劉夢楠 王敏 白玉瑩 徐文娟 李春帥 鄒秦文 李向日 林瑞超

摘要?目的：通過考察不同包裝下三七粉和熟三七粉外觀性狀、水分及有效成分含量等變化情況，確定包裝對三七粉和熟三七粉穩(wěn)定性的影響。方法：在恒溫恒濕箱中對三七粉和熟三七粉進行加速試驗，于0、1、2、3、6月對三七粉和熟三七粉外觀性狀及含水量進行考察，同時以皂苷類成分的含量作為檢測指標(biāo)，利用本課題組前期建立的高效液相色譜法，對三七粉和熟三七粉中的皂苷類有效成分含量進行檢測，并統(tǒng)計分析。結(jié)果：所有樣品經(jīng)6個月加速試驗后觀察未見霉變、蟲蛀等現(xiàn)象，外觀性狀基本一致，水分含量增高但其含量仍符合《中華人民共和國藥典》（2015版）規(guī)定（水分含量≤14%）。三七粉中人參皂苷Rg1、Rb1、三七皂苷R1含量的總和及熟三七粉中人參皂苷Rk1、Rh4含量的總和無顯著減少。真空與非真空2種包裝狀態(tài)對飲片有效成分含量的影響較小，但對飲片的吸濕性有影響。結(jié)論：PTE/PE復(fù)合而成的食品級鋁塑復(fù)合膜是較理想的包材，能保證三七粉和熟三七粉質(zhì)量的穩(wěn)定，真空包裝可以顯著降低樣品的吸濕程度。

關(guān)鍵詞?三七粉;熟三七粉;加速試驗;有效成分;穩(wěn)定性

Abstract?Objective：To determine the effects of packaging on the stability of Radix Notoginseng powder and cooked Radix Notoginseng powder by investigating the changes of appearance，water content and effective component.Methods：In the constant temperature and humidity box，the accelerated test was carried out on Radix Notoginseng powder and cooked Radix Notoginseng powder.In 0，1，2，3 and 6 months，the appearance character and water content of Radix Notoginseng Powder and cooked Radix Notoginseng Powder were investigated.At the same time，the content of saponins was used as the detection index，and the content of saponins in Radix Notoginseng Decoction pieces was detected and statistically analyzed by the high-performance liquid chromatography established in the earlier stage of our research group.Results：After 6 months of accelerated test，no mildew，moth and other phenomenon were observed in all samples.The appearance of the samples was basically the same.The water content increased，but still met the requirements of Chinese Pharmacopoeia（2015 version）（water content ≤ 14%）.The sum of Ginsenoside Rg1，Rb1 and R1 in Radix Notoginseng Powder and the sum of ginsenoside Rk1 and Rh4 in cooked Radix Notoginseng Powder were not significantly reduced.Vacuum and non-vacuum packaging have little effects on the content of effective components，but have a significant effect on the hygroscopicity.Conclusion：The food grade aluminum-plastic composite film made of PTE / PE is an ideal packaging material，which can ensure the stability of the quality of Radix Notoginseng and cooked Radix Notoginseng.Vacuum packaging can significantly reduce the moisture absorption of the sample.

Keywords?Radix Notoginseng Powder; Cooked Radix Notoginseng Powder; Accelerated test; Effective ingredients; Stability

中圖分類號：R283文獻標(biāo)識碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2020.13.008

三七為五加科人參屬植物三七Panax notoginseng（Buck）F.H.Chen的干燥根及根莖[1]。其味甘、微苦，性溫，歸肝、胃經(jīng)，具有散瘀止血，消腫止痛的功效，始載于明代劉文泰著的《本草品匯精要》一書，繼而廣泛流傳。三七與其他中藥材一樣，采收后都要經(jīng)過清洗并干燥。其炮制始載于明代的《萬氏女科》，方法為“末”，后《本草求真》載“廣產(chǎn)，形如人參者是。有節(jié)非。研用良”。三七的現(xiàn)有的飲片規(guī)格有三七粉、三七片、熟三七和熟三七粉4種。然三七質(zhì)地堅硬，為了便于有效成分的溶出，臨床多應(yīng)用粉末規(guī)格[2]。三七粉以活血為主，而熟三七粉則以補血力勝。其主要有效成分為皂苷類化合物，藥理研究證明其有補血活血、抗腫瘤等功效。目前三七藥材、飲片及其中成藥制劑的質(zhì)量評價均已該類成分的含量作為依據(jù)。中藥飲片貯藏過程中存在容易發(fā)霉、蟲蛀、走油、變色、氣味散失等變質(zhì)現(xiàn)象，嚴(yán)重影響著中藥材及其飲片的質(zhì)量，進而降低藥物的臨床療效[3-5]。藥品的穩(wěn)定性是其質(zhì)量的重要評價指標(biāo)之一。皂苷類化合物極性較強，且具有熱不穩(wěn)定性，因此有必要對三七粉和熟三七粉的穩(wěn)定性進行考察。

