朱 燕，武孔云 ，劉志剛

(貴陽(yáng)學(xué)院，貴州 貴陽(yáng) 550005)

太子參(孩兒參)，為石竹科多年生草本植物孩兒參[Pseudostellariaheterophylla(Miq.)PaxexPaxetHoffm.]的干燥塊根。為中國(guó)常用中藥之一, 具有益氣健脾、生津潤(rùn)肺的功效。[1]現(xiàn)代藥理學(xué)的研究發(fā)現(xiàn)表明，太子參具有治療慢性心衰、改善記憶、降低血糖、抗氧化活性等多種功效。[2-5]野生的太子參主要分布于吉林、遼寧、安徽、內(nèi)蒙古、河北、河南、山東、福建、江蘇、浙江、湖北、陜西、四川、西藏等地。[6]1957年以后，在中國(guó)開(kāi)始了栽培學(xué)的科學(xué)研究。[7]上世紀(jì)70年代前，主要是野生的，隨著社會(huì)上應(yīng)用量的增大，上世紀(jì)70年代后，就逐漸出現(xiàn)以栽培為主[8]，貴州省則是在上世紀(jì)90年代初才開(kāi)始，由當(dāng)時(shí)的藥農(nóng)從福建柘榮縣引種，然后在施秉縣牛大場(chǎng)鎮(zhèn)開(kāi)始種植，而且獲得了成功[9],使貴州成為續(xù)江蘇、安徽、山東、福建等主產(chǎn)區(qū)之后的又一個(gè)主要種植生產(chǎn)區(qū)，對(duì)貴州的藥業(yè)做出了十分卓越的貢獻(xiàn)。但是，太子參在貴州省的適宜生長(zhǎng)地區(qū)等級(jí)的劃分卻一直都沒(méi)有開(kāi)展，僅查到有兩篇文獻(xiàn)[10]報(bào)道了施秉縣及黔南州太子參的適宜性方面研究。為此，本研究在貴州省科技廳的資助下，開(kāi)展了“貴州省太子參適生地等級(jí)劃分的研究”的課題。其研究結(jié)論如下：赫章、威寧兩個(gè)縣作為最適種植地區(qū)；水城縣、六盤水市鐘山區(qū)、納雍縣，織金縣和畢節(jié)市作為比較適種植地區(qū)；貴陽(yáng)市，清鎮(zhèn)市，安順市，修文縣，平壩縣，普定縣，六盤水盤縣、大方縣，黔西縣，正安縣，綏陽(yáng)縣，金沙縣，六枝縣作為適宜種植地區(qū)。[11]本文將對(duì)最適種植地區(qū)以及適宜種植地區(qū)所產(chǎn)生的太子參質(zhì)量進(jìn)行了比較研究，進(jìn)一步為貴州省太子參的生產(chǎn)結(jié)構(gòu)以及布局、產(chǎn)業(yè)鏈的發(fā)展提供了必要的科學(xué)依據(jù)和一定的研究基礎(chǔ)。

1 實(shí)驗(yàn)材料、試藥及儀器

1.1 材料

太子參種根于2016年7月10日購(gòu)于貴州省施秉縣茂源生物資源開(kāi)發(fā)有限公司，經(jīng)貴陽(yáng)學(xué)院武孔云教授鑒定為石竹科多年生草本植物孩兒參[Pseudostellariaheterophylla(Miq.)PaxexPaxetHoffm.] 的新鮮塊根，選擇頂芽健壯、完整無(wú)損、參體中等、大小齊整、無(wú)病蟲害的塊根作為種栽，種栽放置于陰處，稍晾干表面水分后，放于2倍濕潤(rùn)的潔凈干凈河砂中，分層裝入進(jìn)木箱內(nèi)，放置在通風(fēng)干燥陰涼的地方貯藏。

1.2 試藥

人參皂苷Rb1(供含測(cè)用，批號(hào)：150704-201623，購(gòu)于中國(guó)食品藥品檢定研究所)，葡糖糖(含量不低于98，天津科密歐化學(xué)試劑開(kāi)發(fā)中心)，D101型大孔吸附樹脂(天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所)，95%乙醇(分析純，重慶川東化工有限公司)，香草醛(分析純，天津市科密歐化學(xué)試劑開(kāi)發(fā)中心)，冰醋酸(分析純，天津市光復(fù)科技發(fā)展有限公司)，高氯酸(分析純，天津政成化學(xué)制品有限公司)，苯酚(分析純，上海宏星化工有限公司)，濃硫酸(分析純，重慶川東化工有限公司)，水為自制蒸餾水。

1.3 儀器

紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)(島津UV-2501PC);AE-240雙量程電子分析天平，量程：萬(wàn)分之一和十萬(wàn)分之一兩擋(梅特勒-托利多上海有限公司)；超聲波清洗器(KQ5200DE型，昆山市超聲儀器有限公司)。

