羅成福 劉姝 馮燕 李柳

摘要?目的：探究翁連解毒湯治療濁毒內蘊型潰瘍性結腸炎（Ulcerative Colitis，UC）臨床療效及可能的作用機制。方法：選取2016年2月至2018年12月在攀枝花學院附屬醫(yī)院收治的濁毒內蘊型UC患者130例作為研究對象，按照入院先后順序分為對照組和觀察組，每組65例。對照組常規(guī)西醫(yī)治療，觀察組加用翁連解毒湯，觀察2組治療前、完成治療后T細胞、NK細胞、炎性反應因子、凝血功能、生命質量變化，完成治療后總結療效。結果：觀察組患者在NK細胞、T淋巴細胞組成、CR、TNF-α、IL-1 β、ESR、內毒素、IL-10、FIB、PLT、APTT改善方面的效果較對照組更優(yōu)，組間差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。觀察組患者完成治療后的生命質量量表各維度評分及總評分改善效果優(yōu)于對照組患者（P<0.05），且臨床總有效率和組織病理學療效率均高于對照組患者（P<0.05）。結論：翁連解毒湯能抑制濁毒內蘊型UC炎性反應，改善高凝狀態(tài)，提高機體免疫功能，從而提高療效和生命質量。

關鍵詞?翁連解毒湯;濁毒內蘊型;潰瘍性結腸炎;T細胞亞群;自然殺傷細胞;炎性反應因子;凝血功能;炎癥性腸病評價量表

Abstract?Objective：To explore the therapeutic effects and possible mechanism of Wenglian Jiedu Decoction in treating ulcerative colitis （UC） with turbid toxin intrinsic type.Methods：A total of 130 UC patients with turbid toxin intrinsic type admitted to the Affiliated Hospital of Panzhihua College from February 2016 to December 2018 were selected as the research objects，and were divided into a control group and an observation group，with 65 cases in each group according to the order of admission.The control group was treated with Western medicine and the observation group was supplemented with Wenglian Jiedu Decoction based on the control group.The changes of T cells，NK cells，inflammatory factors，coagulation function，and quality of life were observed before and after treatment in the 2 groups.Results：The improvement of NK cells，T lymphocyte composition，CR，TNF-α，IL-1 β，ESR，endotoxin，IL-10，F(xiàn)IB，PLT，APTT in the observation group were better than those in the control group，and the differences between groups were statistically significant （P<0.05）.The improvement of the quality of life scale dimensional scores and total scores in the observation group was higher than that in the control group （P<0.05），and the total clinical effective rate and histopathological therapeutic effects rate were significantly higher than that in the control group （P<0.05）.Conclusion：Wenglian Jiedu Decoction can inhibit UC inflammatory reaction of turbid toxin intrinsic type，improve the hypercoagulable state，improve the body′s immune function，and thus improve the quality of life and therapeutic effects.

Keywords?Wenglian Jiedu Decoction; Turbid toxin intrinsic type; Ulcerative colitis; T cell subsets; Natural killer cells; Inflammatory factors; Coagulation function; Inflammatory bowel disease evaluation scale

中圖分類號：R254.6;R259;R256.3文獻標識碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2020.17.021

潰瘍性結腸炎（Ulcerative Colitis，UC）是一種慢性非特異性結腸炎癥，病變累及結腸黏膜和黏膜下層，范圍自直腸、遠端結腸開始逆向近端發(fā)展，呈連續(xù)性分布;臨床表現(xiàn)為腹瀉、腹痛、黏液膿血便;其發(fā)病機制不明確，可能與感染、免疫異常、遺傳、精神因素，等有關;急性發(fā)作時機體細胞免疫功能紊亂，外來抗原刺激機體時，被動激活先天固有免疫防御系統(tǒng)，誘導免疫細胞釋放出多種細胞因子，引發(fā)局部炎性反應和/或免疫反應，介導組織病理性損傷等[1]。目前，在治療上以選用氨基水楊酸制劑、糖皮質激素、免疫抑制劑等為主，但臨床復發(fā)率偏高，且長期使用的藥物不良反應增加。近年來，中醫(yī)以其獨特理論體系在UC治療中公開的新課題成果，顯示日益突出的優(yōu)勢。中醫(yī)學將此病歸屬為“痢疾”“腸風”范疇，因先天稟賦不足后天脾胃虧虛，寒溫不調，飲食無度或不潔，情志不舒或久病耗傷正氣，致使脾運不及，水谷精微運化失司，水反為濕，濕滯或凝成濁，或從熱化，“有一分膿血就有一分熱毒”，致使?jié)駸崮z著，久則化濁蘊毒，濁毒癰滯腸間則氣血搏結，脂膜血絡受損，腐敗成膿[2]。其病位在腸，和肝脾肺腎緊密相關。在治療上則以化濁解毒為治療原則。本方劑臨床研究采用翁連解毒湯治療濁毒內蘊型UC，取得較好的提高免疫功能和抑制炎性反應療效，現(xiàn)報道如下。

