梁文康,蘇 平,魏 丹

(浙江大學(xué)生物系統(tǒng)工程與食品科學(xué)學(xué)院,浙江杭州 310058)

黃秋葵(Abelmoschusesculentus(L.)Moench)為錦葵科、秋葵屬的草本植物,原產(chǎn)自非洲、南亞等熱帶或亞熱帶地區(qū),引入中國(guó)后,在江浙、兩湖和廣東等地區(qū)被廣泛種植[1]。黃秋葵是目前廣受青睞的新型蔬菜,不僅口感嫩滑、味道鮮美,而且具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,黃阿根等[2]測(cè)定黃秋葵果莢中的蛋白質(zhì)和總糖含量均接近20%,黃酮物質(zhì)的含量超過(guò)2%。膳食纖維是一類重要的生物活性物質(zhì),被稱為第七大營(yíng)養(yǎng)素,王琰等[3]證實(shí)黃秋葵果莢中總膳食纖維含量高達(dá)40%,其中可溶性膳食纖維(SDF)達(dá)到膳食纖維總含量的20%以上。黃秋葵果莢的提取物具有較好的抗氧化性,以及降低血糖、緩解機(jī)體疲勞等多種生理功能[4-7],可作為膳食纖維的良好來(lái)源,用于制備具有多種功能特性的膳食纖維食品。

膳食纖維的常用的提取方法有酸堿提取法[8]、酶解法[9]和微生物法[10]等。酸堿提取法成本低,操作簡(jiǎn)便,應(yīng)用最廣泛,但易造成溶劑殘留,且強(qiáng)酸或強(qiáng)堿環(huán)境會(huì)造成纖維素、半纖維素等組分的損失,使提取得到的膳食纖維的生理活性受到影響[8]。酶提取法雖然成本略高于化學(xué)溶劑法,但不容易破壞被提取物的結(jié)構(gòu),使其功能性得到良好的保持[11]。目前關(guān)于黃秋葵膳食纖維提取的研究較少[12],常用的方法為酸堿提取法。韋鷺等[12]對(duì)酸水解法提取黃秋葵膳食纖維的工藝進(jìn)行優(yōu)化,最高得率為12.65%。而黃秋葵膳食纖維的酶法提取尚未見(jiàn)報(bào)道。

因此本研究以黃秋葵果莢為原料,采用酶解法提取黃秋葵可溶性膳食纖維,通過(guò)響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)探究黃秋葵可溶性膳食纖維得率最高時(shí)的工藝參數(shù)。對(duì)提取產(chǎn)物進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征,探究提取前后黃秋葵可溶性膳食纖維的結(jié)構(gòu)變化,同時(shí)測(cè)定黃秋葵可溶性膳食纖維的理化性質(zhì),以此為基礎(chǔ)可進(jìn)一步研究黃秋葵可溶性膳食纖維的生理功效,也為黃秋葵保健食品的開(kāi)發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

黃秋葵 由嘉興市捌零壹農(nóng)業(yè)生物科技有限公司提供,產(chǎn)自浙江嘉善;α-淀粉酶(4000 U/g)、糖化酶(10萬(wàn)U/g)、中性蛋白酶(10萬(wàn)U/g) 上海源葉生物科技有限公司;乙醇、鹽酸、氫氧化鈉(均為分析純) 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;花生油 市售。

JA1003N電子天平 上海菁海儀器有限公司;PH070A鼓風(fēng)干燥箱 上海一恒科技有限公司;UV-2550紫外可見(jiàn)分光光度計(jì) 日本Shimadzu公司;Multiskan GO全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀 美國(guó)Thermo公司;Nicolet iS10傅立葉紅外光譜儀 美國(guó)賽默飛世爾科技公司;D8 Advance X射線衍射儀 德國(guó)布魯克科技有限公司;SU-8010 冷場(chǎng)發(fā)射掃描電子顯微鏡 日本日立公司;TGL20M高速冷凍離心機(jī) 湖南凱達(dá)科學(xué)儀器有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 黃秋葵SDF的提取

