李永貴，王菲菲，崔燕，馬麗霞，紀青，陳峰，尹弢1,△，王晶△

(1.山東省藥學科學院 山東省化學藥物重點實驗室，濟南 250101；2.山東省藥學科學院 山東省醫(yī)用高分子材料重點實驗室，濟南 250101；3.中國大冢制藥有限公司，天津 300382；4.華潤山東醫(yī)藥有限公司，濟南 250118)

1 引 言

目前，臨床上使用的一次性使用輸液器通常由含有增塑劑的聚氯乙烯(PVC)材料制成，其增塑劑的用量通常占總重量的20%～40%[1-2]。由于增塑劑不與PVC材料化學結(jié)合，因此在臨床使用時容易遷移至藥液中，隨著藥物進入人體，產(chǎn)生危害[3-6]。因此，檢測增塑劑的溶出量，對臨床滴注不同藥物時選擇合適材質(zhì)的一次性使用輸液器具有重要意義。

一次性使用PVC輸液器常用的增塑劑是鄰苯二甲酸二乙基乙酯(DEHP)和偏苯三酸三辛酯(TOTM)。研究表明，DEHP及其代謝產(chǎn)物可對哺乳動物的生殖系統(tǒng)產(chǎn)生很大的危害，并且具有慢性毒性，在人體內(nèi)長期積累對中樞神經(jīng)以及肝臟組織均有影響。TOTM是目前較新的可以代替DEHP的增塑劑，很多文獻報道TOTM具有潛在毒性低、難遷移等特性，但TOTM具有與DEHP類似的酯鏈，該酯鏈的降解產(chǎn)物是造成胚胎毒性的主要因素[7-9]，因此，TOTM也對人體有潛在的危害。

本研究選用了臨床常用的氯化鈉注射液、單硝酸異山梨酯注射液和紫杉醇注射液以及乙醇水溶液四種不同的藥液模擬臨床使用，檢測DEHP與TOTM在不同藥液中的溶出量，評價使用兩種增塑劑增塑的PVC輸液器的安全性[10-11]。

2 儀器與試藥

島津高效液相色譜儀，LC-20AT泵，SPD-M20A檢測器，日本島津公司； 電子天平，BT125D型，德國Sartorius公司；TOTM 對照品，純度99.0%，ALDRICH；DEHP對照品，純度99.6%，Ehrenstorfer GmbH；乙腈，色譜純，山東禹王實業(yè)有限公司化工分公司；無水乙醇，色譜純，天津賽孚瑞科技有限公司；氯化鈉注射液，500 mL，山東省威高藥業(yè)股份有限公司；單硝酸異山梨酯注射液，5 mL：20 mg，魯南貝特制藥有限公司；紫杉醇注射液，10 mL：60 mg，辰欣藥業(yè)股份有限公司。

輸液器為含有DEHP或TOTM的一次性使用PVC輸液器。

3 方法與結(jié)果

3.1 藥液配制方案

氯化鈉注射液供試品溶液：取氯化鈉注射液各500 mL，分別與DEHP、TOTM增塑的一次性使用輸液器連接，調(diào)節(jié)滴速，使藥液在8 h內(nèi)滴完，將流出的藥液收集于量瓶中，分別在1、2、4、6、8 h取樣。

乙醇水溶液供試品溶液：取乙醇水溶液(乙醇：水為45:55)500 mL，分別與DEHP、TOTM增塑的一次性使用輸液器連接，調(diào)節(jié)滴速，使藥液在8 h內(nèi)滴完，將流出的溶液收集于量瓶中，分別于1、2、4、6、8 h取樣。

單硝酸異山梨酯注射液供試品溶液：參照藥物說明書取單硝酸異山梨酯注射液3支，加 5%葡萄糖注射液至300 mL，混勻。分別與DEHP、TOTM增塑的一次性使用輸液器連接，調(diào)節(jié)滴速，使藥液在5 h內(nèi)滴完，將流出的藥液收集于量瓶中，分別于1、2、3、4、5 h取樣。

紫杉醇注射液供試品溶液:參照藥物說明書取紫杉醇注射液5支，加 0.9%氯化鈉注射液至250 mL，混勻。分別與DEHP、TOTM增塑的一次性使用輸液器連接，調(diào)節(jié)滴速，使藥液在3 h內(nèi)滴完，將流出的藥液收集于量瓶中，分別于0.5、1、2、3 h取樣。

