梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液氣相和液相的成分分析

徐曉俞，李愛(ài)萍，吳思逢，李程勛，鄭開斌

（1福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所，福州 350013；2福鼎市前岐鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心，福建福鼎 355203）

0 引言

【研究意義】梔子（Gardenia jasminoidesEllis）為茜草科梔子屬灌木狀植物，又名水橫枝、黃果子、黃葉下、山黃枝、黃梔子、山梔子等。梔子花氣味芳香，甜美優(yōu)雅，可用于提取揮發(fā)油，已應(yīng)用于多種香型化妝品、香皂香精以及高級(jí)香水香精的調(diào)香劑[1-3]。梔子純露也稱梔子花水，是水蒸氣蒸餾提取梔子鮮花精油過(guò)程中得到的副產(chǎn)物，其飽和了一部分的精油成分，具有與梔子精油類似的香氣，目前在市場(chǎng)上已被作為護(hù)膚品等使用。梔子鮮花細(xì)胞液是在低溫條件下利用低溫抽濕工藝?yán)淠占臈d子鮮花細(xì)胞原液[4-5]，含有一定的梔子花精油成分，具有梔子鮮花的自然花香。近年來(lái)?xiàng)d子鮮花細(xì)胞液越來(lái)越多地被應(yīng)用于化妝品、香精香料、功能保健品等領(lǐng)域，但是關(guān)于細(xì)胞液的成分組成還未知，而且人們對(duì)梔子鮮花細(xì)胞液的評(píng)價(jià)褒貶不一。梔子鮮花花水和細(xì)胞液不同于梔子花精油，但卻具有梔子的花香，在功能化妝品、香精香料、保健品中有一定的應(yīng)用。因此，對(duì)梔子花花水與細(xì)胞液進(jìn)行液相與氣相的全組分分析，對(duì)科學(xué)評(píng)價(jià)梔子花花水與梔子花細(xì)胞液的異同優(yōu)劣及相關(guān)產(chǎn)品開發(fā)具有重要意義。【前人研究進(jìn)展】目前對(duì)于梔子花香氣成分的研究多集中在對(duì)梔子鮮花頭香成分的分析[6-10]、梔子花揮發(fā)油成分的分析[11-13]、梔子花揮發(fā)油提取工藝的優(yōu)化研究[14-15]等方面。但關(guān)于花水和細(xì)胞液的液相成分分析方法以及氣相成分分析未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。精油是指從植物的花、葉、莖、根或果實(shí)中，通過(guò)水蒸氣蒸餾法提取而得的揮發(fā)性芳香物質(zhì)[16]，是揮發(fā)性化合物的聚集，濃度大，刺激性強(qiáng)，往往不能直接用于皮膚，而花水和細(xì)胞液除了有精油中所具有的大部分揮發(fā)性成分外，其液相部分也含有許多具有不同功效的化合物，具有精油無(wú)可比擬的功效，在化妝品市場(chǎng)已廣泛應(yīng)用，因此梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液也同樣具有梔子花精油無(wú)法具有的獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，應(yīng)用價(jià)值突出。液質(zhì)聯(lián)用分析具有分析時(shí)間短、檢測(cè)限低、靈敏度高的特點(diǎn)，廣泛用于植物提取物的成分分析，特別是對(duì)于微量成分具有快速檢出的優(yōu)勢(shì)，劉田園[17]認(rèn)為對(duì)于金銀花水這類含有揮發(fā)性成分的提取物，快速地檢測(cè)其中所含的微量水溶性成分才能更準(zhǔn)確地反映植物提取物的成分組成，可為提取物功效研究奠定基礎(chǔ)。因此，液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)有助于分析梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液的液相成分，從而更全面地分析梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液的功效?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】目前關(guān)于梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液的氣相成分以及液相成分的分析未見(jiàn)報(bào)道。本研究首次從氣相和液相兩個(gè)方面全面分析梔子鮮花花水、鮮花細(xì)胞液的氣味和功效的差異與聯(lián)系?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】利用頂空固相微萃取/氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（HS-SPME/GC-MS）分析梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液中的揮發(fā)性成分，利用超高效液相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（UPLC-ESI-QTOF-MS/MS）分析梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液的化學(xué)成分，通過(guò)對(duì)梔子鮮花花水和梔子鮮花細(xì)胞液香氣成分、相對(duì)含量及其液相化學(xué)成分、相對(duì)含量的分析評(píng)價(jià)，探明梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液差異的本質(zhì)，為香氣修飾、應(yīng)用配方及它們?cè)谔囟üδ芑瘖y品、香精香料、保健品開發(fā)上的應(yīng)用提供數(shù)據(jù)支撐和理論依據(jù)。

