丁硫克百威和阿維菌素對柑橘大實蠅成蟲運動行為的亞致死效應

楊 璇，石永芳，何章章，劉文茹，王 玲，張國輝，桂連友

(湖北省農(nóng)林病蟲害預警與調控工程技術研究中心，長江大學農(nóng)學院，湖北荊州 434025)

柑橘大實蠅Bactroceraminax(Enderlein)，隸屬于雙翅目Diptera實蠅科Tephritidae，是一種為害柑橘類果實的毀滅性檢疫性害蟲(陳世驤和謝蘊貞，1995；梁鵬，2018)。目前，有效防治柑橘大實蠅的策略主要包括農(nóng)業(yè)防治(冬季翻耕土壤、收集落果)、生物防治(引誘劑和誘蠅球誘集)和化學防治(噴施殺蟲劑)等(汪興鑒和羅祿怡，1995；Dorjietal.，2006；Xiaetal.，2018)。

昆蟲長期暴露在自然環(huán)境中，會攝入亞致死劑量的殺蟲劑。研究表明，亞致死劑量的殺蟲劑不僅影響昆蟲的生長、發(fā)育及壽命，而且影響昆蟲的擴散行為、產(chǎn)卵、取食、尋找配偶及交配等行為(李曼等，2018；何發(fā)林等，2019；Kipchogeetal., 2020; Solmazetal., 2020)。如短舌熊蜂Bombusterrestris接觸噻蟲嗪(thiamethoxam)后會導致其飛行能力及對植株的選擇能力的改變(Stanleyetal.，2016)，而吡蟲啉(imidacloprid)則損害短舌熊蜂的定向能力和飛行能力(Henryetal.，2015；Juhoetal.，2018)。

丁硫克百威(carbosulfan)和阿維菌素(abamectin)是柑橘園中防治柑橘大實蠅的常用殺蟲劑(石永芳等，2018，2019)。前者屬于氨基甲酸酯類殺蟲劑，可引起試蟲興奮、痙攣、昏迷甚至死亡中毒癥狀(馬志卿，2002)。崔新倩等(2012)報道家蠶Bombyxmori取食添加阿維菌素的食物后出現(xiàn)吐液、頭部或尾部翹起、拒食等癥狀。后者屬于大環(huán)內酯抗生素類殺蟲劑，可使靶標昆蟲表現(xiàn)出行動遲緩、麻痹、繼而死亡的中毒癥狀(馬志卿，2002)。研究表明，亞致死劑量的阿維菌素對側雜食跗線螨Polyphagotarsonemuslatus(Banks)存在顯著的驅避作用(Bredaetal., 2017)，還可顯著降低巴氏新小綏螨Neoseiulusbarkeri(Hughes)日均捕食量(汝陽，2016)。此外，石永芳等(2019)研究認為丁硫克百威和阿維菌素對柑橘大實蠅成蟲有明顯的驅避作用。然而，目前有關以上兩種殺蟲劑對柑橘大實蠅成蟲運動行為的亞致死效應研究尚未見報道。為此，本文比較研究了亞致死濃度丁硫克百威和阿維菌素處理后不同時間段內柑橘大實蠅成蟲起飛率、水平爬行距離和垂直爬行距離的差異，旨在評價丁硫克百威和阿維菌素對該害蟲的成蟲運動行為的亞致死效應，以期為田間有效防治柑橘大實蠅害蟲提供科學參考。

1材料與方法

1.1 材料

1.1.1供試昆蟲

柑橘大實蠅幼蟲于2018年10月采自湖北省松滋市陳店鎮(zhèn)(30°18′N, 111°77′E)失管的柑橘園，并置于長江大學昆蟲生態(tài)學實驗室內飼養(yǎng)。待其化蛹后，分期分批收集蛹轉移到盛有河沙(厚度5～7 cm)的塑料盆內(直徑17 cm，高11 cm)，保持土壤濕度20%左右。收集羽化后的成蟲置于養(yǎng)蟲籠(長、寬及高均為35 cm)中，飼以酵母菌浸粉、蔗糖和蒸餾水(質量比1 ∶3 ∶30)混勻的營養(yǎng)液。選取羽化后5日齡的成蟲用于實驗(杜田華，2018)。