1.2.1.1 工藝流程 黃秋葵果莢→干燥→粉碎→復(fù)合酶酶解→滅酶→蛋白酶酶解→滅酶→離心→收集濾液→醇沉→收集沉淀→真空冷凍干燥→黃秋葵SDF

1.2.1.2 操作要點(diǎn) a.預(yù)處理:黃秋葵果莢清洗后切分成2～3 cm的小段,55 ℃熱風(fēng)干燥12 h,粉碎后過(guò)40目篩,密封后放置于干燥器中備用。

b.復(fù)合酶酶解:參考文獻(xiàn)[13]中使用α-淀粉酶(最適pH為6.0～7.0)和糖化酶(最適pH為4.5)復(fù)合提取可溶性膳食纖維的方法,準(zhǔn)確稱取充分干燥后的秋葵粉樣品2.00 g,加入一定體積的蒸餾水,將溶液pH調(diào)節(jié)至6.5,加入一定量的α-淀粉酶和糖化酶等比例混合的復(fù)合酶,在適宜溫度下的水浴中保持一段時(shí)間,期間不斷攪拌;

c.滅酶:提取液放入100 ℃水浴中,滅酶5 min;

d.蛋白酶酶解:將提取液冷卻至室溫,調(diào)節(jié)pH至7.0,加入質(zhì)量濃度為1.0%的蛋白酶,在50 ℃水浴中保持60 min,期間不斷攪拌;

e.滅酶:蛋白酶處理后的提取液放入100 ℃水浴中,滅酶5 min;

f.醇沉:提取液離心,離心條件為5000 r/min,15 min。收集上清液,加入四倍體積的95%乙醇,靜置12 h后過(guò)濾,收集濾渣,真空冷凍干燥后得到黃秋葵可溶性膳食纖維。

1.2.2 單因素實(shí)驗(yàn) 準(zhǔn)確稱取黃秋葵粉2.00 g,置于50 mL離心管中,以復(fù)合酶的質(zhì)量濃度1.5%、復(fù)合酶酶解時(shí)間60 min,復(fù)合酶酶解溫度60 ℃、料液比1∶20為基本條件,通過(guò)改變單一因素來(lái)探究其對(duì)黃秋葵SDF提取造成的影響。料液比分別為1∶15、1∶20、1∶25、1∶30、1∶35 g/mL;復(fù)合酶添加量分別為0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%;復(fù)合酶酶解時(shí)間分別為20、40、60、80、100 min;復(fù)合酶酶解溫度分別為40、50、60、70、80 ℃。具體步驟如1.2.1所述,研究各個(gè)因素對(duì)黃秋葵SDF提取得率的影響。

1.2.3 響應(yīng)面試驗(yàn) 使用軟件Design Expert 10.0,方法選用Box-Behnken,自變量為料液比(A)、復(fù)合酶添加量(B)、復(fù)合酶酶解時(shí)間(C)、復(fù)合酶酶解溫度(D),響應(yīng)指標(biāo)即秋葵SDF得率。根據(jù)之前單因素試驗(yàn)的結(jié)果,確定了自變量的試驗(yàn)水平如下:

1.2.4 黃秋葵SDF得率的計(jì)算 計(jì)算公式為:

式(1)

式中:m為干燥后可溶性膳食纖維的重量(g);M為干燥后秋葵粉的重量(g)。

1.2.5 黃秋葵SDF理化性質(zhì)測(cè)定

1.2.5.1 持水力的測(cè)定 持水力(water holding capacity,WHC)即在除重力、大氣壓力之外的外力作用情況下樣品結(jié)合水分的能力。測(cè)定方法:準(zhǔn)確稱取1.00 g樣品,加水30 mL,振蕩均勻后在37 ℃水浴中放置12 h,以4000 r/min,離心15 min后稱重,按照式(2)計(jì)算黃秋葵膳食纖維的持水力[14]:

式(2)

1.2.5.2 膨脹力的測(cè)定 膨脹力(swelling capacity,SC)即樣品充分吸收水分后,所占的體積與未吸水前實(shí)際體積的差值。測(cè)定方法:準(zhǔn)確稱取2.00 g樣品,置于100 mL量筒中,加蒸餾水60 mL,充分混合后在4 ℃下放置24 h,記錄樣品吸水前后的刻度值。按照式(3)計(jì)算黃秋葵膳食纖維的膨脹力[15]:

膨脹力(SC)=(樣品吸水后刻度(mL)-初始刻度(mL))/樣品粉重量(g)

式(3)

1.2.5.3 持油力的測(cè)定 持油力(oil holding capacity,OHC)即在不受除重力、大氣壓力之外的外力作用情況下樣品結(jié)合油分的能力。測(cè)定方法:準(zhǔn)確稱取1.00 g樣品,加花生油10 g,振蕩均勻后在37 ℃水浴中放置12 h,以4000 r/min,離心15 min后稱重,按照式(4)計(jì)算黃秋葵膳食纖維的持油力[16]:

