陳丹明, 顧 鋼, 賴榮泉, 周 挺, 白晶晶, 陳志厚, 吳曉婷
(1.福建農(nóng)林大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院, 閩臺(tái)作物有害生物生態(tài)防控國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 福州 350002;2.中國(guó)煙草總公司福建省公司, 福州 350003; 3.福建省煙草公司南平市公司, 福建南平 353000)
煙蚜Myzuspersicae是烤煙上的主要害蟲之一,對(duì)煙葉的危害較大。而煙蚜繭蜂Aphidiusgifuensis是煙蚜的重要天敵之一(Laietal., 2011, 2017a, 2017b, 2019),煙葉生產(chǎn)上利用煙蚜繭蜂寄生煙蚜的自然特性來(lái)防治煙蚜正越來(lái)越普遍。早在20世紀(jì)90年代,關(guān)于煙蚜繭蜂的生物學(xué)特性及其推廣應(yīng)用就有報(bào)道(畢章寶和季正端, 1993; 季正端和畢章寶, 1995)。陳家驊等(1996)闡述了被煙蚜繭蜂寄生的不同齡期煙蚜發(fā)育不同。如今,隨著研究的深入,許多文章報(bào)道了關(guān)于煙蚜繭蜂寄生煙蚜研究。吳興富等(2003)研究發(fā)現(xiàn),煙蚜繭蜂比較喜歡寄生煙蚜2和3齡若蟲,而且煙蚜繭蜂寄生煙蚜后對(duì)煙蚜的產(chǎn)仔量和壽命均有較大影響。同時(shí),被寄生煙蚜的齡期大小對(duì)羽化出的寄生的煙蚜繭蜂的雌雄性比無(wú)關(guān)。伍紹龍等(2017)研究了煙蚜繭蜂對(duì)不同齡期煙蚜的寄生選擇及其子代發(fā)育影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)煙蚜齡期對(duì)子代煙蚜繭蜂的發(fā)育歷期、壽命和性比沒(méi)有影響。文靜等(2014)研究了煙蚜繭蜂對(duì)不同生物型煙蚜的寄生選擇,發(fā)現(xiàn)相比于綠色型煙蚜,煙蚜繭蜂更喜歡寄生紅色型煙蚜。
良好地控制PONV將減少患者的不適,提高患者的滿意度。近年來(lái),提出了多模式控制PONV的概念,包括了藥物及非藥物方法的聯(lián)合[50]。非止吐藥物的方法包括避免使用吸入性麻醉藥,而使用異丙酚進(jìn)行誘導(dǎo)及維持麻醉;縮短術(shù)后禁食時(shí)間、口服碳水化合物飲品均有良好效果;在麻醉時(shí)吸入高濃度的氧也可能減少PONV的發(fā)生率;區(qū)域神經(jīng)阻滯技術(shù)如硬膜外及腹橫肌平面阻滯技術(shù),可以有效地減少術(shù)后阿片類鎮(zhèn)痛藥的使用量。使用NSAIDs也是另一種減少阿片類鎮(zhèn)痛藥的方法。
長(zhǎng)期以來(lái),煙蚜的防治還是化學(xué)防治居多(李義強(qiáng)等, 2010; 何應(yīng)琴, 2017)。但使用煙蚜繭蜂防控?zé)熝良夹g(shù)在生產(chǎn)上可大大減少農(nóng)藥的使用,提高煙葉安全性(Weietal., 2005; Yangetal., 2009; 何曉冰等, 2018)。然而,目前相關(guān)的多數(shù)研究聚集在如何提高煙蚜繭蜂滯育時(shí)間和煙蚜繭蜂貨架期等(李玉艷, 2011; 李玉艷等, 2013),而對(duì)煙蚜繭蜂的研究多集中在不同溫度、不同濕度與光周期和光強(qiáng)對(duì)其的影響(余玲等, 2016)。