池艷艷，陳炳旭*，董易之

(1. 廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，廣州 510640；2. 廣東省植物保護(hù)新技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣州 510640)

荔枝葉螨Oligonychuslitchii屬于葉螨科、小爪螨屬，1989年在臺(tái)灣首次報(bào)道(Lo and Ho，1989)，現(xiàn)今已成為荔枝主產(chǎn)區(qū)的主要害蟲(chóng)之一。荔枝葉螨多通過(guò)吸取汁液危害，葉片初呈黃白色小斑點(diǎn)，嚴(yán)重時(shí)葉片變褐、提前脫落(徐海明等，2017)。該螨繁殖能力強(qiáng)，世代周期短，活動(dòng)范圍小，受藥機(jī)會(huì)多，氣候適宜時(shí)短期內(nèi)即可猖獗危害。實(shí)際生產(chǎn)中，荔枝園長(zhǎng)期大面積地使用各類化學(xué)農(nóng)藥防治葉螨，如果施用藥劑不當(dāng)，不僅很難達(dá)到較好的效果，造成農(nóng)藥浪費(fèi)，還會(huì)由于農(nóng)藥大量使用而污染環(huán)境。

阿維菌素是一種十六元大環(huán)內(nèi)酯類化合物，具有觸殺和胃毒作用(主要是胃毒作用)，作用于害蟲(chóng)的氯離子通道，致使神經(jīng)傳導(dǎo)受阻，最終導(dǎo)致昆蟲(chóng)麻痹死亡(袁會(huì)珠等，2006；王蘭和馮宏祖，2008；Mckellaretal.，2008)。噠螨靈是噠嗪類化合物，主要為觸殺作用，通過(guò)抑制線粒體的呼吸作用來(lái)達(dá)到殺蟲(chóng)效果(Kimetal.，2004；柏亞羅，2005；郭寶元等，2009)。聯(lián)苯肼酯為聯(lián)苯肼類殺螨劑，具有較好的擊倒活性和較長(zhǎng)的持效期，作用于害螨中樞神經(jīng)傳導(dǎo)系統(tǒng)GABA受體(王元元等，2011；劉長(zhǎng)令，2012；Hiragakietal.，2012；范瀟，2015)。螺螨酯屬于季酮酸類化合物，通過(guò)抑制害螨體內(nèi)的脂肪合成，破壞害螨的能量代謝而導(dǎo)致害螨死亡(Nauen，2005；陸恒等，2010)。乙螨唑?qū)儆诙交鶒哼蜻惢衔?，為觸殺性殺螨劑，具有良好的滲透能力和耐雨水沖刷能力，作用方式包括抑制螨正常蛻皮和殺卵活性(王志靜等，2012；范瀟，2015)。

目前，阿維菌素、噠螨靈、聯(lián)苯肼酯、螺螨酯和乙螨唑是荔枝主產(chǎn)區(qū)防治葉螨的主要藥劑，而關(guān)于這5種藥劑對(duì)荔枝葉螨不同螨態(tài)的毒力、速效性、持效性等尚缺乏系統(tǒng)研究。因此，本研究在室內(nèi)測(cè)定了5種殺螨劑對(duì)荔枝葉螨各螨態(tài)的毒力，并進(jìn)行了田間防效試驗(yàn)，進(jìn)一步明確了5種殺螨劑對(duì)荔枝葉螨的作用特點(diǎn)，以期為荔枝園合理選用殺螨劑提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試?yán)笾θ~螨于2013年3月采自廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院大豐試驗(yàn)基地，在溫度25±1℃、相對(duì)濕度70%～80%、光周期L ∶D=14 ∶10 h的養(yǎng)蟲(chóng)室內(nèi)用新鮮干凈的“糯米糍”荔枝葉片飼養(yǎng)。

室內(nèi)毒力試驗(yàn)藥劑：95%阿維菌素原藥(深圳諾普信農(nóng)化股份有限公司)，98.5%噠螨靈原藥(深圳諾普信農(nóng)化股份有限公司)，97%聯(lián)苯肼酯原藥(廣東廣康生化科技股份有限公司)，93%乙螨唑原藥(深圳諾普信農(nóng)化股份有限公司)，95%螺螨酯原藥(深圳諾普信農(nóng)化股份有限公司)。

