張磊 李國(guó)良 孟幫柱 劉東明 常宏 韓立坤

(內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科，內(nèi)蒙古 通遼 028000)

甲狀腺癌發(fā)病率及致死率極高且患者預(yù)后較差，嚴(yán)重影響患者生命安全及生活質(zhì)量〔1〕。因而尋找治療及診斷甲狀腺癌的分子標(biāo)志物對(duì)提高臨床診療效果均具有重要意義。微小RNA(miRNA)作為內(nèi)源性非編碼小RNA分子，研究顯示miRNA可在胃癌、肝癌等多種惡性腫瘤中扮演抑癌或癌基因角色，并可能作為診斷及判斷疾病進(jìn)展的潛在分子標(biāo)志物〔2〕。miR-485-5p在肝癌組織中表達(dá)下調(diào)，過(guò)表達(dá)miR-485-5p可通過(guò)調(diào)控EMMPRIN的表達(dá)進(jìn)而抑制肝癌細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移〔3〕。研究顯示miR-485-5p在乳腺癌組織中下調(diào)表達(dá)，miR-485-5p過(guò)表達(dá)可抑制乳腺癌細(xì)胞的遷移侵襲能力〔4〕。然而，miR-485-5p對(duì)甲狀腺癌細(xì)胞惡性生物學(xué)行為的影響研究尚未見(jiàn)報(bào)道。通過(guò)靶基因預(yù)測(cè)軟件得到脂筏標(biāo)記蛋白(FLOT)2可能是miR-485-5p的靶基因，研究報(bào)道FLOT2在肝癌組織及細(xì)胞中上調(diào)表達(dá)并可促進(jìn)肝癌細(xì)胞的增殖、遷移侵襲，同時(shí)乳腺癌組織及細(xì)胞中FLOT2表達(dá)上調(diào)且與乳腺癌患者的不良預(yù)后相關(guān)〔5，6〕。本研究通過(guò)證實(shí)FLOT2是否為miR-485-5p的靶基因，探究miR-485-5p靶向FLOT2對(duì)甲狀腺癌細(xì)胞增殖及凋亡的機(jī)制。

1 材料與方法

1.1材料與試劑 甲狀腺癌細(xì)胞株SW579、FTC-133、KAT-18與甲狀腺上皮細(xì)胞TEC均購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院細(xì)胞庫(kù)。miR-485-5p mimic、miR-485-5p抑制劑(anti-miR-485-5p)及其各自陰性對(duì)照均購(gòu)自廣州銳博生物科技有限公司；FLOT2 siRNA(si-FLOT2)及其陰性對(duì)照(si-NC)均購(gòu)自上海吉瑪制藥技術(shù)有限公司；DMEM培養(yǎng)基、胰蛋白酶、胎牛血清、青霉素及鏈霉素均購(gòu)自美國(guó)Gibco公司；LipofectamineTM2000購(gòu)自上海陽(yáng)光生物科技有限公司；RNA提取及實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)實(shí)驗(yàn)所需試劑均購(gòu)自美國(guó)Thermo Fisher公司；四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)檢測(cè)試劑盒購(gòu)自武漢艾美捷科技有限公司；細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒購(gòu)自大連美侖生物技術(shù)有限公司；雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒購(gòu)自北京全式金生物技術(shù)有限公司；放射免疫沉淀法(RIPA)蛋白裂解液及其他蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)所需試劑均購(gòu)自美國(guó)Sigma公司；含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cleaved-caspase)-3、細(xì)胞周期蛋白(Cyclin)D1、p21、p27、B淋巴細(xì)胞瘤(Bcl)-2、Bcl-2相關(guān)X蛋白(Bax)單克隆抗體均購(gòu)自美國(guó)Abcam公司；辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的IgG二抗購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司。