近年來(lái),煙蚜繭蜂防治煙蚜在煙草行業(yè)應(yīng)用越來(lái)越廣,防治煙蚜技術(shù)日益成熟(周子方等, 2011)。但對(duì)煙蚜繭蜂防治煙蚜機(jī)理是主要影響煙蚜當(dāng)代還是后代及對(duì)煙蚜防控的具體關(guān)鍵時(shí)期,未見(jiàn)有明確報(bào)道。因此,本研究對(duì)煙蚜繭蜂寄生后煙蚜發(fā)育歷期、壽命、產(chǎn)仔量等生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖指標(biāo)進(jìn)行觀測(cè)和分析,探明煙蚜繭蜂對(duì)煙蚜的防控機(jī)理及防控的具體關(guān)鍵時(shí)期,以期為更深入研究煙蚜繭蜂防治煙蚜機(jī)理及煙蚜繭蜂在大田釋放提供科學(xué)參考。
煙草:烤煙K326 品種,由福建省煙草科學(xué)研究所南平分所提供。煙株置于具有紗窗等的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)培養(yǎng),以防其他昆蟲飛入。期間,不施用任何農(nóng)藥,且每隔2 d澆水一次,以保障煙草正常生長(zhǎng)且使煙株長(zhǎng)勢(shì)一致。當(dāng)每批煙株長(zhǎng)到6葉期時(shí),用于試驗(yàn)。
2.1.3 建立人工氣道 由于氣管下段極度狹窄,導(dǎo)致肺通氣極差,隨時(shí)可能因氣道梗阻引起窒息而危及生命。經(jīng)ICU、麻醉科會(huì)診征得患者家屬同意后,予經(jīng)口氣管插管,呼吸機(jī)輔助呼吸。為減輕患者痛苦,機(jī)械通氣期間給予嗎啡、地西泮和丙泊酚等藥物鎮(zhèn)靜治療。由于氣道狹窄,選擇氣管插管較細(xì),根據(jù)插管內(nèi)徑選擇適當(dāng)型號(hào)吸痰管,保證在清除呼吸道分泌物的同時(shí)不影響有效通氣。妥善固定氣管插管,采用膠布與繩帶雙固定方法,隨時(shí)觀察、記錄插管深度,謹(jǐn)防脫出,導(dǎo)致再插管困難。
2.1.1發(fā)育歷期:煙蚜繭蜂寄生煙蚜各齡若蚜后,煙蚜發(fā)育歷期有顯著的變化(圖1)。煙蚜1齡若蚜被煙蚜繭蜂寄生后,對(duì)1齡若蚜的歷期影響最大(F1,19=4.571,P=0.046),比未被寄生的對(duì)照縮短了0.65 d,縮短了33.00%;對(duì)3齡若蚜的歷期影響最小(F1,23=2.193,P=0.152),比對(duì)照縮短了0.16 d,縮短了12.00%;對(duì)其他齡期的歷期影響居中,處理組與對(duì)照組之間無(wú)顯著差異(P>0.05)(圖1:A)。2齡若蚜被寄生后,對(duì)4齡若蚜、成蚜的歷期影響最大(4齡若蚜:F1,23=152.276,P=0.000; 成蚜:F1,23=23.357,P=0.000),處理組4齡若蚜、成蚜的歷期比對(duì)照分別縮短了1.50 d和0.83 d,均減少了100.00%;對(duì)2齡若蚜的歷期影響最小(F1,25=0.076,P=0.785),比對(duì)照縮短了0.06 d,減少了7.00%;對(duì)3齡若蚜的歷期影響居中,處理組與對(duì)照組之間無(wú)顯著差異(P>0.05)(圖1: B)。3齡若蚜被寄生后,對(duì)4齡若蚜、成蚜的歷期影響最大(4齡若蚜:F1,23=139.080,P=0.000; 成蚜:F1,23=25.388,P=0.000),處理組4齡若蚜、成蚜的歷期比對(duì)照分別縮短了1.50 d和0.83 d,均縮短了100.00%;對(duì)3齡若蚜的歷期影響最小(F1,22=10.876,P=0.003),比對(duì)照縮短了0.44 d,縮短了29.00%(圖1: C)。此外,因?yàn)?齡若蚜、成蚜的歷期較短,被寄生24 h后,甚至12 h之后,就直接產(chǎn)仔了,無(wú)法統(tǒng)計(jì)其歷期。