田間藥效試驗(yàn)藥劑：1.8%阿維菌素乳油(江蘇克勝集團(tuán)股份有限公司)，15%噠螨靈乳油(江蘇克勝集團(tuán)股份有限公司)，43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑(麥德梅農(nóng)業(yè)解決方案有限公司)，240 g/L螺螨酯懸浮劑(拜耳作物科學(xué)(中國(guó))有限公司)，110 g/L乙螨唑懸浮劑(日本住友化學(xué)株式會(huì)社)。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.15種殺螨劑對(duì)荔枝葉螨的毒力測(cè)定

成螨毒力測(cè)定采用Potter噴霧法(陳年春，1992；于文杰等，2011)。先用丙酮將原藥溶解配制成1%母液，然后用0.1%吐溫-80水溶液將母液稀釋成系列濃度梯度。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，噠螨靈濃度設(shè)置為0.0625、0.125、0.25、0.5、1 mg/L，阿維菌素濃度設(shè)置為0.1、0.2、0.4、0.8、1.6 mg/L，聯(lián)苯肼酯濃度設(shè)置為0.5、1、2、4、8 mg/L,螺螨酯和乙螨唑的濃度設(shè)置為1、10、100、1 000 mg/L。挑取健康的剛羽化的成螨置于新鮮、大小一致、四周包裹濕脫脂棉的荔枝葉片正面，每葉片挑取20頭，待螨穩(wěn)定后(約30 min)，觀察螨的存活情況，將死螨剔除，補(bǔ)充新的成螨。試驗(yàn)中，以清水噴霧的葉片為空白對(duì)照，并設(shè)溶劑對(duì)照。每處理3次重復(fù)，每次重復(fù)20頭成螨。在實(shí)驗(yàn)室用Potter噴霧塔將不同濃度的藥液均勻噴于荔枝葉片正面。以初始噴霧體積1 mL、噴霧時(shí)間1 min為標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)。將處理后的荔枝葉片周圍包1層脫脂棉，置于溫度25±1℃、相對(duì)濕度70%～80%、光周期L ∶D=14 ∶10 h的培養(yǎng)箱中飼養(yǎng)。24 h后，在雙目解剖鏡下檢查成螨的死亡情況。用毛筆尖輕觸葉螨，螨足不動(dòng)則視為死亡。

卵的毒力測(cè)定采用浸葉碟法(Keenetal.，1991)。依據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，將噠螨靈配制成0.5、1、2、4、8 mg/L，阿維菌素配制成2、4、8、16、32 mg/L，聯(lián)苯肼酯配制成10、20、40、80、160 mg/L，螺螨酯配制成0.25、0.5、1、2、4 mg/L，乙螨唑配制成0.025、0.05、0.1、0.2、0.4 mg/L。將新鮮、干凈的荔枝葉片放置于鋪有濕海綿的培養(yǎng)皿中，再將40頭雌成螨接入葉片，讓其產(chǎn)卵24 h，然后剔除雌成螨，將有卵的葉片浸入配制好的系列藥液中10 s，晾干后放回培養(yǎng)皿中，在雙目解剖鏡下檢查卵量。將處理后的荔枝葉片置于溫度25±1℃、相對(duì)濕度70%～80%、光周期L ∶D=14 ∶10 h培養(yǎng)箱中飼養(yǎng)。試驗(yàn)中，以清水處理的葉片為空白對(duì)照，并設(shè)溶劑對(duì)照。每處理重復(fù)3次，每次重復(fù)約40個(gè)卵。待空白對(duì)照卵全部孵化時(shí)用體式顯微鏡檢查孵化數(shù)、未孵化數(shù)。