1.4 實(shí)驗(yàn)材料獲取(栽培)[12]

1.4.1選地

根據(jù)貴州省太子參適生地等級(jí)劃分的研究結(jié)果[11]，在最適宜地區(qū)中選擇了2個(gè)縣6個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)(赫章：白果、媽姑、野馬川；威寧：草海、金鐘、黑石頭)，在適宜地區(qū)選擇了1個(gè)市3個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)(貴陽(yáng)：水田、羊昌、下壩)。

1.4.2整地

選擇坡向北面或者東面的丘陵坡地，或者地勢(shì)比較高的平地。土壤均以疏松、肥沃、排水性好、富含腐殖質(zhì)的砂質(zhì)壤土。過(guò)多砂、過(guò)于黏或者過(guò)于貧瘠、排水不良的低洼地塊都不適宜作為種植地。前一茬一般以豆類、蔬菜類等早秋的農(nóng)作物為好。待前農(nóng)作物收獲之后，將土壤進(jìn)行深翻25～30cm，每20m2施入腐熟的廄肥75kg、過(guò)磷酸鈣0.9kg，翻入土中作為基肥。在栽種前再進(jìn)行一次淺犁，作成寬為1.2m、長(zhǎng)為2.4m、高為10cm 的高廂小區(qū)，四周開(kāi)一個(gè)30～50cm 寬的排水溝，以利于種植過(guò)程中排水。

1.4.3定植

在2016年10—11月之間，按照15cm 開(kāi)一橫溝，溝的深度為8cm 左右。將太子參種根平栽入溝內(nèi)，間隔為15cm，覆土后耬平廂面，在上面蓋一薄層稻草或塑料薄膜用以保濕保溫之用。

1.4.4田間管理

(1)中耕除草： 太子參的植株比較矮小，在其生長(zhǎng)期間應(yīng)該盡量保持田間沒(méi)有雜草。在種植過(guò)程中，出苗期要除一次草，苗出齊后又要進(jìn)行淺松土并且要除一次草，松土的時(shí)候要注意進(jìn)行淺松，否則會(huì)傷到幼根。之后要做到經(jīng)常巡視，見(jiàn)草就必須除，整個(gè)過(guò)程需要保持田間沒(méi)有雜草。5 月上旬，等待植株封行以后，就可以停止除草了。

(2)追肥： 在出苗前，結(jié)合除草可以追施一次肥，主要是稀薄的人畜糞水，每20m238kg。待苗出齊以后，還可再追施一次尿素，每20m2600g，這樣便于促進(jìn)幼苗的健壯生長(zhǎng)。4 月底至5月初期間，植株封行前再追施一次速效復(fù)合肥，每20m21kg。

(3)排水灌水 ：太子參忌干旱和水漬，在雨季及大雨后都要及時(shí)的進(jìn)行疏溝排水。而在干旱的季節(jié)里，須注意澆水，要經(jīng)常保持土壤的濕潤(rùn)，才能促使根部發(fā)育良好。

1.5 采收

于2017年10—11月間進(jìn)行采挖。用干凈的清水將太子參的根洗凈。先搓去須根，待稱取鮮重后，即可薄攤于曬場(chǎng)上用太陽(yáng)光直接曬干。

1.6 稱重

將各小區(qū)的產(chǎn)品進(jìn)行裝袋，稱重、記錄，保存在干燥的通風(fēng)處。用于其他成分的含量分析實(shí)驗(yàn)。重量見(jiàn)表1。

2 含量比較研究

2.1 環(huán)肽B含量測(cè)定

將不同產(chǎn)區(qū)的太子參樣品放于80℃烘箱中烘干，過(guò)四號(hào)篩后再于80℃烘箱中烘至恒重，密閉后放于干燥器中保存。再稱取太子參藥材的粉末約2g，精密稱定，置于100mL 具塞錐形瓶?jī)?nèi)，加入50mL 甲醇，精密稱定，用超聲波提取45min，取出，放置室溫，再用甲醇補(bǔ)足減失的重量。過(guò)濾后，放于蒸發(fā)皿中，在水浴鍋上揮干甲醇，最后再用甲醇溶解殘?jiān)?，定容?0mL 容量瓶中，用微孔濾膜過(guò)濾，得供試品溶液。精密吸取供試品溶液20μL，注入SUPELCO C18住，以乙腈為流動(dòng)相A、水為流動(dòng)相B，按文獻(xiàn)[13]規(guī)定的梯度進(jìn)行洗脫，在流速：0.9mL·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)203nm；柱溫：40℃。理論塔板數(shù)不低于1500的條件下進(jìn)行測(cè)定，以測(cè)得太子參環(huán)肽B的峰面積，計(jì)算環(huán)肽B的含量。結(jié)果見(jiàn)表2。