1 材料與方法

試驗(yàn)于 2018年在福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所進(jìn)行。

1.1 試驗(yàn)材料與儀器

試驗(yàn)所用梔子鮮花于2018年6月1日采自福建省福鼎市前岐鎮(zhèn)‘分關(guān)1號(hào)’梔子種植基地，鮮花為當(dāng)天開放，不發(fā)黃，且花瓣完全展開。

GCMS-TQ8040三重四極桿型氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀，日本島津公司；手動(dòng) SPME迸樣器、65 μm PDMS/DVB萃取頭，美國(guó)Supelco公司；超高效液相色譜UPLC-TripleTOF串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜儀，美國(guó)AB SCIEX公司。

1.2 樣品制備

（1）常壓水蒸汽蒸餾提取梔子鮮花花水（FFWE）：稱取梔子花5 kg，置于100 L蒸餾罐中，按料液比為1﹕4加水，進(jìn)行水蒸汽蒸餾，餾出液的收集完全處于封閉狀態(tài)，按鮮花﹕花水=1﹕1收集5 kg花水[18]。

（2）梔子鮮花細(xì)胞液（FFCS）：稱取梔子鮮花5 kg，置于烘干箱中，28—32℃常溫烘干，鼓風(fēng)機(jī)轉(zhuǎn)速為2 000 r/min，壓縮機(jī)制冷運(yùn)行頻率為30 Hz，通過(guò)冷凝器冷凝收集蒸發(fā)液體，冷凝及蒸發(fā)液收集過(guò)程處于完全封閉狀態(tài)，脫水8 h直至鮮花脫水率達(dá)80%左右，收集2 kg細(xì)胞液。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 HS-SPME取樣 取樣前先將固相微萃取頭在丙酮中浸泡30 min，緊接著插入色譜儀進(jìn)樣口進(jìn)行老化30 min，老化溫度250℃。用移液槍分別吸取5 mL梔子鮮花花水和細(xì)胞液樣品，置于20 mL頂空瓶中，將老化好的固相微萃取頭插入頂空瓶中，25℃吸附40 min。

1.3.2 GC-MS分析 樣品吸附完成后將固相微萃取頭抽出，插入氣相色譜儀進(jìn)樣口中，250℃解吸3 min，同時(shí)進(jìn)行數(shù)據(jù)采集。色譜條件：HP-5MS標(biāo)準(zhǔn)色譜柱；進(jìn)樣量 1 μL，載氣為 He（99.99%），流量 1 mL·min-1，分流比10﹕1；程序升溫，進(jìn)樣口250℃，柱溫起始溫度50℃保持2 min，以5℃·min-1升溫至180℃，再以20℃·min-1升溫至 280℃保持 2 min?？偝绦驎r(shí)間 40 min。質(zhì)譜條件：GC-MS接口溫度 280℃；離子源溫度200℃，電離方式EI，電子能量70 eV；掃描質(zhì)量范圍35—550 amu。

1.3.3 UPLC-MS/MS分析 分別移取 5 mL梔子花樣品，真空濃縮抽干，加入提取試劑（乙腈﹕甲醇﹕水=2﹕2﹕1）500 μL進(jìn)行超聲提取15 min，重復(fù)3次，提取液在1 200 g·min-1、4℃下離心10 min，取上清液，真空抽干，再用100 μL復(fù)溶液復(fù)溶（乙腈﹕水=1﹕1），轉(zhuǎn)移至2 mL帶有內(nèi)襯管的進(jìn)樣小瓶上機(jī)進(jìn)行LC-MS檢測(cè)。

色譜條件：色譜柱為BEH C18柱（100 mm×2.1 mm i.d., 1.7 μm; Waters, Milford, USA）；流動(dòng)相A為水（含 0.1%甲酸），流動(dòng)相 B為乙腈/異丙醇=1﹕1（含0.1%甲酸）；梯度洗脫程序?yàn)?—3 min：5%—25% B，3—9 min：25%—95% B，9—13 min：95—95%B，13—13.1 min：95%—5% B，5%B保持3 min。流速為0.40 mL·min-1，進(jìn)樣量為10 μL，柱溫為45℃。