若螨的毒力測(cè)定采用浸葉法(趙建周和劇正理，1994)。依據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，將噠螨靈配制成0.0125、0.025、0.05、0.1、0.2 mg/L，阿維菌素配制成0.025、0.05、0.1、0.2、0.4 mg/L，聯(lián)苯肼酯配制成0.125、0.25、0.5、1、2 mg/L，螺螨酯配制成0.5、1、2、4、8 mg/L，乙螨唑配制成0.15、0.3、0.6、1.2、2.4 mg/L。將新鮮、干凈的荔枝葉片浸入配置好的系列藥液中10 s，晾干后葉片周圍包1層脫脂棉，放置于鋪有濕海綿的培養(yǎng)皿中。每片葉片接種20頭若螨，待螨體穩(wěn)定后(約30 min)在雙目解剖鏡下檢查螨數(shù)，不足者補(bǔ)齊。將處理后的荔枝葉片置于溫度25±1℃、相對(duì)濕度70%～80%、光周期L ∶D=14 ∶10 h培養(yǎng)箱中飼養(yǎng)。試驗(yàn)中，以清水處理的葉片為空白對(duì)照，并設(shè)溶劑對(duì)照。每處理3次重復(fù)，每次重復(fù)20頭若螨。24 h后用毛筆尖輕觸葉螨，螨足不動(dòng)視為死亡，檢查每處理的死亡數(shù)，計(jì)算死亡率。

1.2.2荔枝葉螨的田間防效測(cè)定

田間防效試驗(yàn)參照《農(nóng)藥田間藥效試驗(yàn)準(zhǔn)則(一)殺螨劑防治桔全爪螨》進(jìn)行試驗(yàn)。試驗(yàn)在廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所白云基地進(jìn)行，荔枝品種為“糯米糍”，株高2 m，株行距為4 m×4 m，荔枝園肥力中等，管理良好。

試驗(yàn)共設(shè)6個(gè)處理：15%噠螨靈乳油5 000倍、1.8%阿維菌素乳油3 000倍、43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑3 000倍、240 g/L螺螨酯懸浮劑5 000倍和110 g/L乙螨唑懸浮劑5 000倍。使用3WBD-16B型背負(fù)式電動(dòng)噴霧器對(duì)荔枝整株進(jìn)行均勻噴霧，藥液用量2 000 L/ha。以上處理采取隨機(jī)區(qū)組排列，每處理4次重復(fù)，每個(gè)小區(qū)2株荔枝樹(shù)。于2018年8月8日進(jìn)行試驗(yàn)，當(dāng)天天氣多云，荔枝園中有大量的成螨，調(diào)查藥前基數(shù)并施藥，藥后1、3、10、15和20 d調(diào)查活螨數(shù)。每小區(qū)每株?yáng)|、南、西、北、中5個(gè)方位各標(biāo)記同一梢期的3片葉片，調(diào)查所標(biāo)記3片葉片上的所有活動(dòng)螨數(shù)。依據(jù)藥前基數(shù)和藥后活螨數(shù)，計(jì)算蟲(chóng)口減退率和防效。每次調(diào)查時(shí)觀察藥劑對(duì)荔枝植株、試驗(yàn)區(qū)內(nèi)非靶標(biāo)生物的影響，評(píng)價(jià)藥劑對(duì)荔枝樹(shù)和非靶標(biāo)生物的影響。蟲(chóng)口減退率(%)=(藥前蟲(chóng)口基數(shù)-藥后活螨數(shù))/藥前蟲(chóng)口基數(shù)×100， 防效(%)=(處理區(qū)蟲(chóng)口減退率-空白對(duì)照區(qū)蟲(chóng)口減退率)/(100-空白對(duì)照區(qū)蟲(chóng)口減退率)×100。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用鄧肯氏新復(fù)極差法對(duì)田間防效進(jìn)行差異性顯著分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 5種殺螨劑對(duì)荔枝葉螨的毒力

在所用殺螨劑中，噠螨靈和阿維菌素對(duì)荔枝葉螨成螨的毒力較高，24 h LC50值分別為0.258和0.376 mg/L，說(shuō)明噠螨靈和阿維菌素對(duì)荔枝葉螨成螨具有較好的毒殺效果。其次為聯(lián)苯肼酯，24 h LC50值為1.945 mg/L。荔枝葉螨成螨經(jīng)螺螨酯和乙螨唑1 000 mg/L濃度處理24 h后校正死亡率僅為30%左右，可見(jiàn)螺螨酯和乙螨唑?qū)Τ沈緹o(wú)活性(表1)。