1.1.2供試藥劑和試劑

丁硫克百威(有效成分96.5%，江蘇常隆化工有限公司)、阿維菌素(有效成分95.4%，山東濰坊潤豐化工股份有限公司)、丙酮(分析純，天津市天力化學試劑有限公司)，吐溫80(化學純，上海滬試實驗室器材股份有限公司)和考馬斯亮藍(上海染料研究所有限公司)。

1.2 實驗方法

1.2.1藥劑濃度和測試前處理

基于本實驗室前期室內毒力測定的結果(石永芳等，2019)配制藥液，具體操作步驟如下：先將稱量后的96.5%丁硫克百威原藥和95.4%阿維菌素原藥用1～2 mL丙酮和吐溫80完全溶解后，再加入一定量的蔗糖和1%考馬斯亮藍染液，最后用蒸餾水稀釋至對應濃度，即丁硫克百威：0.00(LC0，CK)、8.42(LC5)、15.66(LC10)、44.18(LC25)、139.84 mg/L(LC50)，阿維菌素：0.00(LC0，CK)0.88(LC5)、2.04(LC10)、8.20(LC25)、38.40 mg/L(LC50)，并確保各濃度藥劑中蔗糖和考馬斯亮藍含量分別為10%、0.5%。

將不同濃度待測藥液浸漬30 s后的濾紙片(2 cm×2 cm)置于培養(yǎng)皿(直徑9 cm、高1.8 cm)中，再將饑餓24 h后的柑橘大實蠅成蟲(6日齡)放于濾紙片邊緣，待其取食20 s后，最后置于溫度25±1℃、相對濕度65%±5%、光周期14 h ∶10 h(L ∶D)的智能人工氣候箱(RXZ 型，多段編程，寧波江南儀器廠)中。

1.2.2柑橘大實蠅成蟲運動行為測定

試驗在長江大學昆蟲生態(tài)學實驗室(溫度25±2℃，相對濕度65%±5%，自然光照)進行。測試時間為9 ∶00-17 ∶00。

1.2.2.1 起飛率測定

參照黃秀琴等(2012)的方法，并做部分修改，即亞致死濃度藥劑處理后1 h，開始測定柑橘大實蠅成蟲起飛情況。每次實驗隨機取1頭成蟲，置于塑料紗網(wǎng)(孔徑1 mm)籠罩的養(yǎng)蟲籠(長0.65 m、寬0.45 m、高1.35 m)底部中央的起飛平臺(長2 cm，寬2 cm，高65 cm)上，觀察時間為3 min。假如某只成蟲降落點的位置離地面的高度≥ 65 cm，則判定其為起飛成蟲，反之則視為未起飛成蟲。此外，假如3 min內成蟲不起飛，則用毛筆尖輕輕挑撥鼓勵，若此后1 min內仍不起飛，則亦被判定為未起飛成蟲。記錄每次起飛的和未起飛的成蟲數(shù)。實驗設置2個因子：成蟲性別(雌蟲、雄蟲)和阿維菌素和丁硫克百威藥劑濃度(CK、LC5、LC10、LC25和LC50)。阿維菌素和丁硫克百威各有10個處理，每個處理每次測試1頭，重復30次，共測試30頭成蟲。試蟲不重復使用。起飛率(%)=起飛蟲數(shù)×100/(起飛蟲數(shù)+未起飛蟲數(shù))。

1.2.2.2 水平爬行距離測定

參照梁鵬(2019)的測定方法，具體操作步驟如下：在1個培養(yǎng)皿(直徑10 cm、高1.8 cm)下方貼與其尺寸相同且標有最小刻度為1 mm的一張坐標紙，再隨機取1頭成蟲置于培養(yǎng)皿中心點上，并用SONY PXW-FS7錄像觀察10 s，最后通過視頻分析(AutoCAD，Autodesk)，計算其水平爬行距離。實驗設置3個因子：成蟲性別(雌蟲、雄蟲)、阿維菌素和丁硫克百威藥劑濃度(CK、LC5、LC10、LC25和LC50)和觀察時間(藥劑處理后1 h和6 h)。阿維菌素和丁硫克百威共有20個處理。每個處理每次測試1頭，重復10次，共測試10頭成蟲。