持油力(OHC)=(樣品結(jié)合油后重量(g)-樣品粉重量(g))/樣品粉重量(g)

式(4)

1.2.6 黃秋葵SDF的結(jié)構(gòu)表征

1.2.6.1 掃描電鏡觀察顯微結(jié)構(gòu) 按照文獻(xiàn)[17]中的方法對(duì)黃秋葵SDF及黃秋葵粉進(jìn)行處理,使用掃描電鏡觀察黃秋葵SDF及黃秋葵粉的顯微結(jié)構(gòu),觀察在100倍和5000倍兩個(gè)放大倍數(shù)下二者的表面形態(tài)。

1.2.6.2 傅里葉紅外光譜分析 樣品在50 ℃烘箱中干燥24 h,溴化鉀粉末在105 ℃烘箱中干燥24 h。取2 mg樣品和200 mg 溴化鉀混合,在紅外燈下充分研磨。將混合均勻的粉末壓制成薄片,使用紅外光譜儀掃描[18],掃描波數(shù)為400～4000 cm-1,分別記錄黃秋葵SDF和黃秋葵粉的紅外光譜曲線并分析。

1.2.6.3 X射線衍射分析 按照文獻(xiàn)[19]中的方法進(jìn)行樣品的準(zhǔn)備及分析參數(shù)的設(shè)置。樣品在50 ℃烘箱中干燥24 h,使用X射線衍射儀分析,陽(yáng)極靶為Cu,X射線波長(zhǎng)λ=0.156 nm,工作電壓40 kV,管流20 mA,掃描范圍5°～70°,掃描間隔0.02°。分別記錄黃秋葵SDF和黃秋葵粉的X射線衍射圖譜并分析。

1.3 數(shù)據(jù)處理

所有數(shù)據(jù)均重復(fù)3次取平均值,使用SPSS 18.0進(jìn)行單因素方差分析,使用Origin 8.0進(jìn)行圖表的制作與處理。數(shù)據(jù)采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差的形式表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 酶解法提取黃秋葵SDF的單因素實(shí)驗(yàn)

2.1.1 料液比對(duì)黃秋葵SDF得率的影響 圖1中,隨著料液比的增加,黃秋葵SDF得率先增加而后趨于穩(wěn)定。在料液比為1∶25 g/mL時(shí),SDF得率最高,為7.95%。適當(dāng)?shù)牧弦罕瓤梢允姑概c底物充分反應(yīng),從而影響SDF的得率[20],在一定范圍內(nèi)SDF的得率隨料液比的增大而升高;當(dāng)酶和底物已經(jīng)充分接觸,料液比繼續(xù)增加，得率變化不大。因此,綜合考慮提取效率和成本,較為適宜的料液比為1∶25 g/mL。

圖1 料液比對(duì)黃秋葵可溶性膳食纖維得率的影響

2.1.2 加酶量對(duì)黃秋葵SDF得率的影響 由圖2可知,當(dāng)復(fù)合酶的添加量從0.5%增加至2.0%時(shí),黃秋葵SDF得率不斷升高,當(dāng)添加量為2.0%時(shí),增加至8.88%,表明越來(lái)越多的酶同底物結(jié)合,充分發(fā)生反應(yīng)。隨著加酶量的繼續(xù)增加,SDF的得率有所下降,SDF得率下降的原因可能是過(guò)量的復(fù)合酶繼續(xù)作用于可溶性膳食纖維,導(dǎo)致產(chǎn)物減少[21]。因此加酶量以2.0%為宜。

圖2 加酶量對(duì)黃秋葵可溶性膳食纖維得率的影響

2.1.3 酶解時(shí)間對(duì)黃秋葵SDF得率的影響 由圖3可知,酶解時(shí)間在20～60 min時(shí),SDF得率上升,在酶解時(shí)間為60 min時(shí),達(dá)到最大,為8.22%;酶解時(shí)間繼續(xù)增加,SDF得率呈下降趨勢(shì)。起初隨著酶解時(shí)間的增加,酶和底物充分反應(yīng),但當(dāng)酶解時(shí)間過(guò)長(zhǎng)時(shí),酶的活性受外界因素影響而下降,影響提取的效率;另一方面酶水解了可溶性膳食纖維,造成產(chǎn)量的下降[21]。因此適宜的酶解時(shí)間為60 min。