1?資料與方法

1.1?一般資料?選取2016年2月至2018年12月攀枝花學院附屬醫(yī)院收治的濁毒內蘊型UC患者130例作為研究對象，按照入院先后順序法分為對照組和觀察組，每組65例。2組患者年齡、性別、病程、并發(fā)癥、體質量指數(shù)（BMI）、日常生活能力積分（ADL）比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。見表1。本方案經醫(yī)院倫理委員會批準實施[倫理審批號：2016年（倫）審第4號]。

1.2?診斷標準?西醫(yī)診斷標準參考《2012年我國炎癥性腸病診斷治療規(guī)范共識意見》[3]，患者癥狀、結腸鏡檢查、組織活檢等均符合UC表現(xiàn)，同時病情分期評估疾病狀態(tài)，明確臨床類型、嚴重程度、分期和范圍。中醫(yī)診斷標準參考《潰瘍性結腸炎中醫(yī)診療專家共識意見》[4]進行，辨證為痢疾，證型為濁毒內蘊型。主癥為腹瀉、膿血便、腹痛、里急后重。次癥為腹脹腸鳴，少氣懶言，食少納呆，脈沉細或尺脈弱。

1.3?納入標準?1）年齡30～75歲，性別不限;2）有完整病史資料，經結腸鏡明確為UC;3）患者簽署知情同意書;4）受試前4周未服用相關藥物或進行手術治療患者;5）符合上述診斷標準。

1.4?排除標準?1）特殊人群，即孕婦、哺乳期、精神病者;2）有嚴重器質性疾病如失代償期疾病;3）其他原因引起的潰瘍性結腸炎如放射性腸炎、克羅恩病、阿米巴痢疾等;4）有精神障礙言語不能清晰表述者;5）嚴重心肝、腎損害影響藥物代謝者。

1.5?脫落與剔除標準?1）因患者自身原因未能完成研究方案者;2）存在其他可能影響研究結論偏倚者。

1.6?治療方法?2組患者均予基礎治療如糾正電解質、營養(yǎng)支持等，予柳氮磺吡啶結腸溶膠囊（廣東強基藥業(yè)有限公司，國藥準字H20051173）4 g口服，每日3次。觀察組在以上基礎上加用翁連解毒湯治療。藥物組成有白頭翁、大血藤、茯苓、米仁，葛根各15 g，升麻12 g，陳皮、防風、白芍、白術、秦皮、地榆各10 g，黃連8 g，炙甘草5 g。所用中藥材均為本院中藥房采購。另外隨癥加減，如便血明顯加白及10 g;身熱加柴胡、川芎各10 g;里急后重加厚樸、蒼術各10 g;腹痛明顯加延胡索、延胡索各10 g;久瀉滑脫不禁加赤石脂、烏梅各10 g;肢冷加吳茱萸、補骨脂各10 g;久瀉脫肛加升麻、黃芪各10 g。以上藥物水煎煮，取汁400 mL，分早晚2次服完，每日1劑，連續(xù)服用4周。治療期間避免辛辣不潔生冷食物，以富含纖維、清淡易消化、少纖維食物為主。