1.2.3垂直爬行距離測定

自制的垂直爬行能力測定裝置由空心透明的有機玻璃材質的爬行柱(高90 cm、直徑4 cm、厚度0.5 mm)和旁邊垂直放置的木質直尺(長1 m、最小刻度1 mm)組成。參照梁鵬(2019)的測定方法，即每次實驗隨機取1頭成蟲置于爬行柱底部中心點，待其開始爬行時觀察，并記錄該成蟲爬行30 s后的垂直距離。同一個爬行柱測試5頭成蟲后，一是用70%酒精棉球擦拭其內壁，待酒精完全揮發(fā)后再使用；二是更換新的爬行柱，以避免柑橘大實蠅成蟲遺留的信息素或其它外源物質對其它昆蟲的爬行行為產(chǎn)生影響。實驗設置三個因子：成蟲性別(雌蟲、雄蟲)、阿維菌素和丁硫克百威藥劑濃度(CK、LC5、LC10、LC25和LC50)和觀察時間(藥后1 h、6 h)。阿維菌素和丁硫克百威共有20個處理。每個處理每次測試1頭，重復30次，共測試30頭成蟲。

1.3 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)均采用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)軟件(DPS 14.4高級版)進行分析。在柑橘大實蠅成蟲起飛率測定實驗中，先將起飛率和未起飛率進行反正旋平方根轉換，最后采用卡方檢驗(G-檢驗)比較其差異顯著性。柑橘大實蠅成蟲水平或垂直爬行距離之間的差異比較，均采用單因子方差分析(ANOVA)，而其平均值差異則采用Tukey法多重比較。

由于實驗過程中，亞致死濃度的LC25、LC50丁硫克百威處理后的柑橘大實蠅成蟲幾乎不運動，因此其起飛率試驗數(shù)據(jù)沒有進行統(tǒng)計分析。

2 結果和分析

2.1 殺蟲劑對柑橘大實蠅成蟲起飛影響

藥劑處理后1 h，LC10阿維菌素處理組柑橘大實蠅雌、雄成蟲起飛率存在顯著性差異(P<0.05)，而其它濃度阿維菌素處理及丁硫克百威所有處理成蟲起飛率均無性別差異(P>0.05)(表1)。

表1 殺蟲劑對柑橘大實蠅成蟲的起飛率影響

LC5和LC10丁硫克百威處理后1 h的柑橘大實蠅雌成蟲起飛率比空白對照組(CK)分別顯著降低了66.7%和50.0%，而雄成蟲起飛率依次顯著降低了43.3%和40.0%(P<0.05)。但LC5和LC10丁硫克百威處理后1 h的雌成蟲與雄成蟲起飛率的差異均不明顯(P>0.05)(表2)。

LC5、LC10、LC25和LC50阿維菌素處理后1 h的雌成蟲起飛率比CK分別顯著降低了33.3%、23.3%、23.3%和73.3%，而雄成蟲起飛率分別顯著降低了33.3%、53.3%、46.7%和73.7%(P<0.05)。LC5、LC10和LC25阿維菌素處理后1 h的雌成蟲起飛率以及LC5和LC25阿維菌素處理后1 h的雄成蟲起飛率均顯著高于LC50處理組(P<0.05)，而除此之外的所有濃度阿維菌素處理組藥后1 h的成蟲起飛率之間的差異均不明顯(P>0.05)(表3和表4)。