圖3 酶解時(shí)間對(duì)黃秋葵可溶性膳食纖維得率的影響

2.1.4 酶解溫度對(duì)黃秋葵SDF得率的影響 由圖4可知,在40～60 ℃時(shí),SDF得率隨酶解溫度的升高而增加;在酶解溫度為60 ℃時(shí),SDF得率達(dá)到峰值,為8.88%。溫度會(huì)直接影響酶分子的活性,適宜的溫度可以使酶的活性最大程度地發(fā)揮;當(dāng)溫度過(guò)高時(shí),酶的活性大大損失,導(dǎo)致提取效率降低[22]。因此,較為適宜的酶解溫度為60 ℃。

圖4 酶解溫度對(duì)黃秋葵可溶性膳食纖維得率的影響

2.2 酶解法提取黃秋葵SDF的響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)

2.2.1 回歸模型的構(gòu)建及方差分析 酶解法提取黃秋葵SDF的響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案見(jiàn)表1,按照方案中的工藝條件提取黃秋葵SDF,得到的試驗(yàn)結(jié)果如表2所示。使用Design Expert 10.0對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合,得到二次多項(xiàng)式回歸方程為:

表1 響應(yīng)面試驗(yàn)因素水平

表2 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案與結(jié)果

Y=10.54 - 0.17A-0.65B-0.42C+0.50D+0.062AB+0.062AC+0.045AD-0.030BC+0.0075BD+0.26CD-0.89A2-0.98B2-0.60C2- 0.79D2

通過(guò)分析變量的P值來(lái)反應(yīng)其對(duì)響應(yīng)值的影響程度,P值越小,說(shuō)明該變量對(duì)響應(yīng)值的影響越顯著。由表3可知,加酶量(B)、酶解時(shí)間(C)和酶解溫度(D)對(duì)黃秋葵SDF得率的影響均極顯著(P<0.01),料液比(A)對(duì)黃秋葵SDF得率的影響不顯著(P>0.05)。通過(guò)對(duì)比表3中的F值可以看出,混合酶添加量對(duì)黃秋葵SDF提取效率的影響最大,酶解溫度、酶解時(shí)間次之,料液比影響相對(duì)較小。此外,二次項(xiàng)A2、B2、C2、D2對(duì)黃秋葵SDF得率的影響均極顯著(P<0.01),各因素間的兩兩交互作用對(duì)黃秋葵SDF得率的影響均不顯著(P>0.05)。

2.2.2 響應(yīng)面分析 響應(yīng)面圖是描繪了當(dāng)其它因素水平不變時(shí),兩個(gè)因素的水平發(fā)生變化對(duì)響應(yīng)值所產(chǎn)生的影響情況的圖形,如圖5所示。

由圖5a可知,在料液比為1∶22～1∶26 g/mL,加酶量為1.7%～1.9%時(shí),SDF得率有極大值。當(dāng)加酶量和酶解溫度固定,料液比和酶解時(shí)間對(duì)得率的影響如圖5b所示,隨著料液比或酶解時(shí)間的增加,黃秋葵中SDF的提取效率均呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)。在圖5e中,隨著加酶量或酶解溫度的增加,黃秋葵中SDF的得率先上升后下降。由圖5f可知,在酶解時(shí)間為50～60 min,酶解溫度為60～65 ℃時(shí),黃秋葵SDF的得率有極大值。圖5中酶解時(shí)間(C)和酶解溫度(D)交互作用的響應(yīng)面曲線較陡峭,對(duì)響應(yīng)值影響最大;其它交互作用對(duì)應(yīng)的響應(yīng)面曲面較平緩,表明對(duì)響應(yīng)值無(wú)顯著影響,同表3的方差分析結(jié)果一致。

圖5 酶解法提取黃秋葵SDF的兩因素交互作用響應(yīng)面圖

表3 響應(yīng)面試驗(yàn)回歸模型的方差分析

在此模型的基礎(chǔ)上,使用軟件預(yù)測(cè)酶解法提取黃秋葵SDF的最佳工藝參數(shù)為料液比1∶24.43 g/mL、加酶量1.83%、酶解時(shí)間54.21 min、酶解溫度62.64 ℃,該條件下得到黃秋葵SDF得率的最大預(yù)測(cè)值為10.78%。