質(zhì)譜條件：樣品質(zhì)譜信號(hào)采集分別采用正負(fù)離子掃描模式，電噴霧毛細(xì)管電壓，進(jìn)樣電壓和碰撞電壓分別為：1.0 kV、40 V和6 eV。離子源溫度和去溶劑溫度分別為：120℃和500℃，載氣流量：900 L·h-1，質(zhì)譜掃描范圍：50—1 000 m/z，掃描時(shí)間和間隔時(shí)間分別為：0.1 s和0.02 s。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

GC-MS數(shù)據(jù)分析根據(jù)已有標(biāo)樣（C9-C22正構(gòu)烷烴）的色譜保留時(shí)間，計(jì)算各樣品中每個(gè)成分的保留指數(shù)RI（retention index），根據(jù)NIST 2014標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)中信息進(jìn)行比對(duì)，同時(shí)結(jié)合文獻(xiàn)中相應(yīng)的參考物質(zhì)RI值進(jìn)行定性分析。每個(gè)成分的物質(zhì)含量以相對(duì)含量表示，運(yùn)用峰面積歸一化法，求得各成分的相對(duì)含量[19]。每個(gè)樣品數(shù)據(jù)重復(fù)3次。

UPLC-MS/MS數(shù)據(jù)分析中的原始數(shù)據(jù)經(jīng)代謝組學(xué)處理軟件QI（Waters, Milford, USA）進(jìn)行基線過(guò)濾、峰識(shí)別、積分、保留時(shí)間校正、峰對(duì)齊和歸一化，最終得到一個(gè)保留時(shí)間、質(zhì)荷比和峰強(qiáng)度的數(shù)據(jù)矩陣，并與metlin數(shù)據(jù)庫(kù)和HMDB數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì)，對(duì)各代謝物質(zhì)進(jìn)行定性。運(yùn)用峰面積歸一化法，求得各代謝物質(zhì)的相對(duì)含量。每個(gè)樣品數(shù)據(jù)重復(fù)3次。

2 結(jié)果

2.1 梔子鮮花花水和細(xì)胞液的香氣成分比較

從表1可以看出，梔子鮮花花水中的香氣成分以芳樟醇和惕各酸順-3-己烯酯為主，相對(duì)含量分別達(dá)到63.00%和13.24%，梔子鮮花細(xì)胞液中以芳樟醇和反式-橙花叔醇為主要香氣成分，相對(duì)含量分別高達(dá)69.37%和 19.08%。梔子鮮花花水中的反式-橙花叔醇相對(duì)含量?jī)H為 0.05%，而梔子鮮花細(xì)胞液中惕各酸順-3-己烯酯的相對(duì)含量只有0.88%。梔子鮮花花水中的香葉醇相對(duì)含量達(dá)到 1.71%，而在梔子鮮花細(xì)胞液中未檢測(cè)到。

從梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液中共檢測(cè)出香氣成分111種，其中梔子鮮花花水檢測(cè)出香氣成分79種，而鮮花細(xì)胞液中檢測(cè)出香氣成分56種，僅占檢測(cè)出的揮發(fā)性成分總量的一半。從圖1和圖2可知，檢測(cè)出的香氣成分包含醇類化合物、萜烯類化合物、酯類化合物、醛類化合物、酮類化合物、酚類化合物等8個(gè)種類的化合物。梔子鮮花花水中的醇類化合物、酮類化合物、酯類化合物的種類分別為32、5、26種，高于鮮花細(xì)胞液，但萜烯類化合物僅檢測(cè)到5種，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于鮮花細(xì)胞液（12種）。梔子鮮花細(xì)胞液中醇類化合物的相對(duì)含量占94.17%，而梔子鮮花花水中僅有71.54%；萜烯類化合物的相對(duì)含量達(dá)到 1.54%，而梔子鮮花花水僅占 0.46%。梔子鮮花細(xì)胞液中酯類化合物和酮類化合物的相對(duì)含量分別僅為 2.91%和 0.51%，而梔子鮮花花水中分別達(dá)到26.06%和1.33%。表明梔子鮮花細(xì)胞液中的揮發(fā)性成分以醇類和萜烯類為主，較為單一；而梔子鮮花花水中除了醇類成分，酯類、酮類成分也占有較大比例。