表2 丁硫克百威不同亞致死濃度處理對柑橘大實蠅成蟲起飛率的影響

表3 阿維菌素不同亞致死濃度處理對柑橘大實蠅雌成蟲起飛率的影響

表4 阿維菌素不同亞致死濃度處理對柑橘大實蠅雄成蟲起飛率的影響

2.2 殺蟲劑對柑橘大實蠅成蟲水平爬行距離的影響

除LC5(F1,18=8.40，P< 0.05)、LC10(F1,18=13.90，P< 0.05)丁硫克百威處理后1 h以及在LC5(F1,18=12.91，P< 0.05)丁硫克百威分別處理后6 h的柑橘大實蠅雌成蟲、雄成蟲水平爬行距離均存在顯著差異外，其余濃度[CK(1 h：F1,18=0.87，P>0.05；6 h：F1,18=0.77，P>0.05)、LC10(6 h：F1,18=0.41，P>0.05)]丁硫克百威處理后1 h或6 h的差異均不明顯(圖1-A)。

丁硫克百威處理后1 h和6 h的雌成蟲水平爬行距離僅在，LC10濃度處理(F1,18=8.58，P< 0.05)存在顯著差異，而其余濃度[CK(♀：F1,18=3.70，P>0.05；♂：F1,18=2.96，P>0.05)、LC5(♀：F1,18=0.21，P>0.05；F1,18=0.40，P>0.05)和LC10(♂：F1,18=2.59，P>0.05)]丁硫克百威處理的雌、雄成蟲水平爬行距離差異均不明顯(圖1-B)。

若不分成蟲性別和處理時間，CK組、LC5丁硫克百威處理組和LC10丁硫克百威處理組之間的成蟲水平爬行距離存在顯著差異(F2,108=4.02，P<0.05)；其中，除了LC10丁硫克百威處理組比CK組明顯增加24.7%外，其它濃度丁硫克百威處理組間的成蟲水平爬行距離差異均不明顯。藥劑處理后1 h，LC5和LC10丁硫克百威處理組分別與CK組的雌、雄成蟲水平爬行距離均存在顯著差異(♀：F2,27=13.84，P<0.05；♂：F2,27=5.20，P<0.05)(圖1-C)；其中，除了與CK組相比，LC5丁硫克百威處理的雄成蟲水平爬行距離以及LC10丁硫克百威處理的雌、雄成蟲的水平爬行距離分別增加80.3%、71.8%和16.1%外，在其它濃度丁硫克百威處理的雌成蟲、雄成蟲水平爬行距離差異均不明顯。藥劑處理后6 h所有處理組的雌成蟲、雄成蟲水平爬行距離差異均不明顯(♀：F2,27=3.00，P> 0.05；♂：F2,27=0.38，P> 0.05)(圖1-C)。

圖1 丁硫克百威不同亞致死濃度處理對柑橘大實蠅成蟲水平爬行距離的影響Fig.1 Effects of carbosulfan at different sublethal concentrations on the horizontal crawling distance of Bactrocera minax adults注：A，性別；B，處理后時間；C，濃度。不同小寫字母者表示處理間差異顯著(P <0.05)。下同。Note: A, B and C indicate sex, time after treatment and sublethal concentration.Different lower-case letters indicate significant differences among different treatments (P<0.05). The same as below.

除LC5(F1,18=5.96，P< 0.05)阿維菌素處理后1 h以及LC25(F1,18=10.111，P< 0.05)、LC50(F1,18=5.35，P< 0.05)阿維菌素分別處理后6 h的柑橘大實蠅雌成蟲、雄成蟲水平爬行距離均存在顯著差異外，其它濃度[CK(1 h：F1,18=0.87，P>0.05；6 h：F1,18=0.09，P>0.05)、LC5(6 h：F1,18=0.58，P>0.05)、LC10(1 h：F1,18=0.00，P>0.05；6 h：F1,18=0.01，P>0.05)、LC25(1 h：F1,18=0.00，P>0.05)、LC50(1 h：F1,18=1.74，P>0.05)]阿維菌素處理后1 h或6 h的的差異均不明顯(圖2-A)。