1.2細(xì)胞培養(yǎng)、轉(zhuǎn)染及分組 取出凍存甲狀腺癌細(xì)胞株SW579、FTC-133、KAT-18與甲狀腺上皮細(xì)胞TEC，放入37℃恒溫水浴鍋內(nèi)，待細(xì)胞融化后加入含有10%胎牛血清DMEM培養(yǎng)基的細(xì)胞生長(zhǎng)液，同時(shí)含有100 U/ml青霉素、0.1 mg/ml鏈霉素，1 000 r/min離心10 min，棄上清液，置于37℃、體積分?jǐn)?shù)5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)，待細(xì)胞生長(zhǎng)融合至80%左右時(shí)傳代培養(yǎng)。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期甲狀腺癌SW579細(xì)胞，胰蛋白酶消化細(xì)胞，以5×103個(gè)細(xì)胞/ml接種于6孔板，37℃、體積分?jǐn)?shù)5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)，待細(xì)胞生長(zhǎng)融合至80%時(shí)更換為不含胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，參照Lipofectamine2000轉(zhuǎn)染試劑盒說(shuō)明書分別將miR-485-5p mimic與miR-NC加入到SW579細(xì)胞，分別為miR-485-5p組、miR-NC組。為了探究FLOT2對(duì)SW579細(xì)胞生物學(xué)行為的影響，本研究分別將si-FLOT2與si-NC轉(zhuǎn)染到SW579細(xì)胞，分別為si-FLOT2組、si-NC組。后續(xù)實(shí)驗(yàn)中為驗(yàn)證miR-485-5p是否通過(guò)抑制FLOT2表達(dá)而影響SW579細(xì)胞增殖及凋亡，分別將FLOT2過(guò)表達(dá)載體(pcDNA-FLOT2)與空載體(pcDNA)分別與miR-485-5p mimic共同轉(zhuǎn)染入SW579細(xì)胞，分別為miR-485-5p+pcDNA組、miR-485-5p+pcDNA-FLOT2組。上述各組轉(zhuǎn)染6 h后更換為完全DMEM培養(yǎng)基。繼續(xù)培養(yǎng)48 h收集細(xì)胞。

1.3qRT-PCR檢測(cè)細(xì)胞中miR-485-5p及FLOT2 mRNA表達(dá)水平 取不同甲狀腺癌細(xì)胞、正常甲狀腺上皮細(xì)胞及轉(zhuǎn)染各組對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期SW579細(xì)胞，RNA提?。悍謩e加入Trizol裂解細(xì)胞提取細(xì)胞總RNA，置于冰上5 min，分別加入氯仿(200 μl)，室溫放置5 min后12 000 r/min離心15 min，吸取水相層置于另一EP試管內(nèi)，加入500 μl異丙醇，室溫放置20 min后12 000 r/min離心15 min，棄上清，加入乙醇混合(75%)后12 000 r/min離心5 min，棄上清，所有操作需在通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行，最后將EP試管置于超凈工作臺(tái)晾干，加入適量無(wú)RNA酶水，利用紫外分光光度計(jì)檢測(cè)RNA濃度與純度，置于-80℃超低溫冰箱保存待測(cè)。反轉(zhuǎn)錄：按照反轉(zhuǎn)錄試劑盒說(shuō)明書配置反應(yīng)體系并進(jìn)行普通PCR擴(kuò)增得到cDNA。qRT-PCR：根據(jù)試劑盒說(shuō)明書配置反應(yīng)體系，完成后置于實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀檢測(cè)各基因Ct值，反應(yīng)條件為95℃ 5 min，95℃ 30 s，60℃ 30 s，72℃ 30 s，共循環(huán)40次。miR-485-5p以U6為內(nèi)參基因，F(xiàn)LOT2以GAPDH為內(nèi)參基因，反應(yīng)結(jié)束后，采用 2-ΔΔCt法計(jì)算miR-485-5p及FLOT2 mRNA相對(duì)表達(dá)量。