為考察在不同包裝狀態(tài)下三七粉和熟三七粉的穩(wěn)定性，采用PTE/PE復(fù)合而成的食品級鋁塑復(fù)合膜作為包裝材料，在恒溫恒濕箱內(nèi)對上述三七粉和熟三七粉進行加速試驗，于0、1、2、3、6月觀察三七粉和熟三七粉外觀性狀，并計算飲片含水量，利用高效液相色譜法，以皂苷類成分的含量作為檢測指標(biāo)考察飲片有效成分含量的變化情況，為三七粉和熟三七粉的穩(wěn)定性及質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。

1?材料與方法

1.1?材料

1.1.1?儀器

檢測器2489（型號：UV/Vis Detector），進樣器（型號：Alliance 2695），高效液相色譜儀（美國沃特世公司，型號：Waters-e2695）;色譜柱（型號：Aglient ZORBAX SB-C18）;電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（常州諾基儀器有限公司，型號：DHG-9070A）;分析天平（德國賽多利斯公司，型號：SARTORIUS BS110S）;高速萬能粉碎機（北京科偉永興儀器有限公司，型號：FW-100）;電熱恒溫水浴鍋（北京科偉永興儀器有限公司，型號：HH-2）;循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長城科工貿(mào)有限公司，型號：SHB-III）;電子天平[梅特勒-托利多（上海）有限公司，型號：PL2002];箱式電阻爐（上海樹立儀器儀表有限公司，型號：SX4-10）;電陶爐（佛山艾詩凱奇電氣有限公司，型號：TL1622）。

1.1.2?試劑

甲醇（分析純，北京化工廠，批號：20190115）;乙腈[色譜純，賽默飛世爾科技（中國）有限公司，批號：387L-25963U];三七皂苷R1（上海源葉生物科技有限公司，批號：Y19A7H19708）;人參皂苷Rg1（上海源葉生物科技有限公司，批號：Z21S6X3601）;人參皂苷Rb1（上海源葉生物科技有限公司，批號：Z21D6X6400）;人參皂苷Rk1（成都普斯生物科技股份有限公司，批號：PS010828）;人參皂苷Rh4（成都普斯生物科技股份有限公司，批號：PS010043）;液相所用水為娃哈哈純凈水。

1.1.3?材料

PTE/PE復(fù)合而成的食品級鋁塑復(fù)合膜，三七粉及熟三七粉各三批，樣品信息見表1。

1.2?方法

1.2.1?樣品的制備

將每批三七粉與熟三七粉均分為10份，每份大約10 g，每批分為真空與非真空2種包裝狀態(tài)，每種包裝狀態(tài)下標(biāo)記5個取樣時間點，采用PTE/PE復(fù)合而成的食品級鋁塑復(fù)合膜作為包裝材料，將上述的三七粉及熟三七粉在（30±2）℃，RH（65±5）%條件下進行試驗，在試驗期間第0、1、2、3、6個月末取樣檢測。

1.2.2?不同包裝狀態(tài)三七粉和熟三七粉的外觀性狀測定

以不同包裝狀態(tài)（真空包裝與非真空包裝）的三七粉與熟三七粉為考察對象，采用國際潘通色卡對不同包裝狀態(tài)的三七粉與熟三七粉樣品進行色澤測定。

1.2.3?不同包裝狀態(tài)三七粉和熟三七粉的含水量的測定

依照《中華人民共和國藥典》（2015版）第四部通則0832項下水分測定法中第二法烘干法測定水分。

即分別取真空包裝與非真空包裝三七粉與熟三七粉，平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中，厚度不超過5 mm，疏松供試品不超過10 mm，精密稱定，開啟瓶蓋在100～105 ℃干燥5 h，將瓶蓋蓋好，移置干燥器中，放冷30 min，精密稱定，再在上述溫度干燥1 h，放冷，稱重，至連續(xù)兩次稱重的差異不超過5 mg為止。根據(jù)減失的重量，計算供試品中含水量（%）。以上步驟同一規(guī)格平行3次。