1.2.3 合理增加每日攝入總熱量 甲狀腺功能亢進(jìn)會(huì)導(dǎo)致患者代謝加快,加速糖類、脂肪、蛋白質(zhì)的分解速度,因此,護(hù)理人員需根據(jù)理想體重值、血糖控制水平,合理調(diào)整患者熱卡值并適當(dāng)增加每日攝入總熱量。
煙蚜繭蜂:煙蚜繭蜂蟲源采自福建省南平市煙草公司邵武市煙蚜繭蜂繁殖基地,用飼養(yǎng)的煙蚜繁殖一代后,將新羽化的煙蚜繭蜂雌雄配對(duì),獲得已交配的雌蜂用于試驗(yàn)。
其他材料:智能人工氣候箱(MRC-250B-LED,寧波普朗特儀器有限公司生產(chǎn)),培養(yǎng)皿(直徑10 cm),養(yǎng)蟲籠(長(zhǎng)×寬×高=75 cm×45 cm×40 cm),漂浮育苗營(yíng)養(yǎng)液(福建省煙草科學(xué)研究所南平分所提供)等。
術(shù)后1周內(nèi)患者均進(jìn)行CT及X線檢查,依據(jù)術(shù)后CT平掃資料,應(yīng)用Mobbs-Raley簡(jiǎn)易分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)[11]評(píng)價(jià)椎弓根螺釘位置:0級(jí),螺釘位于椎弓根皮質(zhì)內(nèi);1級(jí),螺釘突破椎弓根骨壁,但≤2 mm;2級(jí),螺釘突破椎弓根骨壁> 2 mm,但無(wú)神經(jīng)受壓等癥狀;3 級(jí),出現(xiàn)螺釘相關(guān)并發(fā)癥(椎弓根骨折、突破椎體前壁壓迫血管/神經(jīng)、突破椎弓根內(nèi)/外壁出現(xiàn)神經(jīng)并發(fā)癥)。螺釘位置0和1級(jí)為優(yōu)良,2級(jí)為可,3級(jí)為不良,需要翻修。螺釘位置由2位脊柱外科醫(yī)師獨(dú)立評(píng)估并達(dá)成一致?;颊咝g(shù)后每3個(gè)月門診復(fù)查,行X線檢查,視病情需要進(jìn)一步行CT和/或MRI檢查。
2.2.1發(fā)育歷期:煙蚜2-3齡若蚜(F0)被寄生后,其后代(F1)發(fā)育歷期有顯著變化(圖3)。對(duì)若蚜產(chǎn)生的F1代1齡若蚜的歷期影響最大(F1,19=5.591,P=0.024),比未被寄生的若蚜所產(chǎn)后代(對(duì)照)的縮短了0.80 d,縮短了40.00%;對(duì)若蚜產(chǎn)生的F1代3齡若蚜的歷期影響最小(F1,28=1.231,P=0.277),比對(duì)照縮短了0.10 d,縮短了7.00%。
講座教學(xué)-案例教學(xué)結(jié)合法在臨床藥師培訓(xùn)中的實(shí)踐與探索…………………………………………………… 陳 琦等(5):703
試驗(yàn)數(shù)據(jù)均用Excel 2010和SPSS 23軟件進(jìn)行處理,均用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示,并采用t檢驗(yàn)(α=0.05)比較。文中煙蚜逃逸的處理或?qū)φ罩貜?fù)不計(jì)入數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)中,但每個(gè)處理或?qū)φ战M至少保持20次重復(fù)(其中5次備用),以確保每組數(shù)據(jù)均具有代表性。