2.2 總皂苷及總多糖的測(cè)定

2.2.1總皂苷含量測(cè)定

把不同產(chǎn)區(qū)太子參樣品放于80℃烘箱中烘干，過(guò)四號(hào)篩后再放于80℃烘箱烘至恒重，密閉后放于干燥器中保存。取太子參藥材粉末大約0.2g，精密稱定，加入70%乙醇40mL，超聲提取0.5h，過(guò)濾后于水浴中揮干乙醇，用10mL 蒸餾水

溶解殘?jiān)?，上D101型大孔吸附樹脂柱(柱內(nèi)徑1.5cm，高4cm，用95%乙醇浸泡4小時(shí)，濕法裝柱后，繼續(xù)用95%乙醇在柱上洗至流出液用水稀釋后不渾濁為止，最后再用大量蒸餾水反復(fù)洗滌，至流出液沒(méi)有明顯醇味，浸泡備用)，用50mL 蒸餾水洗掉其中的水溶性雜質(zhì)，再用70%乙醇25mL 上柱進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，于水浴上揮干，用甲醇溶解殘?jiān)?，定容?0mL ，即得供試品溶液。同法做空白試劑，用紫外-可見(jiàn)光光度計(jì)(島津UV-2501PC)在549nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，計(jì)算出總皂苷(按人參皂苷Rb1計(jì))的含量，結(jié)果見(jiàn)表2。

2.2.2總多糖測(cè)定

把不同產(chǎn)區(qū)的太子參樣品放于80℃烘箱中烘干，過(guò)四號(hào)篩后再放于80℃烘箱中烘至恒重，密閉后放于干燥器中保存。取太子參藥材粉末大約0.1g，精密稱定，用70mL 乙醇，索氏提取回流提取2h，濾紙連同藥渣一起放于100mL 具有塞錐形瓶中，加50mL 蒸餾水，稱定重量，再加熱回流提取1h，取出，放冷至室溫，稱定重量，用水來(lái)補(bǔ)足減少的重量，搖勻過(guò)濾。精密吸取續(xù)濾液1mL ，置于10mL 容量瓶中，再加水稀釋至刻度，搖勻放置，再精密量取1mL ，置于具塞的比色管中，精密加入4%苯酚溶液1mL ，搖勻放置。再迅速精密加入濃硫酸5mL ，搖勻，置于40℃水浴中保溫半小時(shí)，取出，放冷至室溫，即得供試品溶液。同法作空白試劑，用紫外-可見(jiàn)光光度計(jì)在490nm處測(cè)定吸光度，計(jì)算出多糖(按葡萄糖計(jì))的含量，結(jié)果見(jiàn)表2。

3 結(jié)果和討論

3.1 結(jié)果

表1 不同產(chǎn)地太子參產(chǎn)量測(cè)定結(jié)果n=3

表2 不同產(chǎn)地太子參環(huán)肽B、總皂苷、總多糖含量測(cè)定結(jié)果

3.2 討論

從表1可以看出，威寧、赫章兩地栽培的太子參，其產(chǎn)量明顯高于貴陽(yáng)地區(qū)栽培的太子參，前者分布于最適宜區(qū)域，而后者分布于適宜區(qū)域。原因是由于赫章、威寧日夜溫差大，年溫差小，年光照時(shí)間長(zhǎng)(威寧：1812小時(shí))等獨(dú)特的氣候條件造成的。日夜溫差大、光照強(qiáng)使得太子參白天光合作用強(qiáng)，而晚上的呼吸作用弱，這樣就導(dǎo)致積累物質(zhì)多，從而產(chǎn)量高。此外，年溫差小也可能是太子參增產(chǎn)的主要原因之一，太子參在氣溫超過(guò)30℃時(shí)的條件下生長(zhǎng)會(huì)停滯，進(jìn)入休眠的狀態(tài)，而威寧、赫章7月份均溫為17℃，從而避免了太子參的夏季休眠、延長(zhǎng)了其生長(zhǎng)的時(shí)期， 非常利于太子參的生長(zhǎng)。另外，由于威寧、赫章海拔比較高的原因，太子參退化緩慢，也為生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)太子參創(chuàng)造了有利條件，在這樣的條件下，產(chǎn)出的太子參個(gè)頭大、產(chǎn)量高。從表2可以看出，三個(gè)縣市九個(gè)地方栽培的太子參在環(huán)肽B、總皂苷、總多糖含量方面的差異不是很明顯，可以認(rèn)為在實(shí)驗(yàn)范圍內(nèi)各地栽培的太子參質(zhì)量趨于一致。

綜上所述，赫章、威寧兩地太子參的產(chǎn)量比貴州其他適宜區(qū)(貴陽(yáng))增產(chǎn)了24.1%，進(jìn)一步證明了赫章、威寧在貴州省內(nèi)來(lái)說(shuō)是最適宜種植太子參的區(qū)域。