1.2.4?三七粉和熟三七粉的有效成分含量測定

三七作為生熟異用的典型中藥，具有“生消熟補”之別，其在炮制過程中，化學(xué)成分和藥理作用均發(fā)生了明顯的改變，因此本研究依據(jù)先前研究，分別以人參皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1作為三七粉中的指標(biāo)性成分及人參皂苷Rk1、Rh4作為熟三七粉中的指標(biāo)性成分，根據(jù)本實驗室建立的高效液相色譜分析方法，分別對其不同加速試驗時期進行有效成分含量檢測[6-7]。

1.2.4.1?三七粉中人參皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1的HPLC含量測定

Waters-e2695型高效液相色譜儀，Agilent ZORBAX SB-C18色譜柱（5 μm，4.6 mm×50 mm）;流動相為乙腈（A）-水（B）;流速1.0 mL/min;柱溫30 ℃，檢測波長203 nm;梯度洗脫條件為：0～35 min，20%～20%A;35～50 min，20%～30%A;50～80 min，30%～40%A。進樣量10 μL。

1.2.4.2?熟三七粉中人參皂苷Rk1、Rh4的HPLC含量測定

Waters-e2695型高效液相色譜儀，Agilent ZORBAX SB-C18色譜柱（5 μm，4.6 mm×50 mm）;流動相為乙腈（A）-水（B）;流速1.0 mL/min;柱溫40 ℃，檢測波長203 nm;梯度洗脫條件為：0～10 min，19%～33%A;10～30 min，33%～38%A;30～45 min，38%～50%A;45～60 min，50%～60%A。進樣量10 μL。

1.2.5?統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 2.0統(tǒng)計軟件對飲片有效成分進行兩兩比較，對樣品有效成分進行方差分析及多樣本均數(shù)兩兩比較，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2?結(jié)果

不同批次非真空包裝的三七粉經(jīng)6個月在恒溫恒濕箱中進行加速試驗后觀察未見霉變、蟲蛀等現(xiàn)象，外形基本一致。見表2，三七粉為均勻的灰黃色粉末，第6個月的三七粉水分含量與初始狀態(tài)的三七粉水分含量差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見圖1a、圖1b，但其含量仍符合《中華人民共和國藥典》（2015版）規(guī)定（水分含量≤14%）。對3批三七粉中人參皂苷Rg1、Rb1、三七皂苷R1的總和進行測定，由表1和圖1c、圖1d可知，第6個月與初始狀態(tài)的三七粉有效成分含量差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），說明樣品具有穩(wěn)定性較好，即PTE/PE復(fù)合而成的食品級鋁塑復(fù)合膜是較理想的包材，能保證三七粉質(zhì)量的穩(wěn)定。

樣品采用真空或非真空方式對三七粉進行包裝，在恒溫恒濕箱中進行加速試驗，如表2所示，觀察未見霉變、蟲蛀等現(xiàn)象，外形基本一致，三七粉為均勻的灰黃色粉末，且第6個月的真空包裝與非真空包裝的三七粉水分含量差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見圖2a，說明真空包裝能降低三七粉的吸濕程度。對比同一批三七粉（S1）的不同包裝方式，即采用真空及非真空的包裝方式儲存，發(fā)現(xiàn)不同包裝方式的三七粉中人參皂苷Rg1、Rb1、三七皂苷R1的總和差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），見圖2b，說明不同包裝方式對三七粉中皂苷成分含量的穩(wěn)定性影響較小。

不同批次非真空包裝的熟三七粉經(jīng)6個月在恒溫恒濕箱中進行加速試驗后觀察未見霉變、蟲蛀等現(xiàn)象，外形基本一致，見表3所示，熟三七粉為均勻的淡黃色或棕紅色粉末，第6個月的熟三七粉水分含量與初始狀態(tài)的熟三七粉水分含量差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見圖3a、圖3b，但其含量仍符合《中華人民共和國藥典》（2015版）規(guī)定（水分含量≤14%）。對3批熟三七粉中人參皂苷Rh4、Rk1的總和進行測定，由表2和圖3c、圖3d可知，第1、2、3、6月與初始狀態(tài)的熟三七粉有效成分含量差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），說明樣品穩(wěn)定性較好，即PTE/PE復(fù)合而成的食品級鋁塑復(fù)合膜是較理想的包材，能保證熟三七粉質(zhì)量的穩(wěn)定。

樣品采用真空或非真空方式對熟三七粉進行包裝，在恒溫恒濕箱中進行加速試驗，如表3所示，觀察未見霉變、蟲蛀等現(xiàn)象，外形基本一致，熟三七粉為均勻的淡黃色或棕紅色粉末，且第6個月的真空包裝與非真空包裝的熟三七粉水分含量差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見圖4a，說明真空包裝能降低三七粉的吸濕程度。對比同一批熟三七粉（P1）的不同包裝方式，即采用真空及非真空的包裝方式儲存，結(jié)果見圖4，發(fā)現(xiàn)不同包裝方式的熟三七粉中人參皂苷Rh4、Rk1的總和差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），見圖4b，說明不同包裝方式對熟三七粉中皂苷成分含量的穩(wěn)定性影響較小。