以同一已被煙蚜繭蜂寄生的2-3齡煙蚜(F0)產(chǎn)出的同一后代(F1)若蚜15頭作為處理;并以同一未被煙蚜繭蜂寄生的2-3齡煙蚜(F0)產(chǎn)生的后代(F1)若蚜15頭作為對(duì)照。處理及對(duì)照共2組,各處理重復(fù)15次。對(duì)對(duì)照及處理進(jìn)行觀察、記載,其他方法同1.2節(jié)。
煙蚜:煙蚜蟲源為采自福建省南平市煙草公司邵武市煙蚜繭蜂繁殖基地的煙蚜無(wú)翅若蚜。先在人工氣候箱(溫度26±1℃,相對(duì)濕度75%±2%,光周期14L∶10D)的煙株上把田間采集到的煙蚜若蚜飼養(yǎng)2代(以得到相對(duì)一致、整齊的種群)以上,再接種到培養(yǎng)皿上用于試驗(yàn)。每個(gè)培養(yǎng)皿里放入用打孔器打好的煙葉葉碟(直徑2.5 cm)3片,每片煙葉上均飼養(yǎng)1頭剛產(chǎn)出的1齡若蚜,并把濕棉花墊于煙葉下,以保持煙葉不易失水的同時(shí)又可防止若蚜逃脫;根據(jù)煙葉上蚜蟲蛻皮的數(shù)量判斷若蚜的齡期,試驗(yàn)時(shí)先挑選低齡期若蚜進(jìn)行試驗(yàn),其余若蚜繼續(xù)飼養(yǎng)。
圖1 煙蚜繭蜂寄生煙蚜1齡(A)、2齡(B)和3齡(C)若蚜后煙蚜的發(fā)育歷期
不同齡期煙蚜(F0)被煙蚜繭蜂寄生后,其產(chǎn)仔量也發(fā)生顯著變化(圖2: B)。2齡若蚜被寄生后產(chǎn)仔量受影響最大(F1,21=65.513,P=0.000),每雌產(chǎn)仔量比對(duì)照減少了48.67頭,減少了100.00%;1齡若蚜被寄生后對(duì)產(chǎn)仔量影響最小(F1,22=0.013,P=0.911),每雌產(chǎn)仔量比對(duì)照增加了0.83頭,增加了2.00%;其他若蚜被寄生后對(duì)產(chǎn)仔量影響居中,差異顯著。
圖2 煙蚜繭蜂寄生不同齡期煙蚜后當(dāng)代(F0)煙蚜的壽命(A)和產(chǎn)仔量(B)
2.1.2壽命和產(chǎn)仔量:與未被寄生的對(duì)照相比,不同齡期煙蚜(F0)被煙蚜繭蜂寄生后,煙蚜壽命發(fā)生顯著變化(圖2: A)。2齡若蚜被寄生后受影響最大(F1,21=38.622,P=0.000),比對(duì)照縮短了8.39 d,縮短了54.00%;4齡若蚜和成蚜被寄生后受影響最小(F1,23=0.005,P=0.943),比對(duì)照縮短了0.13 d,縮短了1.00%;僅1齡若蚜被寄生后壽命比對(duì)照延長(zhǎng)了3.61 d(F1,24=5.681,P=0.025),延長(zhǎng)了24.00%;3齡若蚜被寄生后的影響居中,比對(duì)照減少了39.00%(F1,22=18.723,P=0.000)。
試驗(yàn)在位于福建省福州市倉(cāng)山區(qū)建新鎮(zhèn)的福建農(nóng)林大學(xué)科技園田間實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行,試驗(yàn)溫度控制在26±1℃,相對(duì)濕度75%±2%,光周期14L∶10D。試驗(yàn)采用葉片培養(yǎng)皿法,設(shè)置5組處理,即1-4齡煙蚜若蚜及成蟲分別設(shè)置用煙蚜繭蜂寄生的處理組及未寄生的對(duì)照組。處理組:把同時(shí)形成的大小一致的1齡煙蚜若蟲15頭接于煙葉主脈二側(cè)。