1.7?觀察指標及方法?1）觀察2組治療前、完成治療后外周血T細胞及其亞群、NK變化并比較?？崭钩槿§o脈血2 mL，乙二胺四乙酸二納抗凝，用直接免疫熒光標記染色法，采用美國BD公司流式細胞儀檢測NK和T淋巴細胞亞群。指標包括NK細胞、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、T細胞、Th細胞、Ts細胞、Th/Ts。2）觀察2組治療前、完成治療后炎性反應指標C反應蛋白（CRP）、TNF-α、CRP、IL-6、ESR、內毒素、IL-10變化并比較。空腹抽取靜脈血4 mL，離心5 min后以3 000 r/min離心10 min，分離血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測以上指標。3）觀察2組治療前、完成治療后凝血功能指標變化并比較，空腹抽取靜脈血采用貝爾曼庫爾特全自動AU680全自動生化分析儀檢測FIB、APTT、PLT。4）觀察2組治療前、完成治療后炎癥性腸病評價量表（IBDQ）變化并比較，觀察其生命質量情況。指標包括社會功能、情感功能、腸道癥狀、全身癥狀和總分，從32個方面進行評價，分數(shù)為32～224分，分數(shù)越高則生命質量越好。5）治療完成后進行結腸鏡檢查，取病變部位進行組織病理學觀察。采將組織用多聚甲醛固定液固定24 h后梯度乙醇脫水，固定常規(guī)石蠟包埋，4 μm連續(xù)切片，HE染色，顯微鏡下觀察[5-7]。

1.8?療效判定標準?顯效為臨床癥狀體征消失，大便次數(shù)<2次/d，結腸鏡檢查基本正常;有效為臨床表現(xiàn)有所好轉，大便次數(shù)2-4次/d，結腸鏡檢查有所改善;無效為未達到上述標準者[8]。

1.9?統(tǒng)計學方法?將本研究所得數(shù)據(jù)輸入SPSS 22.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計，計量資料用均數(shù)±標準差（±s）進行表示，本研究所有數(shù)據(jù)均符合正態(tài)分布，用t檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2?結果

2.1?2組患者T細胞及亞群、NK細胞指標比較?完成治療后2組NK細胞、CD4+、CD4+/CD8+較治療前均顯著升高，CD8+、T細胞、Th細胞、Ts細胞、Th/Ts較治療前均顯著下降（P<0.05），完成治療后觀察組NK細胞、CD4+、CD4+/CD8+均顯著高于對照組，余均顯著低于對照組（P<0.05）。見表2。

2.2?2組患者炎性反應指標比較?完成治療后2組TNF-α、CRP、IL-6、ESR、內毒素較治療前均顯著下降，IL-10較治療前顯著下降（P<0.05），完成治療后觀察組IL-10顯著高于對照組，余顯著低于對照組（P<0.05）。見表3。

2.3?2組患者生命質量指標比較?完成治療后2組社會功能、情感功能、腸道癥狀、全身癥狀和總分較治療前均顯著升高（P<0.05），完成治療后觀察組以上指標均顯著高于對照組（P<0.05）。見表4。

2.4?2組患者凝血功能指標比較?完成治療后2組FIB、PLT較治療前均顯著下降，APTT較治療前顯著升高（P<0.05），完成治療后觀察組APTT顯著高于對照組，余顯著低于對照組（P<0.05）。見表5。

2.5?2組患者療效比較?完成治療后觀察組顯效率、總有效率顯著高于對照組（P<0.05）。見表6。

2.6?2組患者病理組織學比較?圖1可見腸黏膜欠光滑，鏡下可見表面上皮連續(xù)，不規(guī)則，隱窩分支減少，杯狀細胞數(shù)量增多，固有膜內可見淋巴細胞、漿細胞局灶性浸潤。圖2可見結腸黏膜光滑，鏡下可見表面上皮完整規(guī)則且連續(xù)，隱窩長且平直，偶見分支，杯狀細胞數(shù)量較多，固有膜內可見少量淋巴細胞、漿細胞散在分布。

3?討論

現(xiàn)代中醫(yī)專家經過長期臨床實踐和經驗總結，認為UC發(fā)病關鍵是毒損腸絡[9]，其發(fā)病重點是虛、瘀、毒，臟腑虛損，陰陽失衡，以致濕熱、瘀血、積滯等邪氣膠結癰滯于腸絡，導致腸絡受損，氣血運行失常，致使營衛(wèi)運行不通，衛(wèi)氣不和則火毒內生，火毒極化則腸絡灼傷，如此形成惡性循環(huán)，癥狀反復發(fā)作，故在治療上以利濕解毒化濁、活血祛瘀。