2.2.3 優(yōu)化結(jié)果與驗(yàn)證 考慮實(shí)際情況,將工藝參數(shù)調(diào)整為:料液比1∶24 g/mL、加酶量1.8%、酶解時(shí)間54 min、酶解溫度62 ℃。在此條件下進(jìn)行驗(yàn)證,設(shè)置3組平行實(shí)驗(yàn),實(shí)際提取得到黃秋葵SDF得率為10.94%±0.14%,相對(duì)誤差為1.48%,實(shí)驗(yàn)值與預(yù)測(cè)值之間的差異不顯著(P>0.05),證明模型預(yù)測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確,能夠可靠地反映提取過(guò)程中各因素對(duì)黃秋葵SDF得率的影響情況。

2.3 黃秋葵SDF的理化性質(zhì)

持水力、膨脹力和持油力是膳食纖維的重要理化性質(zhì),能夠反映膳食纖維的品質(zhì)。在最優(yōu)提取工藝下提取得到的黃秋葵SDF的持水力、膨脹力、持油力測(cè)定結(jié)果如表4所示,并與幾種其它來(lái)源的SDF進(jìn)行比較。

表4 幾種不同來(lái)源的可溶性膳食纖維的持水力、膨脹力和持油力

由表4可知,黃秋葵SDF的持水力為(5.61±0.25) g/g,高于米糠膳食纖維;黃秋葵SDF膨脹力為(3.35±0.13) mL/g,高于米糠膳食纖維;黃秋葵SDF的持油力為(4.88±0.55) g/g,高于米糠膳食纖維、錦橙皮渣膳食纖維和雷竹筍膳食纖維。表明優(yōu)化提取后的黃秋葵SDF具有良好的持水力、膨脹力和持油力。黃秋葵SDF的持油力來(lái)自于其表面暴露出的親油基團(tuán),膳食纖維對(duì)油脂的吸附作用可以對(duì)腸道起到保護(hù)作用。研究表明[26],黃秋葵SDF的持水力可以增加糞便的含水量,而膨脹性使其在溶于水后體積膨脹,同樣具有促進(jìn)排便的作用。由圖6可知,黃秋葵SDF在100×倍數(shù)下呈現(xiàn)大小不一、排布緊密的粒狀,顆粒形狀較為清晰,結(jié)構(gòu)較為完整;原料黃秋葵粉在100×倍數(shù)下呈碎塊化,為不均勻分布的顆粒、片狀物和棒狀物,形狀不規(guī)則、排列松散。未經(jīng)處理的黃秋葵粉表面含有較多的淀粉和蛋白質(zhì),在5000×倍數(shù)下可觀察到其表面較為光滑;黃秋葵SDF在5000×倍數(shù)下可觀察到片狀結(jié)構(gòu),符合膳食纖維的一般形態(tài),表面較提取前的黃秋葵粉更為粗糙,說(shuō)明提取充分除去了淀粉、蛋白質(zhì)[27]。觀察黃秋葵SDF的微觀結(jié)構(gòu),其表面分布有許多小孔,使其具有良好的持水性和吸附特性。因此若對(duì)黃秋葵SDF進(jìn)行進(jìn)一步的超聲或超微粉碎處理,可能會(huì)打破其片狀結(jié)構(gòu),使蜂窩狀小孔充分暴露,比表面積增加,實(shí)現(xiàn)對(duì)吸附性等功能特性的改良。

2.4 黃秋葵SDF的掃描電鏡結(jié)果

圖6(a1)、(b1)為放大100倍的黃秋葵SDF和黃秋葵粉的掃描電鏡圖,圖6(a2)、(b2)為放大5000倍的黃秋葵SDF和黃秋葵粉的掃描電鏡圖。

圖6 黃秋葵SDF與黃秋葵粉的掃描電鏡圖

2.5 傅里葉紅外光譜分析

使用傅里葉變換紅外(fourier transform infrared,FTIR)光譜儀,對(duì)黃秋葵SDF和黃秋葵粉進(jìn)行掃描分析,得到相應(yīng)的紅外光譜,如圖7所示。通過(guò)分析黃秋葵SDF的紅外光譜中吸收峰的位置與強(qiáng)度,可以反映SDF中存在的某些化學(xué)基團(tuán)和結(jié)構(gòu)。比較黃秋葵粉和黃秋葵SDF的吸收峰位置與形狀,可以得到提取前后混合物的組成變化情況。