阿維菌素處理后1 h和 6 h的雌蟲水平爬行距離僅在LC25濃度處理(F1,18=9.092，P< 0.05)存在顯著差異，而其它濃度[CK(♀：F1,18=3.70，P>0.05；♂：F1,18=2.96，P>0.05)、LC5(♀：F1,18=3.02，P>0.05；♂：F1,18=0.01，P>0.05)、LC10(♀：F1,18=1.11，P>0.05；♂：F1,18=0.10，P>0.05)、LC25(♀：F1,18=0.55，P>0.05)、LC50(♀：F1,18=3.83，P>0.05；♂：F1,18=4.31，P>0.05)]阿維菌素處理的雌、雄成蟲水平爬行距離差異均不明顯(圖2-B)。

若不分成蟲性別和處理時間，CK、LC5、LC10、LC25、LC50阿維菌素處理組之間的成蟲水平爬行距離存在顯著差異(F4,180=27.79，P<0.05)(圖2-C)。其中，除了在LC5、LC25和LC50阿維菌素處理組分別與CK之間、在LC5和LC50阿維菌素處理組之間、以及在LC10分別與LC25、LC50阿維菌素處理組之間成蟲水平爬行距離均存在顯著差異外，其它濃度阿維菌素處理間的成蟲水平爬行距離差異均不明顯；與CK組相比，LC5、LC25、LC50阿維菌素處理組的成蟲水平爬行距離分別明顯降低24.2%、38.0%和71.3%。

藥劑處理后1 h，CK、LC5、LC10、LC25、LC50阿維菌素處理組之間的雌、雄蟲水平爬行距離均存在顯著差異(♀：F4,45=11.90，P<0.05；♂：F4,45=6.12，P<0.05)(圖2-C)。其中，除了在CK、LC5、LC10、LC25阿維菌素處理分別與LC50阿維菌素處理之間的雌成蟲、以及在CK、LC10、LC25阿維菌素處理分別與LC50阿維菌素處理之間的雄成蟲水平爬行距離均存在顯著差異外，其它濃度阿維菌素處理之間的雌、雄成蟲水平爬行距離差異均不明顯；與CK組相比，LC50阿維菌素處理的雌、雄蟲的水平爬行距離分別明顯降低78.3%和61.9%。藥劑處理后6 h，CK、LC5、LC10、LC25、LC50阿維菌素處理之間雌、雄成蟲的水平爬行距離均存在顯著差異(♀：F4,45=14.57，P<0.05；♂：F4,45=7.05，P<0.05)(圖2-C)；其中，除了在LC5、LC25、LC50阿維菌素處理分別與CK之間和在LC5、LC10阿維菌素處理分別與LC25阿維菌素處理之間相比的雌成蟲、以及在CK、LC10、LC25阿維菌素處理分別與LC50阿維菌素處理之間相比的雄成蟲的水平爬行距離均存在顯著差異外，在其余濃度阿維菌素處理之間的成蟲水平爬行距離差異均不明顯；與CK相比，LC5、LC25和LC50阿維菌素處理的雌成蟲、以及LC50阿維菌素處理的雄成蟲的水平爬行距離分別明顯降低35.8%、78.8%、57.9%和86.4%。

圖2 阿維菌素不同亞致死濃度處理對柑橘大實蠅成蟲水平爬行距離的影響Fig.2 Effects of abamectin at different sublethal concentrations on the horizontal crawling distance of Bactrocera minax adults

2.3 殺蟲劑對柑橘大實蠅成蟲垂直爬行距離的影響

對比雌、雄成蟲垂直爬行距離，結果表明：僅CK處理后6 h存在顯著的性別差異(F1, 58=4.27，P< 0.05)，而該處理后1 h(1 h：F1, 58=1.98，P>0.05)以及LC5(1 h：F1, 58=1.73，P>0.05；6 h：F1, 58=0.31，P>0.05)、LC10(1 h：F1, 58=0.38，P>0.05；6 h：F1, 58=0.04，P>0.05)丁硫克百威處理后不同時間點均無明顯的性別差異(圖3-A)。對比藥劑處理后不同時間點的成蟲垂直爬行距離，可得知：CK(F1, 58=22.93，P< 0.05)和LC10丁硫克百威處理組(F1, 58=10.60，P< 0.05)的雌成蟲以及LC10丁硫克百威處理組(F1, 58=5.57，P< 0.05)的雄成蟲均具有顯著的時間效應，其它處理組間[CK(♀：F1, 58=0.29，P>0.05)、LC5(♀：F1, 58=1.13，P>0.05；♂：F1, 58=0.22，P>0.05)]均無明顯的時間差異(圖3-B)。