3.2 方法學驗證

3.2.1檢測條件 采用Kromasil C18，4.6×250 mm色譜柱，流動相為乙腈，流速為1.0 mL/min，檢測波長為232 nm，柱溫為35℃，進樣體積是20 μL。

3.2.2溶液制備 配樣溶劑：乙腈。

對照品儲備液：精密稱取DEHP、TOTM對照品各約25 mg，置50 mL量瓶中，加適量乙腈使之完全溶解，用乙腈稀釋至刻度，搖勻。精密量取1 mL置50 mL量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，搖勻。

混合對照品溶液：精密量取對照品儲備液1 mL，置10 mL量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，搖勻。

供試品溶液：分別取經(jīng)過輸液器的藥液各5 mL，置10 mL量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，搖勻。

3.2.3專屬性試驗 精密量取3.2.2項下混合對照品溶液、配樣溶劑20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖及峰面積，見圖1。結(jié)果表明，在本檢測條件下，DEHP與TOTM分離良好，配樣溶劑無干擾。

圖1 對照品溶液HPLC圖譜

3.2.4定量限與檢測限 精密量取3.2.2項下混合對照品溶液，加配樣溶劑稀釋，制成不同濃度梯度的溶液，取20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。計算DEHP、TOTM定量限分別為0.40、1.18 ng，檢測限分別為0.14、0.39 ng。

3.2.5線性試驗 精密量取3.2.2項下對照品儲備液，分別配制 DEHP 及 TOTM 的系列對照品溶液，按照3.2.1 項下色譜條件檢測，得到DEHP與TOTM的線性關系、相關系數(shù)及線性范圍，結(jié)果見表1。

表1 DEHP、TOTM線性關系測定結(jié)果

3.2.6精密度試驗 精密量取3.2.2項下混合對照品溶液20 μL注入液相色譜儀，連續(xù)測定6次，記錄色譜圖。計算DEHP、TOTM峰面積RSD%分別為0.27%、0.54%。

3.2.7回收率試驗 精密稱取DEHP、TOTM對照品適量，置10 mL量瓶中，分別加入3.1項下藥液5 mL，用乙腈稀釋至刻度，搖勻，配制成與混合對照品溶液中DEHP、TOTM濃度相同的溶液，平行配制6份。依次配制DEHP、TOTM在氯化鈉注射液、單硝酸異山梨酯注射液、紫杉醇注射液及乙醇水溶液中的回收率樣品，按照3.2.1項下檢測方法測定，計算平均回收率及RSD%，結(jié)果見表2。

表2 DEHP、TOTM回收率試驗結(jié)果

3.3 結(jié)果

按照3.1項下的藥液配制方案，分別收集流經(jīng)兩種輸液器的氯化鈉注射液、單硝酸異山梨酯注射液、紫杉醇注射液及乙醇水溶液5 mL，置10 mL量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，搖勻。分別取20 μL依次檢測，記錄色譜圖及峰面積，按外標法計算不同取樣點DEHP與TOTM的濃度及溶出總量，測定結(jié)果見表3。

表3 DEHP、TOTM溶出量試驗結(jié)果

4 討論

本研究通過高效液相色譜法對比研究DEHP和TOTM在不同藥液中的溶出量，選取了氯化鈉注射液、單硝酸異山梨酯注射液、紫杉醇注射液及乙醇水溶液[12]，分別用DEHP與TOTM增塑的PVC輸液器滴注，檢測藥液中增塑劑的溶出量。結(jié)果表明，在氯化鈉注射液與單硝酸異山梨酯注射液中均未檢出DEHP與TOTM；在紫杉醇注射液中僅檢出DEHP，且其溶出量高于成人每日可容忍攝入量2.8 mg/d(按照成人體重70 kg計算)；在乙醇水溶液中DEHP與TOTM均有檢出，其中DEHP溶出量高于成人每日可容忍攝入量2.8 mg/d(按照成人體重70 kg計算)，TOTM溶出量低于成人每日可容忍攝入量70 mg/d(按照成人體重70 kg計算)[13-15]。說明了DEHP、TOTM在不同藥物中的溶出結(jié)果差別較大。本研究通過對比研究滴注不同藥物時增塑劑的溶出量，可為臨床選擇合適材質(zhì)的一次性使用輸液器提供幫助，具有一定指導意義。