茶籽多糖羧甲基化修飾及其對油脂抗氧化作用研究

2020-07-14 11:13:18周麗明

中國油脂 2020年7期

周麗明, 張勇

(上饒師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，江西上饒 334001)

食用植物油中含有甾醇、生育酚、多酚、β-胡蘿卜素等生物活性物質(zhì)，其中生育酚和多酚具有抗氧化作用[15-16]。但在油脂精煉過程中會造成生物活性物質(zhì)減少，因此添加油脂抗氧化劑就成為保障油脂品質(zhì)的一種常見方法[17]。目前，食用油脂天然抗氧化劑分為油源性天然抗氧化劑和非油源性天然抗氧化劑[18]。油源性天然抗氧化劑來源于油料，既能保障油脂品質(zhì)，又能加強(qiáng)油料的綜合利用，從而具有重要的經(jīng)濟(jì)和社會價(jià)值。目前，將茶籽多糖作為油源性油脂抗氧化劑的研究還不多見。本項(xiàng)目組的前期研究[19]表明，茶籽多糖對油脂具有一定的抗氧化作用，但效果比傳統(tǒng)的油脂抗氧化劑稍弱。多糖的生物功能與其結(jié)構(gòu)有著緊密聯(lián)系，通過修飾多糖結(jié)構(gòu)以加強(qiáng)其生物功能已成為增強(qiáng)多糖應(yīng)用價(jià)值的一條有效途徑。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

油茶粕，江西華爾圣實(shí)業(yè)有限公司提供。金龍魚食用植物調(diào)和油，購于超市，氯仿、正丁醇、三羥甲基氨基甲烷、鹽酸、鄰苯三酚、乙二胺四乙酸、檸檬酸、特丁基對苯二酚、乙醚、無水乙醇、丙酮、氫氧化鈉、一氯乙酸鈉等均為分析純。

UV-2102.PC型紫外可見分光光度計(jì)，尤尼柯上海儀器有限公司；HH-6數(shù)顯恒溫水浴鍋，江西省博力儀器設(shè)備有限公司；AL204型電子天平，梅特勒-托利多儀器上海有限公司；TGL-16C型離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠；FD-1A-50型真空冷凍干燥機(jī)，上海繼譜電子科技有限公司；GZX-9076MBF型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 茶籽多糖制備

以油茶粕為原料，按文獻(xiàn)[6]操作，經(jīng)80%乙醇沉淀，離心，丙酮和乙醚分別洗滌沉淀，真空冷凍干燥后得茶籽多糖。

準(zhǔn)確稱取250 mg茶籽多糖，加入25 mL一定體積分?jǐn)?shù)的乙醇溶液，在一定溫度下充分?jǐn)嚢? h以混勻，然后加入一定質(zhì)量的NaOH，攪拌1 h以使多糖充分堿化，再緩慢加入一定質(zhì)量的一氯乙酸鈉，繼續(xù)攪拌一定時(shí)間后，自來水輔助快速冷卻至室溫，冰醋酸調(diào)pH至7.0，加入同體積無水乙醇，4℃靜置12 h，4 500 r/min離心10 min，將沉淀用蒸餾水溶解并定容至500 mL，得羧甲基化茶籽多糖(COSPC)溶液。

茶籽多糖溶液質(zhì)量濃度=茶籽多糖質(zhì)量(mg)/500 mL

1.2.3 羧甲基化茶籽多糖取代度的測定

在最佳羧甲基化修飾條件下按1.2.2操作，離心后的沉淀真空冷凍干燥即為羧甲基化茶籽多糖。按文獻(xiàn)[21]操作，測定羧甲基化茶籽多糖取代度。

1.2.4 茶籽多糖羧甲基化修飾前后對油脂的抗氧化作用

以30%乙醇為溶劑，配制質(zhì)量濃度分別為5、10 mg/mL的羧甲基化茶籽多糖溶液和茶籽多糖溶液。采用Schaal烘箱法研究茶籽多糖羧甲基化修飾前后對食用油脂的抗氧化作用。準(zhǔn)確稱取50.0 g食用調(diào)和油8份，分別置于250 mL錐形瓶中，其中2份分別加入1 mL 5 mg/mL的茶籽多糖溶液和羧甲基化茶籽多糖溶液，使多糖添加量為0.01%；2份分別加入1 mL 10 mg/mL的茶籽多糖溶液和羧甲基化茶籽多糖溶液，使多糖添加量為0.02%；以不添加任何物質(zhì)的食用調(diào)和油為空白對照；以添加1 mL 30%乙醇溶液的食用調(diào)和油為陰性對照；以分別加入1 mL 10 mg/mL檸檬酸的30%乙醇溶液、1 mL 10 mg/mL特丁基對苯二酚的30%乙醇溶液的食用調(diào)和油為陽性對照。同時(shí)做平行試樣。將全部樣品混合均勻后置于(65±1)℃恒溫干燥箱中強(qiáng)化貯存，定時(shí)振蕩混勻并改變樣品在干燥箱中的相對位置，每隔2 d取樣，按照GB/T 5009.37—2003測定過氧化值。研究茶籽多糖羧甲基化修飾前后對食用油脂的抗氧化作用，并與10 mg/mL的檸檬酸和特丁基對苯二酚溶液比較對食用油脂的抗氧化效果。