商華 信梁軍 李文媛

【摘要】目的 研究與分析姜黃素在阿爾茨海默病中對炎癥以及神經(jīng)元的保護(hù)機(jī)制。方法 選取實(shí)驗(yàn)室60例三月齡小鼠作為研究對象，其中40例APP/V717轉(zhuǎn)基因小鼠和20例C57BL/6小鼠，其中20例APP/V717轉(zhuǎn)基因小鼠為姜黃素治療組以及20例APP/V717轉(zhuǎn)基因小鼠為轉(zhuǎn)基因鼠對照組，20例C57BL/6小鼠為野生鼠對照組。其中兩個(gè)對照組均給予正常的鼠糧，而給予姜黃素治療組小鼠連續(xù)喂養(yǎng)9個(gè)月含有姜黃素的鼠糧。結(jié)果 在潛伏期內(nèi)，姜黃素治療組與轉(zhuǎn)基因小鼠的潛伏期時(shí)間存在顯著差異，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），轉(zhuǎn)基因小鼠組中的IL-1β以及TNF-α的表達(dá)最高，在野生型小鼠中表達(dá)最低，姜黃素治療組經(jīng)過治療后兩類指標(biāo)均顯著降低，兩兩比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。轉(zhuǎn)基因鼠對照組與姜黃素治療組、野生鼠對照組的Bax的表達(dá)、Bcl的表達(dá)量差異顯著，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 姜黃素在阿爾茨海默病中對炎癥可以有效地減少，可以將小鼠的認(rèn)知能力進(jìn)行改善。

【關(guān)鍵詞】姜黃素;阿爾茨海默病;炎癥;神經(jīng)元;保護(hù)機(jī)制

【中圖分類號】R742.5 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】ISSN.2095.6681.2020.14..02

阿爾茨海默病是臨床上最為常見的疾病之一，該類疾病嚴(yán)重危害患者的身心健康以及生活質(zhì)量[1]，本文研究與分析姜黃素在阿爾茨海默病中對炎癥以及神經(jīng)元的保護(hù)機(jī)制，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 ?一般資料

選取實(shí)驗(yàn)室60例三月齡小鼠作為研究對象，其中40例APP/V717轉(zhuǎn)基因小鼠和20例C57BL/6小鼠，其中20例APP/V717轉(zhuǎn)基因小鼠為姜黃素治療組以及20例APP/V717轉(zhuǎn)基因小鼠為轉(zhuǎn)基因鼠對照組，20例C57BL/6小鼠為野生鼠對照組。

1.2 ?水迷宮測試

直徑120 cm的圓形不銹鋼水池為本次研究的水迷宮測試，水深為30 cm，將4個(gè)入水點(diǎn)來注明在水迷宮上，將其分為4等分，在任一等分中放入一個(gè)平臺，直徑6 cm，高28 cm，在水迷宮重放入混合物（23～25℃的熱水、牛奶），水迷宮的高度要高平臺2 cm，將小鼠放入水迷宮的不同位置，讓小鼠在水迷宮內(nèi)游泳，對于在120 s內(nèi)未找到平臺的小鼠，則需要由實(shí)驗(yàn)者來對其進(jìn)行引導(dǎo)[2]。

1.3 ?取腦組織及Nissl染色

上述測試完畢后，對小鼠進(jìn)行灌注取腦操作，經(jīng)過右心室在水合氯醛麻醉下，對其進(jìn)行灌注處理，直至小鼠的肝臟呈現(xiàn)蒼白色，取出小鼠的腦組織，將小鼠一部分OCT進(jìn)行包埋，將一部分OCT進(jìn)行保存處理，保存的溫度為-80℃，隨后冰凍切片，隔5張切一片，共計(jì)切10個(gè)切片。在明膠中置入切好的腦片，讓其風(fēng)干，隨后進(jìn)行染色、脫色、二甲苯透明，最后進(jìn)行封片觀察計(jì)數(shù)[3]。

1.4 ?Western blot檢測

抽提蛋白，混合液為蛋白裂解液和細(xì)胞裂解液（體積1：9），混合完畢后進(jìn)行吹打混勻，隨后在混合液靜止后分裝上清，監(jiān)測蛋白濃度，內(nèi)參照β-action，隨后進(jìn)行分析掃描[4-5]。

2 結(jié) 果

2.1 ?小鼠的潛伏期時(shí)間對比

在潛伏期內(nèi)，姜黃素治療組與轉(zhuǎn)基因小鼠的潛伏期時(shí)間存在顯著差異，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.2 ?小鼠的神經(jīng)元損傷情況

野生鼠對照組小鼠的神經(jīng)元胞體呈現(xiàn)圓錐形或者圓形，胞質(zhì)染色較為清晰，且輪廓清晰，神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)存在多個(gè)尼氏小體，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因鼠對照組小鼠具有形態(tài)不完整的神經(jīng)元，且層次不清。而姜黃素治療組小鼠具有排列整齊的神經(jīng)細(xì)胞。

2.3 ?IL-1β、TNF-α的Western blot檢測

轉(zhuǎn)基因小鼠組中的IL-1β以及TNF-α的表達(dá)最高，在野生型小鼠中表達(dá)最低，姜黃素治療組經(jīng)過治療后兩類指標(biāo)均顯著降低，兩兩比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見圖1和圖2。

2.4 ?檢測凋亡的相關(guān)因子的Bax/Bcl表達(dá)

轉(zhuǎn)基因鼠對照組與姜黃素治療組、野生鼠對照組的Bax的表達(dá)、Bcl的表達(dá)量差異顯著，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見圖3和圖4。

3 討 論

本文研究結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)基因?qū)φ战M小鼠的潛伏期時(shí)間最長，而經(jīng)過姜黃素藥物進(jìn)行治療后，可以顯著縮短其潛伏期，達(dá)到與野生型對照組小鼠相同的水平，結(jié)果表明，AD小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力可以通過姜黃素來進(jìn)行有效地改善。同時(shí)結(jié)果表明，姜黃素可以將神經(jīng)損傷的現(xiàn)象進(jìn)行明顯減少，也可以有效地降低IL-1β以及TNF-α的表達(dá)，進(jìn)而對AD的癥狀進(jìn)行改善。同時(shí)研究結(jié)果提示AD小鼠的神經(jīng)發(fā)生凋亡可能與Bax/Bcl的表達(dá)平衡被破壞等情況有關(guān)，而Bax/Bcl水平平衡可以通過姜黃素進(jìn)行維持。

綜上所述，姜黃素在阿爾茨海默病中對炎癥可以有效地減少，可以將小鼠的認(rèn)知能力進(jìn)行改善。

參考文獻(xiàn)

[1] 方力群，王亞楠，高紅梅，等.姜黃素對阿爾茨海默病模型小鼠腦內(nèi)膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)的抑制作用[J].國際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志，2017，44（4）：347-351.

[2] 柳浦青，何冰冰，陳 ? 鋒.光基因技術(shù)調(diào)控星形膠質(zhì)細(xì)胞釋放ATP和谷氨酸及其對阿爾茨海默病神經(jīng)元保護(hù)機(jī)制的研究展望[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2017，14（31）：40-43.

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