5種殺螨劑對(duì)荔枝葉螨卵的毒力差異較大，其中乙螨唑活性最高，LC50僅為0.110 mg/L，螺螨酯次之，聯(lián)苯肼酯的毒力最低，LC50為37.391 mg/L(表1)。

表1 5種殺螨劑對(duì)荔枝葉螨的毒力Table 1 Toxicity of five acaricides against Oligonychus litchii

噠螨靈、阿維菌素、聯(lián)苯肼酯、螺螨酯和乙螨唑5種藥劑對(duì)荔枝葉螨若螨均有較高的毒力，LC50值分別為0.046、0.102、0.495、1.762和0.563 mg/L。按照藥劑的毒力大小排序?yàn)閲}螨靈>阿維菌素>聯(lián)苯肼酯>乙螨唑>螺螨酯，其中噠螨靈對(duì)若螨的毒力最高，阿維菌素次之，螺螨酯最低。

同一殺螨劑對(duì)荔枝葉螨不同螨態(tài)的毒力結(jié)果如圖1所示。噠螨靈和阿維菌素對(duì)荔枝葉螨各螨態(tài)均有較高的活性，兩種殺螨劑對(duì)若螨的活性最高，成螨次之，卵最低，兩種藥劑對(duì)若螨的毒力分別是成螨的5.61和3.69倍，卵的39.93和85.12倍。聯(lián)苯肼酯對(duì)荔枝葉螨卵的毒力一般，對(duì)若螨和成螨的毒力較高，其中聯(lián)苯肼酯對(duì)若螨的毒力分別是成螨和卵的3.93和75.54倍。螺螨酯和乙螨唑?qū)笾θ~螨成螨、卵和若螨的活性差異較大，兩種藥劑均對(duì)卵的活性最強(qiáng)，毒力分別是若螨的1.82和5.12倍，而兩種藥劑對(duì)成螨室內(nèi)毒力值大于1 000 mg/L，說(shuō)明兩種藥劑對(duì)成螨基本無(wú)活性。

圖1 殺螨劑對(duì)荔枝葉螨不同螨態(tài)的毒力比較Fig.1 Toxicity comparison of acaricides against Oligonychus litchii

2.2 5種殺螨劑對(duì)荔枝葉螨的田間防效

5種殺螨劑對(duì)荔枝葉螨的田間防效詳見(jiàn)表2。藥后1 d，15%噠螨靈乳油稀釋5 000倍和1.8%阿維菌素乳油稀釋3 000倍防效分別為78.12%、74.39%，藥后3 d防效升高，藥后10 d兩藥劑的防效均升至100%，藥后15 d防效維持不變，藥后20 d防效有所下降(96.23%和91.72%)。43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑稀釋3 000倍藥后1 d防效為68.93%，顯著低于噠螨靈防效，顯著高于螺螨酯和乙螨唑防效，與阿維菌素防效差異不顯著；藥后3 d防效升高，藥后10 d防效達(dá)最高值(100%)，與噠螨靈和阿維菌素防效相當(dāng)，顯著高于螺螨酯和乙螨唑防效；藥后15 d防效開(kāi)始下降，藥后20 d防效(89.16%)顯著低于噠螨靈，與阿維菌素、螺螨酯和乙螨唑防效無(wú)顯著差異。240 g/L螺螨酯懸浮劑稀釋5 000倍和110 g/L乙螨唑懸浮劑稀釋5 000倍藥后1 d防效僅為55.45%和50.79%，顯著低于其他3種藥劑防效；藥后3～15 d防效不斷升高，藥后20 d防效達(dá)最高值(90.27%和93.85%)，與其他3種藥劑防效差異不顯著。

表2 5種殺螨劑對(duì)荔枝葉螨的田間防效Table 2 Field control efficacy of five acaricides against Oligonychus litchii