翁連解毒湯由白頭翁湯、葛根芩連湯、四君子湯、痛瀉要方4個經典方劑化裁而成，從而達到化濁解毒、涼血止痢、健脾疏肝、祛邪外出功效。方中以白頭翁、黃連為君，白頭翁清熱解毒、涼血止痢;黃連清熱燥濕、厚腸止瀉，兩者配伍能清胃腸濕熱和血分熱毒。以大血藤、秦皮、地榆為臣藥，大血藤清熱解毒、活血[10];秦皮清熱燥濕、收澀止痢;地榆涼血止血、解毒斂瘡。余藥物為佐使藥，葛根、升麻升脾胃清陽止瀉;白芍、防風柔肝和脾，兼以止痛;茯苓、米仁、白術、陳皮行氣化痰、燥濕健脾止瀉，甘草調和諸藥。全方在化濁解毒同時能扶正固本，兼以調肝活血。現(xiàn)代藥理學認為，白頭翁、黃連能抗炎、抗氧化、抗病原微生物等作用，能殺滅多種腸道致病菌，具有廣譜抗菌作用，能影響人體細胞因子，體液免疫和氧自由基，能修復潰瘍[11]。葛根、黃芪能促使結腸平滑肌線粒體跨膜電位升高，能修復上皮細胞和線粒體結構，重構和修復結腸黏膜，恢復平滑肌功能[12]。白術、白芍、陳皮、防風等藥物能抑制炎性反應細胞聚集、黏附、減少炎性反應對腸黏膜損傷，同時促使免疫調節(jié)恢復正常，炎性反應控制，潰瘍得到愈合[13]。

IL-6是免疫調節(jié)細胞因子，在UC發(fā)病機制過程中能通過STAT3信號通路發(fā)揮重要作用，活動期UC患者IL-6水平明顯高于非活動期UC患者，且和病情嚴重程度正相關[14]。TNF-α是慢性非特異性炎癥性腸病病理進程中關鍵細胞因子，其能通過啟動細胞毒性、凋亡和急性期反應和表達凝血因子、黏附因子等發(fā)揮重要作用，其血清水平和UC臨床活動相關。CRP主要由活化巨噬細胞分泌急性時相反應蛋白，是機體炎性反應敏感指標，在自身免疫性疾病中其發(fā)揮重要角色[15]。

報道稱，UC患者腸黏膜微血栓形成，因缺血壞死，甚至會因腸黏膜潰瘍形成，加重UC患者結直腸黏膜病變，UC患者纖溶和凝血異常和疾病活動期相關[16]。FIB、APTT、PLT等均是炎性反應活動程度預測指標，其代表血液黏稠程度。結果顯示，治療前UC患者均處于血液高凝狀態(tài)，微循環(huán)障礙，微血栓形成[17]，而治療后FIB、PLT顯著下降，APTT顯著升高，這說明該方能改善血液循環(huán)，故提高療效。

結果顯示，NK細胞、Th細胞和T細胞亞群逐漸升高，這是因為NK細胞升高，則機體固有免疫功能提高，Ts細胞減少，Th細胞增加，則說明體液細胞免疫力提高。CD4+是輔助性T細胞表面標記物，能促進B細胞產生更多抗體，提高細胞因子分泌，調節(jié)細胞免疫活性[18]。CD8+是抑制性T細胞，能抑制細胞免疫和毒性，CD4+/CD8+是反映T細胞功能狀態(tài)重要指標，而T細胞及其亞群在維持抗炎因子和促炎性反應因子動態(tài)平衡中發(fā)揮重要作用，其能抑制腸上皮細胞、巨噬細胞分泌致炎因子，抑制單核細胞毒性[19]。

從組織病理學上看，采用翁連解毒湯治療后UC患者腸黏膜得到修復，這可能是該湯劑能抑制炎性反應，炎性反應細胞因子浸潤減輕，阻斷細胞損傷[20]，同時促進血液循環(huán)，抑制細胞合成釋放，同時增加機體免疫力，維持UC患者免疫系統(tǒng)內環(huán)境穩(wěn)定，故臨床癥狀顯著改善，患者生命質量得到提升。

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（2019-04-26收稿?責任編輯：蒼寧）