若不分成蟲性別和處理時間，CK、LC5丁硫克百威處理組和LC10丁硫克百威處理組之間的垂直爬行距離存在顯著差異(F2,348=10.18，P<0.05)(圖3-C)，且LC5丁硫克百威處理組比CK組降低34.6%，其它濃度處理組間差異均不明顯。

藥劑處理后1 h，CK、LC5、LC10丁硫克百威處理組之間雌、雄成蟲的垂直爬行距離均存在顯著差異(♀：F2,87=16.48，P<0.05；♂：F2,87=3.23，P<0.05)(圖3-C)，且LC5和LC10丁硫克百威處理組的雌成蟲、雌成蟲垂直爬行距離比CK分別明顯降低64.1%、44.6%、35.7%和25.3%，其它濃度處理組間差異不明顯。藥劑處理后6 h，LC5、LC10丁硫克百威處理組與CK的雌成蟲的垂直爬行距離存在顯著差異(F2,87=8.80，P<0.05)，且LC10丁硫克百威處理組比CK增加105.9%，上述處理組的雄成蟲差異均不明顯(F2,87=2.08，P> 0.05)(圖3-C)。

圖3 丁硫克百威不同亞致死濃度處理對柑橘大實蠅成蟲垂直爬行距離的影響Fig.3 Effects of carbosulfan at different sublethal concentrations on the vertical crawling distance of Bactrocera minax adults

對比雌成蟲、雄成蟲垂直爬行距離，結果表明：除了藥劑處理后1 h的LC50阿維菌素處理組(F1,58=9.33，P< 0.05)以及藥劑處理后6 h的CK(F1,58=4.27，P< 0.05)均存在顯著差異外，CK處理后1h(1 h：F1,58=1.98，P>0.05)以及LC5(1 h：F1,58=0.01，P>0.05；6 h：F1,58=2.33，P>0.05)、LC10(1 h：F1,58=3.48，P>0.05；6 h：F1,58=1.76，P>0.05)、LC25(1 h：F1,58=1.17，P>0.05；6 h：F1,58=0.00，P>0.05)、LC50(6 h：F1,58=0.83，P>0.05)阿維菌素處理后不同時間點均無明顯性別差異(圖4-A)。

對比藥劑處理后不同時間點的成蟲垂直爬行距離，可得知：CK(F1,58=22.93，P< 0.05)以及LC5(F1,58=30.10，P< 0.05)、LC10(F1,58=18.19，P< 0.05)、LC50阿維菌素處理組(F1,58=17.58，P< 0.05)的雌成蟲和LC5(F1,58=9.62，P< 0.05)、LC10(F1,58=16.74，P< 0.05)、LC50阿維菌素處理組(F1,58=14.43，P< 0.05)的雄成蟲均具有顯著時間效應外，其它處理組間[CK(♂：F1,58=0.30，P>0.05)、LC25(♀：F1,58=1.17，P>0.05；♂：F1,58=0.76，P>0.05)]均無明顯的時間效應(圖4-B)。