檢測(cè)發(fā)現(xiàn)梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液的酯類化合物中存在著多種惕各酸酯類成分，其中梔子鮮花花水中的惕各酸酯類成分有10種，數(shù)量高于鮮花細(xì)胞液的7種。梔子鮮花花水中各惕各酸酯類化合物相對(duì)含量總和為 19.96%，其中惕各酸順-3-己烯酯相對(duì)含量達(dá)13.24%，而鮮花細(xì)胞液中各惕各酸酯類成分的含量?jī)H為2.30%。

2.2 梔子鮮花花水和細(xì)胞液的化學(xué)成分比較

正、負(fù)離子模式下梔子鮮花花水和細(xì)胞液的化學(xué)成分及其相對(duì)含量分析結(jié)果見(jiàn)表2。

從表2可以看出，梔子鮮花花水和梔子鮮花細(xì)胞液在正、負(fù)離子模式下同時(shí)進(jìn)行UPLC-QTOF-MS/MS分析，分別鑒定出200個(gè)、212個(gè)和46個(gè)、54個(gè)成分?？梢?jiàn)梔子鮮花花水和梔子鮮花細(xì)胞液中的化學(xué)成分在正離子模式下響應(yīng)較為靈敏，梔子鮮花細(xì)胞液在正、負(fù)離子模式下檢出的成分?jǐn)?shù)量均多于梔子鮮花花水。

圖1 梔子鮮花花水和細(xì)胞液的香氣成分種類數(shù)量Fig. 1 Type number of aroma constituents of floral water extract and flowers cell sap from Gardenia jasminoides

圖2 梔子鮮花花水和細(xì)胞液的香氣成分相對(duì)含量Fig. 2 Relative contents of aroma constituents of floral water extract and flowers cell sap from Gardenia jasminoides

在正離子模式下，梔子鮮花花水和梔子鮮花細(xì)胞液中的化學(xué)成分以氨基酸、萜類、生物堿、肽類等為主要成分，其中以生物堿的數(shù)量最多，在梔子鮮花花水和梔子鮮花細(xì)胞液中分別為30種和39種。從各成分相對(duì)含量上看（圖3），梔子鮮花花水中相對(duì)含量較高的成分種類有生物堿類、芳香類、單萜類，相對(duì)含量分別達(dá)到47.10%、20.74%、14.24%，而梔子鮮花細(xì)胞液中的主要成分有生物堿類、酯類、芳香類，相對(duì)含量分別為45.21%、18.01%、14.68%。由此可見(jiàn)，生物堿類成分是梔子鮮花花水和梔子鮮花細(xì)胞液中的主要活性物質(zhì)，不僅含量高，而且成分種類多樣。

在負(fù)離子模式下，梔子鮮花花水和梔子鮮花細(xì)胞液中的化學(xué)成分以生物堿、酸類成分為主，它們?cè)跅d子鮮花花水和梔子鮮花細(xì)胞液中的數(shù)量分別為 5種、14種和12種、12種。從各成分相對(duì)含量上看（圖4），梔子鮮花花水中相對(duì)含量較高的成分有酸類、三萜類、酯類，相對(duì)含量分別達(dá)到37.87%、24.75%、9.37%，而梔子鮮花細(xì)胞液以酮類、酸類、酯類、生物堿類為主，相對(duì)含量分別為31.29%、15.64%、14.19%、13.45%?？梢钥闯觯犷惡王ヮ惓煞志菞d子鮮花花水和梔子鮮花細(xì)胞液中大量存在的物質(zhì)。

2.2.1 氨基酸類成分的鑒定 氨基酸是梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液中的一類主要成分。在正離子模式下，從梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液中鑒定出的氨基酸成分有9種，如L-組氨酸、L-脯氨酸等，相對(duì)含量均小于0.1%。而在負(fù)離子模式下，僅檢測(cè)出2種氨基酸，分別為 L-脯氨酸和 3-(3,4-二羥苯基)-N-[2-(4-羥苯基)乙基]丙氨酸，其中L-脯氨酸在梔子鮮花細(xì)胞液中的相對(duì)含量高達(dá) 3.05%，在梔子鮮花花水中的相對(duì)含量為0.59%，也是相對(duì)含量最高的氨基酸成分。

2.2.2 萜類成分的鑒定 梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液中的萜類成分較為豐富，不僅體現(xiàn)在數(shù)量上，在相對(duì)含量上也占有重要比例，包括單萜、倍半萜、二萜和三萜成分。