1.4Western印跡檢測(cè)FLOT2、CyclinD1、p21、p27、Bcl-2、Bax、cleaved-caspase-3蛋白表達(dá) 取1.2中所有分組細(xì)胞，分別加入蛋白裂解液提取蛋白，經(jīng)二喹啉甲酸(BCA)定量蛋白后進(jìn)行十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)電泳反應(yīng)，轉(zhuǎn)膜、封閉后分別加入各蛋白一抗(1∶500)，洗膜后加入二抗(1∶1 000)，TBST洗膜，ECL顯影后置于凝膠成像系統(tǒng)及Quantityone軟件檢測(cè)條帶灰度值，蛋白相對(duì)表達(dá)量=目的蛋白條帶灰度值/內(nèi)參照條帶灰度值。

1.5MTT檢測(cè)細(xì)胞增殖 收集轉(zhuǎn)染后各組SW579細(xì)胞，胰蛋白酶消化后制備細(xì)胞懸浮液，以每孔100 μl體積細(xì)胞懸浮液接種于96孔板(濃度3×105個(gè)/ml)，分別于培養(yǎng)12、48、72 h時(shí)加入濃度為5 mg/ml的MTT溶液50 μl，室溫孵育4 h，棄上清，分別加入二甲基亞砜(DMSO)溶液150 μl，放入搖床內(nèi)10 min，置于酶標(biāo)儀檢測(cè)各孔吸光度(OD)，檢測(cè)波長(zhǎng)為490 nm，每組實(shí)驗(yàn)均設(shè)置3次重復(fù)。

1.6流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡 收集各組對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期SW579細(xì)胞，預(yù)冷磷酸鹽緩沖液(PBS)洗滌細(xì)胞，采用胰蛋白酶消化細(xì)胞，10 000 r/min離心5 min，分別加入PBS洗滌細(xì)胞，加入1 ml結(jié)合緩沖液，再次離心后棄上清，分別加入200 μl結(jié)合緩沖液，再次分別加入5 μl膜聯(lián)蛋白(Annexin)V-異硫氰酸熒光素(FITC)與碘化丙錠(PI)，室溫避光孵育20 min，分別加入400 μl結(jié)合緩沖液置于流式細(xì)胞儀檢測(cè)并計(jì)算細(xì)胞凋亡率。

1.7熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè) 靶基因預(yù)測(cè)庫(kù)預(yù)測(cè)miR-485-5p與FLOT2的3′UTR存在結(jié)合位點(diǎn)，將含有miR-485-5p結(jié)合位點(diǎn)的FLOT2的3′UTR片段插入PGL3熒光素酶報(bào)告基因載體，分別構(gòu)建野生型(WT-FLOT2)與突變型(MUT-FLOT2)的FLOT2 3′UTR熒光素酶報(bào)告載體，將WT-FLOT2、MUT-FLOT2分別與miR-485-5p mimic、miR-NC共轉(zhuǎn)染，培養(yǎng)箱內(nèi)派樣48 h后收集細(xì)胞，嚴(yán)格按照雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書操作并檢測(cè)各組SW579細(xì)胞的熒光素酶活性。

1.8統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS19.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)、單因素方差分析。

2 結(jié) 果

2.1miR-485-5p和FLOT2在甲狀腺癌細(xì)胞和甲狀腺上皮細(xì)胞中的表達(dá) 甲狀腺癌細(xì)胞SW579、FTC-133、KAT-18中的miR-485-5p相對(duì)表達(dá)量與甲狀腺上皮細(xì)胞TEC差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，3種甲狀腺癌細(xì)胞中SW579細(xì)胞相對(duì)表達(dá)量最低；而FLOT2 mRNA及蛋白表達(dá)顯著升高(P<0.05)，3種甲狀腺癌細(xì)胞中SW579細(xì)胞表達(dá)水平最高，選擇SW579細(xì)胞作為后續(xù)研究。見(jiàn)圖1、表1。