3?討論

藥品的穩(wěn)定性為藥品的生產(chǎn)、包裝、貯藏、運輸條件提供科學(xué)依據(jù)，并確定藥品的有效期[8-11]。藥品包裝材料對于藥品穩(wěn)定性、有效期、安全性等的影響至關(guān)重要直接影響到藥品的產(chǎn)、供、用等[12-14]多個環(huán)節(jié)，藥品包裝的目的就是保證藥品貯藏過程的質(zhì)量，中藥制劑的包裝既要考慮使用方便，更要做到密封防潮，便于貯存[15-16]。

由于三七質(zhì)地堅硬，為了利于有效成分的溶出，三七的飲片形式為粉末，藥材經(jīng)粉碎后物理特性發(fā)生改變，比表面積顯著增大，易受溫度、濕度、光照等環(huán)境因素影響，吸濕性是粉體的固有性質(zhì)，粉體吸濕后，可產(chǎn)生潮解、聚集、結(jié)塊，使流動性降低的現(xiàn)象;三七粉和熟三七粉中的主要有效成分為皂苷類化合物，其極性較強，且具有熱不穩(wěn)定性?，F(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)對三七粉和熟三七粉的包裝貯藏條件描述較簡略，因此有必要對其穩(wěn)定性進行研究，進而為確定適宜的包裝貯藏條件及有效期提供參考[17]。經(jīng)考察，三七粉及熟三七粉現(xiàn)多采用復(fù)合膜作為包裝材料，具有一定的抗拉強度及延伸率，本課題組采用PTE/PE復(fù)合而成的食品級鋁塑復(fù)合膜作為包裝材料，其具有密度小、強抗拉性、阻隔氣體等優(yōu)點。

加速試驗是在加速條件下進行了穩(wěn)定性試驗，其目的是在較短時間內(nèi)，了解原料或制劑的化學(xué)、物理和生物方面的變化，為制劑包裝、運輸?shù)葪l件提供試驗依據(jù)，并初步預(yù)測樣品的穩(wěn)定性[18-19]。加速試驗一般應(yīng)在（40±2）℃，RH（75±5）%條件下進行試驗，在試驗期間第0、1、2、3、6個月末取樣檢測，需要陰涼防潮貯藏的樣品則在中間條件下，即在（30±2）℃，RH（65±5）%條件下進行試驗，由于《中華人民共和國藥典》（2015版）規(guī)定三七粉的貯藏條件為陰涼干燥處，故本課題組采用（30±2）℃，RH（65±5）%作為試驗條件對包裝的穩(wěn)定性進行考察[20-21]。

在加速試驗過程中，采用PTE/PE復(fù)合而成的食品級鋁塑復(fù)合膜作為包裝材料，研究真空與非真空2種包裝狀態(tài)對三七粉和熟三七粉包裝穩(wěn)定性的影響，以三七粉及熟三七粉的外觀性狀、水分含量、三七粉中人參皂苷Rg1、Rb1、三七皂苷R1含量的總和及熟三七粉中人參皂苷Rk1、Rh4的總和作為考察指標(biāo)，在穩(wěn)定性6個月時，所有樣品的外觀性狀基本一致，水分測定結(jié)果雖有統(tǒng)計學(xué)差異，但其含量均仍符合《中華人民共和國藥典》（2015版）規(guī)定（水分含量≤14%），有效成分含量的總和無顯著減少，說明粉沒有破壞細胞壁，對于皂苷類成分依然有保護作用。由此可見，雖然皂苷類成分和粉末的飲片形式有較強的吸濕潮解性，高溫與高強光下穩(wěn)定性不夠，但只要密封，陰涼干燥儲存，其質(zhì)量仍然較為穩(wěn)定，PTE/PE復(fù)合而成的食品級鋁塑復(fù)合膜是較理想的包材，能保證三七粉和熟三七粉質(zhì)量的穩(wěn)定。真空與非真空2種包裝狀態(tài)對飲片有效成分含量的影響較小，但對飲片的吸濕性有顯著影響，結(jié)果顯示，真空包裝可以顯著降低樣品的吸濕程度。且由實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，熟三七粉的吸濕度較三七粉低，可能是由于熟三七粉經(jīng)過蒸制，其中的大量皂苷類成分脫糖形成稀有皂苷成分，長鏈的多糖蒸后斷裂變成寡糖，因此降低了熟三七粉的吸濕性。通過對三七粉和熟三七粉包裝貯藏穩(wěn)定性的研究，證明三七粉與熟三七粉有較強的吸濕性，應(yīng)該在陰涼干燥處貯藏，且密封貯藏更佳，為三七粉和熟三七粉生產(chǎn)工藝、包裝、儲存、運輸條件提供了科學(xué)依據(jù)。

參考文獻

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：11-12.