若不分成蟲性別和處理時間，CK、LC5、LC10、LC25、LC50阿維菌素處理組之間的垂直爬行距離存在顯著差異(F4,580=70.38，P<0.05)(圖4-C)；其中，除了在LC10、LC25和LC50阿維菌素處理組分別與CK之間、在LC5、LC10阿維菌素處理組分別與LC25、LC50阿維菌素處理組之間成蟲垂直爬行距離均存在顯著差異外，其它濃度阿維菌素處理組間差異均不明顯；且LC10、LC25、LC50阿維菌素處理組的成蟲垂直爬行距離比CK分別明顯降低25.2%、84.4%和78.5%。藥劑處理后1 h，CK、LC5、LC10、LC25、LC50阿維菌素處理組之間雌、雄成蟲的垂直爬行距離均存在顯著差異(♀：F4,145=17.90，P<0.05；♂：F4,145=31.33，P<0.05)(圖4-C)；其中，除了在LC25、LC50阿維菌素處理組分別與CK、LC5、LC10阿維菌素處理組之間的雌成蟲、雄成蟲的垂直爬行距離均存在顯著差異外，其它濃度處理組間差異均不明顯；且LC25和LC50阿維菌素處理組比CK的雌成蟲、雄成蟲的垂直爬行距離分別顯著降低了83.5%、53.9%、82.9% 和82.1%。藥劑處理后6 h，CK、LC5、LC10、LC25、LC50阿維菌素處理組之間雌、雄成蟲的垂直爬行距離存在顯著差異(♀：F4,145=13.55，P<0.05；♂：F4,145=16.85，P<0.05)(圖4-C)；除了在LC25、LC50阿維菌素處理組分別與CK、LC5、LC10阿維菌素處理組之間的雌成蟲、以及在CK分別與LC10、LC25、LC50阿維菌素處理組之間、在LC5分別與LC25、LC50阿維菌素處理組之間、在LC10與LC50阿維菌素處理組之間的雄成蟲垂直爬行距離均存在顯著差異外，其它濃度處理組間差異不明顯；且LC25、LC50阿維菌素處理組雌成蟲及LC10、LC25、LC50阿維菌素處理組雄成蟲的垂直爬行距離比CK分別顯著降低了82.2%、92.6%、58.3%、88.6%和98.8%(圖4-C)。

圖4 阿維菌素不同亞致死濃度處理對柑橘大實蠅成蟲垂直爬行距離的影響Fig.4 Effects of abamectin at different sublethal concentrations on the vertical crawling distance of Bactrocera minax adults

3 結論與討論

本研究表明，亞致死濃度丁硫克百威(LC5、LC10)和阿維菌素(LC5、LC10、LC25)均會損害柑橘大實蠅成蟲的起飛能力，且存在濃度效應。Tosi等(2017)的研究結果表明，噻蟲嗪1.34 ng/(頭·d)喂食處理意大利蜜蜂Apismellifera后1 h，其處于興奮狀態(tài)，飛行時間和距離顯著增加；野外持續(xù)暴露1 d或2 d后，蜜蜂攝入噻蟲嗪的劑量為1.96～2.90 ng/(頭·d)，該蜜蜂的飛行時間、距離和速度皆顯著減少。Odemer等(2018)報道長期喂食亞致死劑量為15 g/kg 或15 ppb的噻蟲胺(clothianidin)對意大利蜜蜂的飛行活動無影響。Zheng等(2015)報道赤蘚糖醇(erythritol)、天冬甜素(aspartame)和糖精(saccharin)降低柑橘小實蠅Bactroceradorsalis的飛行頻率。以上結果表明，亞致死劑量殺蟲劑或甜味劑對大多數(shù)昆蟲的飛行行為存在負面影響，而新煙堿類殺蟲劑對意大利蜜蜂飛行行為的影響因藥劑種類和處理劑量而存在較大差異。

殺蟲劑或其它外源物質對昆蟲的爬行能力具有亞致死效應，且大多與劑量相關。本研究結果表明，丁硫克百威LC5處理未損害柑橘大實蠅成蟲的水平爬行能力(圖1)，卻損害其成蟲的垂直爬行能力(圖3)，而LC10處理刺激了成蟲水平爬行能力(圖1)。LC5、LC10、LC25阿維菌素均損害其成蟲的水平爬行能力和垂直爬行能力(圖2)，且這種損害或刺激與亞致死濃度相關。Zheng等(2015)認為赤蘚糖醇、天冬甜素和糖精會降低柑橘小實蠅的爬行能力。Kerns和Gaylor(1992)發(fā)現(xiàn)用LC10硫丙磷(sulprofos)處理的葉片飼養(yǎng)棉蚜AphisgossypiiGlover后，該害蟲明顯受到刺激而變得興奮，且活動能力明顯增加。王桂花等(2014)報道與未處理棉相比，取食轉Bt蛋白棉的1齡和3齡期棉鈴蟲在開始取食后2 d爬行能力顯著下降，而取食轉Bt蛋白棉的5齡棉鈴蟲在取食開始后1 d其爬行能力出現(xiàn)顯著上升趨勢。Bovi等(2018)指出吡蟲啉損害蜜蜂的爬行能力，而氟蟲腈(fipronil)對其無負面影響。