2.2.2.1 單萜成分的鑒定 梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液中檢測(cè)出的單萜成分不多。正離子模式下鑒定的成分有二氫黃蒿萜酮、檜醇和(S)-(-)-紫蘇醇，其中梔子鮮花花水中的(S)-(-)-紫蘇醇的相對(duì)含量高達(dá)13.73%，在鮮花細(xì)胞液中也有5.11%。在負(fù)離子模式下，發(fā)現(xiàn)了薄荷醇-葡萄糖醛酸和梔子中特有的活性成分京尼平酸，其中梔子鮮花花水中的京尼平酸相對(duì)含量較高，達(dá)到1.76%。

2.2.2.2 倍半萜成分的鑒定 負(fù)離子模式下沒(méi)有發(fā)現(xiàn)倍半萜成分，而在正離子模式下響應(yīng)靈敏，檢測(cè)出了19種倍半萜成分。相對(duì)含量較高的有蜜環(huán)菌醛H、青蒿琥酯、氧化石竹烯、α-佛手柑油烯、(+)-長(zhǎng)葉環(huán)烯、α-石竹烯等，其中相對(duì)含量最高的氧化石竹烯在梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液中的相對(duì)含量分別達(dá)到 1.77%和0.38%。

表2 梔子鮮花花水和細(xì)胞液的化學(xué)成分及其相對(duì)含量（高于0.1%）Table 2 Chemical constituents and relative percentage of floral water extract and flowers cell sap from Gardenia jasminoides(above 0.1%)

續(xù)表2 Continued table 2

續(xù)表2 Continued table 2

續(xù)表2 Continued table 2

續(xù)表2 Continued table 2

圖3 正離子模式下的梔子鮮花花水和細(xì)胞液的化學(xué)成分種類及其相對(duì)含量Fig. 3 Types of chemical constituents and their relative contents of floral water extract and flowers cell sap from Gardenia jasminoides in positive ion mode

圖4 負(fù)離子模式下的梔子鮮花花水和細(xì)胞液的化學(xué)成分種類及其相對(duì)含量Fig. 4 Types of chemical constituents and their relative contents of floral water extract and flowers cell sap from Gardenia jasminoides in negative ion mode

2.2.2.3 二萜成分的鑒定 梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液中檢出的二萜類成分不多。正離子模式下共檢測(cè)到4種二萜類成分，如西紅花苷II、赤霉素A62等，相對(duì)含量均在0.1%以下，而負(fù)離子模式下僅檢測(cè)到辛卡西醇B這一種二萜成分，在梔子鮮花花水中的相對(duì)含量為1.56%，而在梔子鮮花細(xì)胞液中僅為0.30%。

2.2.2.4 三萜成分的鑒定 梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液中檢測(cè)到的三萜類成分雖然也不多，但是有些三萜化合物的相對(duì)含量較高。正離子模式下檢測(cè)到的4種三萜成分中，山茶皂苷元 B在梔子鮮花花水中的相對(duì)含量達(dá)到2.16%，而鮮花細(xì)胞液中只有0.02%。負(fù)離子模式下檢測(cè)到的三萜成分有異檸檬苦素酸、麥德龍苷 D和羥基積雪草苷，其中麥德龍苷D和羥基積雪草苷在梔子鮮花花水中的相對(duì)含量分別達(dá)到4.35%和20.20%。

2.2.3 生物堿成分的鑒定 生物堿成分是梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液中成分?jǐn)?shù)量最多，也是相對(duì)含量最高的一類成分，相對(duì)含量分別達(dá)到47.09%和45.20%。生物堿成分在正離子模式下更容易響應(yīng)，檢測(cè)到的成分?jǐn)?shù)量要遠(yuǎn)高于負(fù)離子模式。正離子模式下檢測(cè)到的44種生物堿成分中，芥酸酰胺、大觀霉素、氨茴酸、L-1,2,3,4-四氫-β-咔啉-3-羧酸的相對(duì)含量均較高。芥酸酰胺在梔子鮮花花水中的相對(duì)含量達(dá)到43.66%，而在鮮花細(xì)胞液中的相對(duì)含量為19.41%，均是相對(duì)含量最高的生物堿成分，是梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液中的重要功效成分。大觀霉素在梔子鮮花細(xì)胞液中的相對(duì)含量為18.16%，而在梔子鮮花花水中僅為0.29%。負(fù)離子模式下檢測(cè)到的14種生物堿成分中，鮮花細(xì)胞液中相對(duì)含量較高的成分有曲貝替定、3-(3,4-二羥苯基)-N-[2-(5-羥苯基)乙基]丙酮酸、納他霉素和葫蘆巴堿，相對(duì)含量分別達(dá)到3.30%、3.33%、2.61%和1.58%，而梔子鮮花花水中的3-(3,4-二羥苯基)-N-[2-(5-羥苯基)乙基]丙酮酸相對(duì)含量?jī)H有0.40%。鮮花細(xì)胞液未檢測(cè)到的甘油磷酰膽堿和4-羥基異喹胍在梔子鮮花花水中的含量則達(dá)到1.54%和1.25%。

