病害的危害相對較輕。在幼成蛙期，調(diào)查發(fā)現(xiàn)的疾病根據(jù)癥狀及已有的報道可初步判定皆為細(xì)菌性疾病，危害嚴(yán)重的有歪頭病和出血性敗血癥，其中尤以歪頭病的危害最為嚴(yán)重。歪頭病在近年福建的棘胸蛙養(yǎng)殖場廣泛流行，其年平均發(fā)病率和年平均死亡率分別達(dá)到16.5%和8.6%，給眾多養(yǎng)殖場造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。本文調(diào)查發(fā)現(xiàn)，棘胸蛙歪頭病在生存環(huán)境惡化、蛙體免疫機(jī)能下降和高溫季節(jié)時易發(fā)生，養(yǎng)殖場從其他養(yǎng)蛙場購入未經(jīng)檢疫的棘胸蛙時也易發(fā)生。細(xì)菌性敗血癥的發(fā)生則與生存環(huán)境惡化、投喂的餌料敗壞等因素有關(guān)。而在牛蛙等其他蛙類品種養(yǎng)殖過程中危害嚴(yán)重的腐皮病、紅腿病等[25-28]，在近年福建的棘胸蛙養(yǎng)殖中，危害并不十分嚴(yán)重。

3.3 棘胸蛙養(yǎng)殖病害的流行特征

在棘胸蛙養(yǎng)殖過程中，病害的發(fā)生和死亡主要集中于夏秋高溫季節(jié)，多數(shù)病害在此季節(jié)引起的損失均較其他季節(jié)高，僅紅腿病一年有兩個流行高峰，即春末夏初與秋季，在炎熱的夏季其發(fā)病率和死亡率反而略有下降。在冬春低水溫季節(jié)，病害的種類較少，除極個別病害如水霉病外，其他病害在此季節(jié)發(fā)病率以及引起的死亡率均較低。