本研究結果表明，亞致死濃度丁硫克百威處理對柑橘大實蠅成蟲的水平爬行能力影響存在性別差異(圖1)。如LC5丁硫克百威處理后1 h的雌、雄蟲存在顯著差異。亞致死濃度阿維菌素處理對成蟲起飛能力和水平爬行能力的影響亦存在性別差異(表1和圖2)。如LC10阿維菌素處理后1 h的雌、雄成蟲起飛率存在顯著差異(表1)；而LC5阿維菌素處理后1 h的雌、雄蟲水平爬行距離均存在顯著差異(圖2)。石永芳等(2019)研究結果表明，丁硫克百威、吡蟲啉、毒死蜱(chlorpyrifos)、氟鈴脲(hexaflumron)、噻嗪酮(buprofezin)對柑橘大實蠅成蟲的選擇行為存在性別差異。宮慶濤(2012)研究發(fā)現(xiàn)噻嗪酮、毒死蜱、氟鈴脲和多殺菌素(spinosad)對柑橘大實蠅成蟲的觸角電位(electroantennogram，EAG)反應值也存在性別差異，而這種水平爬行能力的性別差異可能與雌、雄成蟲各自具備獨特的運動系統(tǒng)有關。

本研究還發(fā)現(xiàn)，亞致死濃度的丁硫克百威和阿維菌素處理對柑橘大實蠅成蟲的水平爬行能力和垂直爬行能力的影響與藥劑處理時間的長短有關(圖1-4)。如LC10丁硫克百威處理后1 h和6 h間的雌蟲水平爬行距離和垂直爬行距離均存在顯著差異(圖1和圖3)。而LC25阿維菌素處理后1 h和6 h間的雌蟲水平爬行距離以及LC10阿維菌素處理后1 h和6 h間的雌蟲垂直爬行距離均存在顯著差異(圖2和圖4)。

丁硫克百威和阿維菌素對昆蟲運動行為的亞致死效應可能與其作用機理有關。丁硫克百威通過抑制昆蟲乙酰膽堿酶的活性，從而造成昆蟲體內乙酰膽堿的積累，并影響正常的神經(jīng)傳導，最終達到殺蟲目的(張敬存和韓奎珍，2000)。阿維菌素通過干擾昆蟲的神經(jīng)生理活動，刺激其產(chǎn)生并釋放更多的抑制神經(jīng)傳導信號的γ-氨基丁酸(gamma-amino-butyricacid，GABA)，從而導致長時間的高強度神經(jīng)抑制效應，最終導致昆蟲麻痹甚至死亡(Macconnelletal.，1989；Bloomquistetal.，1993)。

研究表明，上述殺蟲劑對昆蟲的神經(jīng)系統(tǒng)具有抑制或刺激作用，可能影響其成蟲的嗅覺(Bredaetal.，2017；石永芳等，2019)或視覺(梁鵬等，2018)等感覺器官的敏感性，從而使其成蟲的水平、垂直爬行和飛行等運動行為失調(Boiteau, 2005；梁鵬, 2019)，最終導致成蟲的遷移、擴散、取食、產(chǎn)卵、交配和逃避天敵等行為受到干擾(Solmazetal., 2020)。

由于本研究僅于室內開展，但實際上室內與田間的環(huán)境條件差異較大；同時，昆蟲成蟲在田間的運動行為易受光、濕度、風力、天敵等外界自然因素的影響(張孝羲，2001)，勢必導致兩種生境條件下的柑橘大實蠅成蟲對不同亞致死濃度丁硫克百威和阿維菌素處理后出現(xiàn)的運動行為反應可能存在差異。因此，本研究結果仍有待結合田間情況進一步驗證。