表1 miR-485-5p和FLOT2在甲狀腺癌細(xì)胞和甲狀腺上皮細(xì)胞中的表達(dá)

圖1 FLOT2蛋白表達(dá)

2.2miR-485-5p過(guò)表達(dá)對(duì)甲狀腺癌SW579細(xì)胞增殖的影響 qRT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染后miR-485-5p組SW579細(xì)胞中miR-485-5p相對(duì)表達(dá)量明顯升高(P<0.05)，提示轉(zhuǎn)染成功。MTT檢測(cè)結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染后12 h內(nèi)，miR-NC組與miR-485-5p組甲狀腺癌SW579細(xì)胞OD值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。轉(zhuǎn)染48 h開(kāi)始miR-485-5p組與miR-NC組相比，SW579細(xì)胞OD值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Western印跡檢測(cè)結(jié)果顯示miR-485-5p組細(xì)胞增殖相關(guān)蛋白CyclinD1蛋白表達(dá)顯著低于miR-NC組(P<0.05)，而p21、p27蛋白表達(dá)顯著高于miR-NC組(P<0.05)，見(jiàn)圖2，表2。

表2 miR-485-5p過(guò)表達(dá)對(duì)甲狀腺癌SW579細(xì)胞增殖的影響

圖2 細(xì)胞增殖相關(guān)蛋白表達(dá)

2.3miR-485-5p過(guò)表達(dá)對(duì)甲狀腺癌SW579細(xì)胞凋亡的影響 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示，miR-485-5p組SW579細(xì)胞凋亡率顯著高于miR-NC組(P<0.05)。Western印跡檢測(cè)結(jié)果顯示，與miR-NC組相比，miR-485-5p組SW579細(xì)胞中抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白表達(dá)明顯降低(P<0.05)，而Bax與cleaved-caspase-3蛋白均明顯升高(P<0.05)，見(jiàn)圖3、圖4、表3。

圖3 凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)

圖4 細(xì)胞凋亡流式圖

表3 miR-485-5p過(guò)表達(dá)對(duì)甲狀腺癌SW579細(xì)胞凋亡的影響

2.4抑制FLOT2表達(dá)對(duì)甲狀腺癌SW579細(xì)胞增殖和凋亡的影響 與si-NC組相比，si-FLOT2組SW579細(xì)胞中FLOT2蛋白表達(dá)明顯降低(P<0.05)；轉(zhuǎn)染48 h后，si-FLOT2組SW579細(xì)胞OD值明顯降低(P<0.05)；si-FLOT2組SW579細(xì)胞凋亡率明顯增加(P<0.05)；Western印跡結(jié)果顯示CyclinD1與Bcl-2蛋白表達(dá)下調(diào)(P<0.05)，而p21與Bax蛋白表達(dá)上調(diào)(P<0.05)，見(jiàn)圖5、表4、表5。

圖5 FLOT2和增殖、凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)

表4 抑制FLOT2表達(dá)對(duì)甲狀腺癌SW579細(xì)胞增殖和凋亡的影響

表5 抑制FLOT2表達(dá)對(duì)甲狀腺癌SW579細(xì)胞增殖和凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

2.5miR-485-5p靶向調(diào)控FLOT2的表達(dá) 雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示W(wǎng)T-FLOT2與miR-485-5p mimic共轉(zhuǎn)染組SW579細(xì)胞熒光素酶活性(0.42±0.05)顯著低于WT-FLOT2與miR-NC共轉(zhuǎn)染組(1.04±0.08；t=16.098，P=0.000)，而MUT-FLOT2與miR-485-5p mimic共轉(zhuǎn)染組SW579細(xì)胞熒光素酶活性(1.03±0.09)與MUT-FLOT2與miR-NC共轉(zhuǎn)染組(1.01±0.07)相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.430，P=0.677)。Western印跡檢測(cè)結(jié)果顯示，miR-485-5p組FLOT2蛋白表達(dá)(0.22±0.03)顯著低于miR-NC組(0.63±0.06，P<0.05)，anti-miR-485-5p組(0.89±0.08)顯著高于anti-miR-NC組(0.61±0.05，P<0.05)，見(jiàn)圖6、圖7。