[2]劉夢楠，熊慧，薛雪，等.三七炮制歷史及標(biāo)準(zhǔn)現(xiàn)狀分析[J].中華中醫(yī)藥雜志，2019，34（4）：1477-1480.

[3]陳思.中藥材貯藏中的幾個問題[J].中國醫(yī)藥指南，2013，11（33）：212-213.

[4]吳曉玲，李春蓉，劉曉玲.包裝材料與幾種中成藥衛(wèi)生學(xué)質(zhì)量穩(wěn)定性考察[J].中國藥師，2003，6（3）：147-148.

[5]王高升，王唯義，逄春華.包裝材料對藥物制劑穩(wěn)定性的影響[J].黑龍江醫(yī)藥，2002，15（4）：282-283.

[6]劉夢楠，楊曉燕，屈文佳，等.基于偏最小二乘判別分析建立熟三七粉的質(zhì)量評價方法[J].中草藥，2019，50（21）：5319-5327.

[7]劉夢楠，薛雪，熊慧，等.不同凈制工藝對三七質(zhì)量的影響[J].世界中醫(yī)藥，2019，14（2）：297-300+305.

[8]汪露露，許紀(jì)鋒，錢勇，等.小包裝中藥飲片地黃中梓醇和毛蕊花糖苷質(zhì)量穩(wěn)定性研究[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報，2017，8（8）：3202-3206.

[9]劉東艷.芪苓制劑超微粉的穩(wěn)定性研究[D].福州：福建農(nóng)林大學(xué)，2010.

[10]汪露露，謝絢影，許紀(jì)鋒，等.小包裝中藥飲片葛根質(zhì)量穩(wěn)定性研究[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報，2017，8（9）：3526-3530.

[11]蘇娟，黃勤挽，王瑾，等.基于HPLC指紋圖譜技術(shù)對小包裝熟地黃飲片的穩(wěn)定性考察[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2012，18（19）：16-19.

[12]黃惠華，田維榮，晏馬成.藥品包裝材料對液體藥劑質(zhì)量的影響[J].藥學(xué)實踐雜志，2004，22（6）：352-354.

[13]張芳艷，趙欣欣，余萍.藥品包裝材料存在的問題及其對用藥安全的影響[J].中國藥業(yè)，2012，21（16）：10-12.

[14]楊娟英，馬久太，鄭伶俐，等.薄荷飲片不同材料包裝穩(wěn)定性研究[J].陜西中醫(yī)，2010，31（11）：1525-1527.

[15]石姍平，胡天佑.論藥品穩(wěn)定性與藥品包裝選擇[J].中國包裝，2008，28（6）：70-71.

[16]中國標(biāo)準(zhǔn)出版社.藥品包裝用材料、容器標(biāo)準(zhǔn)匯編[M].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2001：1-4.

[17]薛雪，王浩，賈天穎，等.不同生長方式及年限防風(fēng)飲片質(zhì)量的比較研究及對《中國藥典》防風(fēng)飲片標(biāo)準(zhǔn)的思考[J].中國中藥雜志，2019，44（18）：4034-4042.

[18]王新杰，高慧，張瑤，等.不同包裝材料對產(chǎn)地加工與炮制一體化肉桂飲片穩(wěn)定性的影響[J/OL].中國現(xiàn)代中藥：1-12.[2020-06-20].https：//doi.org/10.13313/j.issn.1673-4890.20191019004.

[19]史秋梅，沈萍，程淑琴，等.中藥“百可寧”穩(wěn)定性研究[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2005，11（6）：64-65.

[20]霍秀敏，魏農(nóng)農(nóng)，何伍，等.解讀《化學(xué)藥物（原料藥和制劑）穩(wěn)定性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》[J].中國臨床藥理學(xué)雜志，2014，30（10）：974-978.

[21]杜軍.影響藥物制劑穩(wěn)定性因素分析及對策[J].中國衛(wèi)生產(chǎn)業(yè)，2019，16（1）：37-38.

（2020-06-10收稿?責(zé)任編輯：徐穎）