圖7 黃秋葵粉與黃秋葵SDF的傅里葉紅外光譜圖

由圖7可知,黃秋葵SDF在3250 cm-1處有寬而強(qiáng)的吸收峰,此吸收峰由O-H伸縮振動(dòng)引起,表明秋葵SDF中含有較多羥基,形成了締合狀態(tài)的氫鍵。在2960 cm-1處呈現(xiàn)弱峰,此吸收峰由糖類中的-CH3或-CH2-上的C-H伸縮振動(dòng)引起。在1630 cm-1處的吸收峰由C=O伸縮振動(dòng)引起,是羧基或醛基的特征峰,說(shuō)明黃秋葵SDF中含有糖醛酸。在1400 cm-1處的吸收峰由C-H彎曲振動(dòng)引起。在1090 cm-1處出現(xiàn)強(qiáng)吸收峰,此峰由C-O伸縮振動(dòng)或O-H變角振動(dòng)引起,說(shuō)明黃秋葵SDF中存在糖環(huán)C-O-C或C-O-H結(jié)構(gòu)。整體來(lái)看,黃秋葵SDF的紅外圖譜符合多糖類物質(zhì)的典型特征[28]。

原料黃秋葵粉與黃秋葵SDF光譜的吸收峰位置大致相似,而黃秋葵SDF在892 cm-1處出現(xiàn)了新的吸收峰,該峰是β-吡喃糖的特征吸收峰,由C-H變角振動(dòng)引起,說(shuō)明黃秋葵SDF中存在β-吡喃糖。該吸收峰可能是在提取過(guò)程中由淀粉水解形成的。

2.6 X射線衍射分析

通過(guò)對(duì)黃秋葵SDF和黃秋葵粉進(jìn)行X射線衍射(X-ray diffraction,XRD),分析圖譜可以推斷材料的晶體結(jié)構(gòu)。通過(guò)比較黃秋葵粉和黃秋葵SDF的XRD圖譜,可以探究提取過(guò)程對(duì)SDF晶體的結(jié)構(gòu)、序列和尺寸的影響。

分析黃秋葵SDF的XRD圖譜,如圖8A所示,可以看出:黃秋葵SDF在掃描角度2θ為22°處出現(xiàn)明顯的結(jié)晶衍射峰,在31°處有較弱的結(jié)晶衍射峰,符合纖維素Ⅰ晶型的特征,說(shuō)明黃秋葵SDF為結(jié)晶區(qū)和無(wú)定形區(qū)共同存在的狀態(tài)[29]。比較黃秋葵SDF與黃秋葵粉的XRD圖譜,發(fā)現(xiàn)在提取前后的圖線形狀及出峰位置沒(méi)有明顯改變,混合物的晶體結(jié)構(gòu)變化不大,說(shuō)明提取過(guò)程對(duì)SDF的結(jié)晶區(qū)沒(méi)有造成明顯的破壞。比較縱坐標(biāo)可以得知,黃秋葵SDF與提取前相比,峰強(qiáng)度下降,而且22°附近的主衍射峰變寬,這可能是由于SDF中部分晶體的序列和尺寸發(fā)生了改變。研究表明[30],膳食纖維的結(jié)晶區(qū)暴露,表現(xiàn)為衍射峰強(qiáng)度的減小,可以使膳食纖維的持水性、溶脹性等特性增強(qiáng),進(jìn)而使膳食纖維的一些生理功能得到改善。

圖8 黃秋葵粉與黃秋葵SDF的X射線衍射圖譜

3 結(jié)論

復(fù)合酶法提取黃秋葵SDF的最優(yōu)條件為:料液比1∶24 g/mL、加酶量1.8%、酶解時(shí)間54 min、酶解溫度62 ℃,該條件下得到黃秋葵SDF的得率為10.94%。黃秋葵SDF的持水力為(5.61±0.25) g/g,膨脹力為(3.35±0.13) mL/g,持油力為(4.88±0.55) g/g,同其它來(lái)源膳食纖維的對(duì)比表明,黃秋葵SDF具有良好的理化特性,具有成為相關(guān)保健食品原料的潛力。黃秋葵SDF的微觀結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)膳食纖維類物質(zhì)常見(jiàn)的片狀結(jié)構(gòu),其表面粗糙且分布有許多小孔;黃秋葵SDF的紅外光譜符合膳食纖維類物質(zhì)的典型特征,含有較多締合狀態(tài)的氫鍵,并且存在糖醛酸和β-吡喃糖;黃秋葵SDF的XRD圖譜符合纖維素Ⅰ晶型的特征,在提取前后黃秋葵SDF的晶體序列和尺寸發(fā)生了改變。