之后接入交配后的煙蚜繭蜂雌蜂1頭,接蜂24 h后移走煙蚜繭蜂(被寄生后若蚜在外觀比較光亮,必要時(shí)結(jié)合顯微鏡觀察或解剖分析以確認(rèn)蚜蟲被寄生過(guò);并設(shè)置備用處理,以確保足量被寄生的煙蚜)。對(duì)照組:不接入煙蚜繭蜂,其他同處理。此外,對(duì)照及處理均用濕棉花(保濕)墊于煙葉底部的培養(yǎng)皿中。其他處理及對(duì)照組僅更換不同蟲齡煙蚜若蚜。并將對(duì)照及處理組的若蚜分開(kāi)飼養(yǎng)(1頭/皿),編號(hào)每頭蚜蟲。處理及對(duì)照共5組,10個(gè)處理,各處理重復(fù)15次。對(duì)對(duì)照及處理分別于處理后至死亡為止,每隔12 h一次,觀察并記載煙蚜蛻皮情況、產(chǎn)仔數(shù)量等生長(zhǎng)發(fā)育及繁殖情況,并根據(jù)煙蚜若蟲蛻皮的間隔時(shí)間計(jì)算各蟲態(tài)的發(fā)育歷期,將各蟲態(tài)歷期相加計(jì)算煙蚜當(dāng)代壽命,并統(tǒng)計(jì)煙蚜每雌產(chǎn)仔量。
圖3 煙蚜繭蜂寄生2-3齡若蚜后煙蚜后代(F1)的發(fā)育歷期
2.2.2壽命和產(chǎn)仔量:煙蚜2-3齡若蚜(F0)被寄生后,其后代(F1)壽命有顯著差異(P<0.05)(圖4: A)。被寄生煙蚜產(chǎn)生的后代(F1)的平均壽命是19.60 d,比未被寄生的若蚜所產(chǎn)后代(對(duì)照)的平均壽命延長(zhǎng)了5.72 d,延長(zhǎng)了41.20%。
被寄生煙蚜后代(F1)產(chǎn)仔量比對(duì)照的少,但差異不顯著(P>0.05)(圖4: B)。被寄生煙蚜產(chǎn)生后代的平均每雌產(chǎn)仔量是41.80頭,比對(duì)照減少了6.90頭,減少了14.00%。
圖4 煙蚜繭蜂寄生2-3齡若蚜后煙蚜后代(F1)的壽命(A)和產(chǎn)仔量(B)
本試驗(yàn)結(jié)果表明:煙蚜被煙蚜繭蜂寄生后,煙蚜(F0)各齡期的發(fā)育歷期縮短,受影響最顯著的是被煙蚜繭蜂寄生的煙蚜2和3齡若蚜,受影響最小的是被寄生的煙蚜1齡若蟲(圖1)。煙蚜繭蜂寄生煙蚜?xí)涌烊粞涟l(fā)育速度,使之盡快發(fā)育至成蚜,2和3齡若蚜受影響最顯著,1齡若蚜受影響較小。被寄生后的煙蚜壽命相比對(duì)照而言,受影響最大的是2齡若蚜,壽命縮短了54.00%;被寄生后的煙蚜若蟲的產(chǎn)仔量相比對(duì)照而言,受影響最大的是2齡若蚜,產(chǎn)仔量減少了100.00%(圖2)。產(chǎn)生這些現(xiàn)象原因是可能在于煙蚜2齡若蚜被寄生的可能性最高,達(dá)到了100.00%,可能被寄生過(guò)后7 d 內(nèi)煙蚜若蟲體內(nèi)各個(gè)器官都被體內(nèi)的煙蚜繭蜂幼蟲蠶食干凈而變成僵蚜,失去生命體征無(wú)法產(chǎn)生后代,對(duì)產(chǎn)仔量影響也最大,每雌產(chǎn)仔量比對(duì)照減少了48.67頭,減少了100.00%(圖2)。因此,在煙蚜繭蜂寄生煙蚜試驗(yàn)中,對(duì)2齡若蚜壽命及其產(chǎn)仔量的影響比對(duì)其他齡期的影響更為顯著。4齡若蚜、成蟲體型較大較為靈活,在煙蚜繭蜂寄生過(guò)程當(dāng)中,其會(huì)扭動(dòng)掙扎而增加煙蚜繭蜂產(chǎn)卵器剌穿煙蚜身體的難度,導(dǎo)致寄生率較低(吳興富等, 2003),蟲體較硬也可能不利于寄生,而對(duì)其壽命和產(chǎn)仔量的影響較小。煙蚜被煙蚜繭蜂寄生過(guò)后,壽命減短,產(chǎn)仔量也減少,說(shuō)明煙蚜繭蜂對(duì)煙蚜種群的擴(kuò)繁有較大的抑制作用,這為實(shí)際生產(chǎn)中煙蚜繭蜂防治煙蚜提供一定的科學(xué)依據(jù)。