3 結(jié)論與討論

螨類在適宜的氣候條件下繁殖力極強(qiáng)，頻繁使用單一殺螨劑較易引發(fā)抗藥性。因此，篩選高效、低毒、持效期長(zhǎng)的殺螨劑可以避免或延緩抗藥性的產(chǎn)生。本研究中的5種殺螨劑均屬于不同類型的藥劑，具有不同的作用機(jī)制，目前國(guó)內(nèi)關(guān)于這些殺螨劑的研究多集中在單一藥劑的藥效試驗(yàn)或單一螨態(tài)室內(nèi)毒力測(cè)定?；诖耍狙芯肯到y(tǒng)比較了5種殺螨劑對(duì)荔枝葉螨不同螨態(tài)的毒力及田間防效。

本研究測(cè)定的阿維菌素、噠螨靈對(duì)荔枝葉螨成螨、卵和若螨的LC50均較低，表明阿維菌素、噠螨靈對(duì)荔枝葉螨各螨態(tài)均有較好的毒力，這與馬惠等(2009)、涂洪濤等(2016)報(bào)道的結(jié)果相一致。程蘭等(2019)研究發(fā)現(xiàn)阿維菌素和噠螨靈藥劑對(duì)柑橘全爪螨Panonychuscitri的速效性好，持效期30 d以上，本研究中15%噠螨靈乳油和1.8%阿維菌素乳油防治荔枝葉螨藥后1～20 d均有較高的防效，表現(xiàn)出較快的速效性和長(zhǎng)達(dá)20 d的持效期，這與上述驗(yàn)結(jié)果一致。

宮亞軍等(2013)研究表明，聯(lián)苯肼酯對(duì)二斑葉螨Tetranychusurticae各個(gè)發(fā)育階段均有效，對(duì)若螨和成螨的毒力相當(dāng)，但都高于對(duì)卵的毒力，田間施藥14 d后防效可達(dá)96.66%。本研究結(jié)果顯示，聯(lián)苯肼酯對(duì)荔枝葉螨的3個(gè)螨態(tài)均有毒殺作用，與上述研究結(jié)果一致，但其對(duì)若螨的毒力顯著高于對(duì)成螨和卵的毒力，顯示出其對(duì)荔枝葉螨若螨具有很好的毒力；43%聯(lián)苯肼酯懸浮劑3 000倍液藥后1 d防效低于阿維菌素和噠螨靈，藥后15 d防效開(kāi)始下降，表現(xiàn)出一般的速效性和持效性。

有研究表明，螺螨酯對(duì)荔枝葉螨卵和若螨的毒力分別為2.61、0.20 mg/L，乙螨唑?qū)β押腿趄亩玖?.01、0.002 mg/L，對(duì)雌成螨沒(méi)有毒力，田間施藥1 d后防效20%左右，藥后30 d防效仍高于85%(封云濤等，2018)；張坤鵬等(2016)報(bào)道110 g/L乙螨唑懸浮劑對(duì)山楂葉螨Tetranychusviennensis的速效性較差，但持效性好。本研究結(jié)果與上述研究報(bào)告一致，即螺螨酯和乙螨唑?qū)笾θ~螨卵和若螨均有較高的毒殺作用，但田間防治時(shí)速效性較差，推測(cè)原因可能是兩藥劑對(duì)成螨基本無(wú)活性，而在田間施藥時(shí)荔枝葉螨種群處于成螨發(fā)生期。

徐淑等(2014)測(cè)定了噠螨靈、阿維菌素、噻螨酮、螺螨酯和乙螨唑?qū)笾θ~螨成螨的毒力和田間防效，而本研究測(cè)定了噠螨靈、阿維菌素、聯(lián)苯肼酯、螺螨酯和乙螨唑等5種殺螨劑對(duì)3種不同螨態(tài)荔枝葉螨的毒力和田間防效，旨在根據(jù)田間荔枝葉螨種群的不同發(fā)育時(shí)期選用合適的防治藥劑：建議在荔枝葉螨發(fā)生早期、成螨較少時(shí)選用螺螨酯或乙螨唑，而荔枝葉螨種群中成螨、若螨較多時(shí)施用阿維菌素、噠螨靈或聯(lián)苯肼酯。如遇種群數(shù)量較大、世代重疊嚴(yán)重時(shí)，建議將不同類型、不同作用方式的殺螨劑輪用或混用，以達(dá)到較好防治效果和延緩抗性發(fā)展的目的。