圖6 互補(bǔ)的核苷酸序列

圖7 miR-485-5p靶向調(diào)控FLOT2的表達(dá)

2.6FLOT2過(guò)表達(dá)逆轉(zhuǎn)了miR-485-5p過(guò)表達(dá)對(duì)甲狀腺癌SW579細(xì)胞增殖和凋亡的影響 Western印跡檢測(cè)結(jié)果顯示，miR-485-5p+pcDNA-FLOT2組SW579細(xì)胞中FLOT2蛋白表達(dá)明顯高于miR-485-5p+pcDNA組(P<0.05)。與miR-485-5p+pcDNA組相比，MTT檢測(cè)結(jié)果顯示在共轉(zhuǎn)染培養(yǎng)48 h后miR-485-5p+pcDNA-FLOT2組SW579細(xì)胞OD值顯著升高，而細(xì)胞凋亡率顯著降低，Western印跡結(jié)果顯示CyclinD1與Bcl-2蛋白表達(dá)顯著升高(P<0.05)，而p21與Bax蛋白表達(dá)顯著降低(P<0.05)見(jiàn)圖8、表6、表7。

圖8 FLOT2和增殖、凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)

表6 FLOT2過(guò)表達(dá)逆轉(zhuǎn)了miR-485-5p過(guò)表達(dá)對(duì)甲狀腺癌SW579細(xì)胞增殖和凋亡的影響

表7 FLOT2過(guò)表達(dá)逆轉(zhuǎn)了miR-485-5p過(guò)表達(dá)對(duì)甲狀腺癌SW579細(xì)胞增殖和凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

3 討 論

甲狀腺癌患者早期臨床癥狀較隱匿，目前臨床主要采用手術(shù)與非手術(shù)治療，可在一定程度上改善患者臨床癥狀，但早期診斷及治療方法均具有一定局限性導(dǎo)致甲狀腺癌患者死亡率升高〔7，8〕。甲狀腺癌發(fā)生及發(fā)展涉及多種基因或信號(hào)通路蛋白，因此探究甲狀腺癌發(fā)病機(jī)制對(duì)尋找早期診斷及治療甲狀腺癌的分子標(biāo)志物具有重要指導(dǎo)意義。miRNA可調(diào)控細(xì)胞增殖及凋亡，研究顯示miRNA可影響甲狀腺癌細(xì)胞增殖、遷移及侵襲等惡性生物學(xué)過(guò)程〔9〕。因此，尋找甲狀腺癌發(fā)生及發(fā)展相關(guān)的miRNA對(duì)揭示其發(fā)病機(jī)制及提高靶向治療效果均具有重要意義。

