實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)乙肝病毒DNA和乙肝病毒標(biāo)志物的價(jià)值

滕振平

【摘 要】目的：應(yīng)用RT-PCR法檢測(cè)HBV-DNA、HBV-M，分析其應(yīng)用價(jià)值。方法：選取2018年1月-2019年12月，在我院治療的70例乙肝患者，所有患者均應(yīng)用RT-PCR法檢測(cè)HBV-DNA、HBV-M。結(jié)果：不同HBV-M模式下的RT-RCR陽(yáng)性率分別為95.83%、66.67%、33.33%、0、75%，其中，檢測(cè)大三陽(yáng)的RT-RCR陽(yáng)性率最高，差異明顯（P<0.05）;大三陽(yáng)的HBV—DNA水平最高，明顯高于其他模式（P<0.05）。結(jié)論：RT-PCR法可提高HBV檢測(cè)陽(yáng)性率，可作為臨床治療及預(yù)后評(píng)估提供指導(dǎo)。

【關(guān)鍵詞】乙肝;DNA;RT-RCR法

【中圖分類號(hào)】R446?? ? ?【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 A 【文章編號(hào)】1002-8714（2020）08-0112-01

乙肝病毒DNA（HBV-DNA）及乙肝病毒標(biāo)志物（HBV-M）是目前診斷乙肝的重要指標(biāo)，血清學(xué)檢驗(yàn)雖然能夠判斷HBV-DNA性質(zhì)，但無(wú)法定量檢驗(yàn)。實(shí)時(shí)熒光PCR檢驗(yàn)（RT-PCR）可實(shí)現(xiàn)相對(duì)量化，為HBV復(fù)制的臨床判斷提供依據(jù)。本文將應(yīng)用RT-PCR法檢測(cè)HBV-DNA、HBV-M，分析其應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料

選取2018年1月-2019年12月，在我院治療的70例乙肝患者，所有患者均已確診為乙肝，近期內(nèi)未接受抗病毒治療，自愿入組配合研究。其中，男性43例，女性27例，年齡23～59歲，平均（36.78±4.34）歲。

1.2方法

所有患者均于采集空腹靜脈血5ml，離心分離后送實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，定性檢測(cè)采取ELISA法，檢測(cè)順序?yàn)镠BsAg、HbsAb、HbeAg、HbeAb、HbcAb，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)完成檢測(cè)。定量檢測(cè)采取RT-PCR 法，使用儀器為達(dá)安DA7600檢測(cè)儀。取血清樣本200μL，與DNA提取液450μL混合，使用溫育器預(yù)熱，溫度100℃，時(shí)間10min。隨后使用冰凍離心機(jī)離心操作，轉(zhuǎn)速1200，操作5 min，取上層清液20μL置入PCR管，使用儀器檢測(cè)。

1.3評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

分析不同HBV-M模式下檢測(cè)情況以及HBV-DNA含量分布。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采取SPSS22.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)數(shù)資料、計(jì)量資料常采?。?）、（-x±s）表示，采取X2、t檢驗(yàn)。P<0.05表示差異，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1不同HBV-M模式下檢測(cè)情況

大三陽(yáng)的RT-RCR陽(yáng)性率最高，明顯高于其他模式（P<0.05），見(jiàn)表1。

2.2不同模式HBV—DNA含量分布

大三陽(yáng)的HBV—DNA水平最高，明顯高于其他模式（P<0.05），見(jiàn)表2。

3 討論

乙型肝炎是一種高發(fā)的傳染病，據(jù)相關(guān)統(tǒng)計(jì)，全世界范圍內(nèi)，每年死于乙肝的患者在100萬(wàn)以上，慢性乙肝攜帶者約為10%，且在急性乙肝患者中，20%以上可轉(zhuǎn)為慢性乙肝，并逐漸發(fā)展為肝硬化、肝癌[1]。為改善患者預(yù)后，早期準(zhǔn)確診斷非常重要，但由于乙肝類型相對(duì)復(fù)雜，因此很難準(zhǔn)確判斷HBV感染復(fù)制情況，漏診風(fēng)險(xiǎn)較高。研究發(fā)現(xiàn)，在ELISA檢測(cè)的同時(shí)，聯(lián)合應(yīng)用RT-PCR法檢測(cè)，可提高診斷準(zhǔn)確率[2]。

在本次研究中，不同HBV-M模式下的RT-RCR陽(yáng)性率分別為95.83%、66.67%、33.33%、0、75%，其中，檢測(cè)大三陽(yáng)的RT-RCR陽(yáng)性率最高（P<0.05），且大三陽(yáng)的HBV—DNA水平最高，明顯高于其他模式（P<0.05），提示RT-RCR檢測(cè)可反映HBV—DNA水平，同時(shí)可聯(lián)合ELISA，對(duì)HBV-M類型進(jìn)行判斷，兩者聯(lián)合應(yīng)用，對(duì)臨床診療及用藥具有重要意義。RT-RCR是一種病原學(xué)檢測(cè)技術(shù)，可直接反映HBV—DNA水平，具有較高的靈敏度及特異度，可反映病毒的傳染性及復(fù)制狀況。但由于非復(fù)制狀態(tài)下，RT-RCR的反映較弱，因此，聯(lián)合ELISA檢測(cè)準(zhǔn)確度更高。

綜上所述，RT-PCR法可提高HBV檢測(cè)陽(yáng)性率，可作為臨床治療及預(yù)后評(píng)估提供指導(dǎo)。

參考文獻(xiàn)

[1] 姚兆基.實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)乙肝病毒DNA和乙肝病毒標(biāo)志物的價(jià)值[J].內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)雜志，2017，49（4）：485-486.

[2] 陳艷.實(shí)時(shí)熒光PCR檢驗(yàn)用于乙肝病毒DNA檢測(cè)的臨床價(jià)值[J].臨床研究，2018，26（10）：146-148.