262200諸城市人民醫(yī)院，山東諸城

蟾酥是一種在腫瘤治療中具有重要作用的藥物。隨著科技不斷發(fā)展，對(duì)于傳統(tǒng)抗腫瘤中藥蟾酥研究亦在不斷進(jìn)行。本研究主要對(duì)遠(yuǎn)華蟾毒精對(duì)于MMP-2、MMP-9的合成相關(guān)信號(hào)傳導(dǎo)通路的抑制與作用機(jī)制進(jìn)行分析?，F(xiàn)報(bào)告如下。

資料與方法

將已培養(yǎng)好的裸鼠乳腺癌抑制瘤組織切片作為研究對(duì)象，將所有組織切片平均分為A組、B組、C組。

方法：三組組織切片在培養(yǎng)完畢后，均置于同一環(huán)境條件中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。給予A 組常規(guī)培養(yǎng)；給予B 組加入0.1 μmol/L遠(yuǎn)華蟾毒精進(jìn)行培養(yǎng)；給予C組加入0.5 μmol/L 遠(yuǎn)華蟾毒精進(jìn)行培養(yǎng)。并將培養(yǎng)完畢后組織切片進(jìn)行劃痕實(shí)驗(yàn)，每個(gè)培養(yǎng)基上平行劃痕3 道，在培養(yǎng)的0 h、12 h、24 h 進(jìn)行觀察，記錄細(xì)胞遷移距離。

觀察指標(biāo)：觀察比較三組組織切片培養(yǎng)完畢后結(jié)果情況，主要觀察培養(yǎng)后其MMP-9、MMP-2表達(dá)情況及細(xì)胞遷移距離情況。

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 18.0 軟件處理；計(jì)量資料以(±s)表示，采用t檢驗(yàn)；P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

三組組織切片蛋白表達(dá)情況比較：A組、B 組MMP-9、MMP-2 蛋白表達(dá)量遠(yuǎn)高于C 組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

三組組織切片細(xì)胞遷移距離比較：A組、B 組細(xì)胞在各時(shí)間點(diǎn)遷移距離均遠(yuǎn)于C 組細(xì)胞，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表2。

討 論

由于發(fā)病率不斷增加，乳腺癌已成為當(dāng)前社會(huì)重大公共衛(wèi)生問題[1]。隨著科技不斷發(fā)展與進(jìn)步，針對(duì)蟾酥研究已取得一定成果。研究證明，蟾酥主要包含蟾蜍甾烯和吲哚生物堿2 類成分[2]。并且蟾酥及其中提取的單體化合物可作用于惡性腫瘤細(xì)胞，并促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡，從而達(dá)到抑制腫瘤生長效果。而在乳腺癌細(xì)胞中，乳腺癌轉(zhuǎn)移與癌細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、侵襲能力密切相關(guān)[3-6]。因此，探明蟾酥對(duì)于乳腺癌細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、侵襲能力抑制效果，即可根據(jù)此進(jìn)行相關(guān)阻滯乳腺癌轉(zhuǎn)移藥物的制作，為后續(xù)治療乳腺癌提供新治療手段。

通過針對(duì)遠(yuǎn)華蟾毒精抑制乳腺癌細(xì)胞MMP 分泌的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路進(jìn)行研究，可探明遠(yuǎn)華蟾毒精是否能夠直接遏制乳腺癌細(xì)胞侵襲與轉(zhuǎn)移相關(guān)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路上的相關(guān)蛋白表達(dá)，從而判斷遠(yuǎn)華蟾毒精對(duì)于乳腺癌侵襲與轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制，填補(bǔ)國內(nèi)外研究空白。

本研究結(jié)果證明，遠(yuǎn)華蟾毒精可直接抑制乳腺癌細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移相關(guān)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路上MMP-2、MMP-9 蛋白表達(dá)，從而抑制乳腺癌細(xì)胞的侵襲與轉(zhuǎn)移，有效控制癌細(xì)胞遷移距離，在后續(xù)研究中，可根據(jù)此項(xiàng)特性，進(jìn)行相關(guān)藥物研發(fā)，為后續(xù)乳腺癌患者治療提供新治療手段。

綜上所述，遠(yuǎn)華蟾毒精可有效通過抑制MMP-2 以及MMP-9 合成，阻滯乳腺癌細(xì)胞遷移，從而達(dá)到抑制乳腺癌細(xì)胞增殖，阻滯細(xì)胞轉(zhuǎn)移的效果，可根據(jù)此設(shè)計(jì)相應(yīng)治療方案，為乳腺癌患者治療提供新的治療手段。

表1 三組組織切片蛋白表達(dá)情況比較(±s)

表1 三組組織切片蛋白表達(dá)情況比較(±s)

注：與C組數(shù)據(jù)相比，★P＜0.05。

組別 MMP-9 MMP-2 A組 1.03±0.10★ 1.12±0.13★B組 0.68±0.08★ 0.71±0.09★C組 0.12±0.02 0.21±0.05

表2 三組組織切片細(xì)胞遷移距離比較(±s，μm)

表2 三組組織切片細(xì)胞遷移距離比較(±s，μm)

注：與C組數(shù)據(jù)相比，★P＜0.05。

組別 0 h 12 h 24 h A組 2.71±0.51★ 3.12±0.35★ 3.34±0.61★B組 2.34±0.47★ 3.01±0.29★ 3.22±0.43★C組 1.51±0.42 1.68±0.24 1.84±0.39