miR-485-5p在結(jié)直腸癌細(xì)胞中呈低表達(dá)并可抑制癌細(xì)胞增殖及侵襲〔10〕，梁昆等〔11〕研究表明通過(guò)上調(diào)miR-485-5p表達(dá)可有效抑制前列腺癌細(xì)胞增殖。胃癌組織及細(xì)胞中miR-485-5p表達(dá)下調(diào)，上調(diào)miR-485-5p表達(dá)可通過(guò)抑制靶基因FLOT1表達(dá)進(jìn)而抑制胃癌細(xì)胞增殖、遷移及侵襲〔12〕。乳腺癌細(xì)胞中miR-485表達(dá)水平降低，上調(diào)miR-485表達(dá)后可抑制乳腺癌細(xì)胞遷移及侵襲〔13〕。Chen等〔14〕研究表明miR-485-5p過(guò)表達(dá)后可通過(guò)靶向調(diào)控高遷移率族蛋白(HMGA)2表達(dá)進(jìn)而抑制膀胱癌細(xì)胞侵襲。由此猜測(cè)miR-485-5p在甲狀腺癌細(xì)胞中呈低表達(dá)并可發(fā)揮抑癌基因作用。本研究結(jié)果說(shuō)明miR-485-5p表達(dá)水平降低可促進(jìn)甲狀腺癌發(fā)生。通過(guò)上調(diào)miR-485-5p表達(dá)后發(fā)現(xiàn)SW579細(xì)胞增殖活性明顯降低，CyclinD1蛋白表達(dá)明顯降低，而p21與p27蛋白表達(dá)明顯升高，p21與p27屬于細(xì)胞周期依賴性激酶抑制因子家族成員，并可抑制CyclinD1與細(xì)胞周期依賴性激酶結(jié)合〔15〕。提示miR-485-5p過(guò)表達(dá)可上調(diào)p21與p27蛋白表達(dá)水平，抑制CyclinD1蛋白表達(dá)，促使SW579細(xì)胞周期阻滯，抑制細(xì)胞增殖。但關(guān)于其是否通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯還需通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期。Bcl-2屬于抗凋亡蛋白，Bax屬于促凋亡蛋白，Bax表達(dá)上調(diào)可激活cleaved-caspase-3蛋白表達(dá)進(jìn)而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡〔16〕。本研究結(jié)果提示miR-485-5p過(guò)表達(dá)可上調(diào)Bax、cleaved-caspase-3蛋白表達(dá)，并抑制Bcl-2蛋白表達(dá)進(jìn)而誘導(dǎo)SW579細(xì)胞凋亡。

FLOT2在鼻咽癌細(xì)胞中表達(dá)上調(diào)，抑制FLOT2表達(dá)可能通過(guò)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF)-β信號(hào)通路進(jìn)而抑制鼻咽癌細(xì)胞遷移及侵襲〔17〕。 FLOT2作為細(xì)胞膜重要組成成分，范雙石等〔18〕研究表明 FLOT2在喉鱗狀細(xì)胞癌中呈高表達(dá)，并可能與癌癥發(fā)生進(jìn)展及患者不良預(yù)后有關(guān)。本研究結(jié)果提示 FLOT2可能參與甲狀腺癌發(fā)生過(guò)程。研究報(bào)道沉默 FLOT2表達(dá)可通過(guò)上調(diào)p21、p27蛋白表達(dá)進(jìn)而抑制乳腺癌細(xì)胞增殖〔19〕。本研究提示抑制FLOT2表達(dá)可有效降低SW579細(xì)胞增殖能力并提高細(xì)胞凋亡水平。相關(guān)研究表明miR-485可通過(guò)抑制磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/mTOR信號(hào)通路而抑制靶基因 FLOT2表達(dá)，進(jìn)而抑制肺腺癌細(xì)胞遷移及侵襲〔20〕。本研究雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證FLOT2是miR-485-5p的靶基因，在miR-485-5p mimic轉(zhuǎn)染的SW579細(xì)胞中加入pcDNA-FLOT2質(zhì)?？赡孓D(zhuǎn)miR-485-5p過(guò)表達(dá)對(duì)甲狀腺癌細(xì)胞增殖及凋亡的作用，提示miR-485-5p可通過(guò)作用于靶基因FLOT2抑制甲狀腺癌細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。

綜上，miR-485-5p在甲狀腺癌細(xì)胞中下調(diào)表達(dá)，F(xiàn)LOT2上調(diào)表達(dá)，miR-485-5p過(guò)表達(dá)可通過(guò)靶向FLOT2抑制甲狀腺癌細(xì)胞增殖并促進(jìn)細(xì)胞凋亡，為揭示甲狀腺癌發(fā)病機(jī)制提供新思路，并可能作為臨床靶向治療甲狀腺癌的潛在靶點(diǎn)。