本試驗(yàn)中得出的結(jié)論與孟祥杰(2009)和伍紹龍等(2017)的結(jié)論較一致,研究結(jié)果均表明煙蚜繭蜂對(duì)2和3齡煙蚜若蚜的影響大于對(duì)1齡若蟲。但與吳興富等(2003)研究結(jié)果存在一定差異,其研究表明,煙蚜繭蜂寄生煙蚜后,煙蚜的產(chǎn)仔量和壽命均發(fā)生較大影響,若蚜齡期越小,被寄生后產(chǎn)生的影響越大。而本試驗(yàn)結(jié)果表明,煙蚜繭蜂寄生煙蚜1齡若蚜對(duì)其產(chǎn)仔量和壽命有一定影響,但是對(duì)2和3齡若蚜的影響更為顯著(圖2)。不一致的可能原因?yàn)椴捎玫臒熝晾O蜂來(lái)源和種群密度不同:本試驗(yàn)所用煙蚜繭蜂均為福建邵武煙蚜繭蜂繁育基地采回的僵蚜經(jīng)繁殖兩代后產(chǎn)生的煙蚜繭蜂,而吳興富等(2003)試驗(yàn)所用煙蚜繭蜂是直接采自田間煙株上。二者不同的蜂源和種群對(duì)煙蚜的寄生能力不同(李子蒙等, 2012),低密度、煙株上采集到的煙蚜繭蜂寄生能力不及高密度、網(wǎng)壁上趨光的煙蚜繭蜂。煙蚜被煙蚜繭蜂寄生過(guò)后產(chǎn)生的后代(F1)的平均壽命比對(duì)照的延長(zhǎng)了41.20%(圖4),但3齡若蚜被寄生后的當(dāng)代煙蚜的平均壽命縮短了54.00%(圖2),造成這種現(xiàn)象的可能原因是當(dāng)代被寄生煙蚜體內(nèi)消耗營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等較多,影響了煙蚜的正常生長(zhǎng)發(fā)育,縮短了壽命;而上代被寄生煙蚜產(chǎn)生的下一代煙蚜壽命卻增加,可能是因?yàn)楸患纳?dāng)代煙蚜能成功提供煙蚜繭蜂正常生長(zhǎng)發(fā)育而自身不適減少壽命,但被寄生能產(chǎn)生后代的煙蚜及其后代,通過(guò)自身體內(nèi)調(diào)控機(jī)制或體內(nèi)煙蚜繭蜂刺激煙蚜(F0)而提高其適應(yīng)性,形成了較強(qiáng)的生命力而增加了后代煙蚜的壽命。煙蚜繭蜂寄生1齡若蚜后當(dāng)代(F0)煙蚜壽命比對(duì)照的增加(圖2),這可能是因?yàn)闊熝晾O蜂與煙蚜協(xié)同進(jìn)化造成即煙蚜繭蜂寄生1齡若蚜消耗物質(zhì)較多而延緩發(fā)育,且寄生誘導(dǎo)煙蚜體內(nèi)有益物質(zhì)增加,提高了若蚜的生命力,使其達(dá)到更好地適應(yīng)體內(nèi)煙蚜繭蜂卵的發(fā)育,最后導(dǎo)致其壽命增加。煙蚜繭蜂寄生后的后代(F1)煙蚜各個(gè)齡期的歷期均發(fā)生不同程度的縮短,影響最大的是1齡若蚜的歷期,1齡若蚜被寄生的可能性較低,2齡若蚜的歷期延長(zhǎng),2齡若蚜被寄生可能性較高(圖3)。所以,從不同齡期煙蚜的歷期看,在自然條件下,被煙蚜繭蜂寄生過(guò)后的后代(F1)煙蚜被煙蚜繭蜂寄生的可能性高于對(duì)照組的。但被煙蚜繭蜂寄生過(guò)后的煙蚜體內(nèi)酶含量等調(diào)控物質(zhì)變化情況,煙蚜歷期的影響是否與保幼激素、蛻皮激素有關(guān)等問(wèn)題有待進(jìn)一步深入研究。
本研究發(fā)現(xiàn),煙蚜繭蜂寄生煙蚜若蚜后,煙蚜若蚜歷期和壽命縮短,產(chǎn)仔量降低。所以,在煙蚜的當(dāng)代2齡若蚜期使用煙蚜繭蜂來(lái)進(jìn)行防治,可較好地控制煙蚜種群的大發(fā)生、大危害,以減少煙葉或其他作物的損失。