3 討論

由于梔子鮮花細(xì)胞液中醇類化合物和萜烯類化合物的相對(duì)含量總和達(dá)到95.71%，而其中芳樟醇及其氧化物的含量高達(dá) 69.52%，反式-橙花叔醇和橙花叔醇的含量高達(dá)19.12%，可見(jiàn)醇類化合物對(duì)梔子鮮花細(xì)胞液的香氣品質(zhì)影響最大，起到了決定性作用，而水蒸氣蒸餾提取的梔子鮮花花水中醇類化合物和萜烯類化合物的相對(duì)含量總和為72.00%，其中芳樟醇及其氧化物的含量達(dá)63.82%，反式-橙花叔醇僅有0.05%。由于萜烯類化合物具有新鮮的頭香，芳樟醇及其氧化物使香氣偏輕[47]，反式-橙花叔醇帶有類似于玫瑰、鈴蘭和蘋果花的氣息[48]，因此，梔子鮮花細(xì)胞液較梔子鮮花花水具有充足的頭香，但香氣簡(jiǎn)單，層次不豐富。而梔子鮮花花水除了醇類化合物和萜烯類化合物外，還含有相對(duì)含量高達(dá) 26.06%的酯類化合物，主要以惕各酸酯類化合物存在，各惕各酸酯類化合物相對(duì)含量總和為19.47%，其中惕各酸順-3-己烯酯相對(duì)含量達(dá) 13.24%，與報(bào)道的梔子鮮花中的主要成分結(jié)果相一致[10-11,13-14]。通過(guò)文獻(xiàn)檢索，發(fā)現(xiàn)惕各酸酯類成分僅能在梔子花[8,10,14]、香葉天竺葵[49]、百合[50]等少數(shù)花卉中有報(bào)道，尤以梔子花中的相對(duì)含量較高，數(shù)量最多，而其他花卉相對(duì)含量較低，是梔子花的特征性香氣成分。其中，惕各酸順-3-己烯酯有優(yōu)雅的花香氣[51]，使梔子鮮花花水具有很好的底香。因此，梔子鮮花花水更具有梔子花特有的香氣，而且香氣更悠長(zhǎng)，層次更豐富。與張銀華等[12]制備的梔子花精油的成分進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)梔子鮮花花水中惕各酸順-3-己烯酯的比例很高，而梔子花精油中非常低，表明梔子鮮花花水比稀釋后的梔子花精油更能顯現(xiàn)“梔子香型”。

L-脯氨酸是一種重要的五元環(huán)狀氨基酸，是人體合成蛋白質(zhì)的十八種氨基酸之一，味微甜，可作為營(yíng)養(yǎng)增補(bǔ)劑[52]，在梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液中均是相對(duì)含量最高的氨基酸成分，但梔子鮮花細(xì)胞液中的氨基酸類種類多于梔子鮮花花水，營(yíng)養(yǎng)成分更全面?？梢?jiàn)梔子鮮花細(xì)胞液的營(yíng)養(yǎng)功效較梔子鮮花花水全面。(S)-(-)-紫蘇醇是一種單環(huán)單萜烯醇，具有較好的抗癌功效，在國(guó)外已作為防癌保健品推廣，或作為新型抗癌藥物進(jìn)行臨床試驗(yàn)[53]，(S)-(-)-紫蘇醇是梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液中相對(duì)含量最高的單萜類成分。通過(guò)分析，發(fā)現(xiàn)梔子鮮花花水中存在較多的抗菌、抗炎活性物質(zhì)，如倍半萜成分雙氫青蒿素、三萜成分山茶皂苷元B、三萜成分羥基積雪草苷等，而梔子鮮花細(xì)胞液中僅含有山茶皂苷元B、羥基積雪草苷，抗菌、抗炎成分種類較少而且相對(duì)含量極低。雙氫青蒿素對(duì)大腸桿菌有抗菌活性[54]，且具有較好的抗炎活性[55]，山茶皂苷元 B對(duì)病原真菌和酵母菌具有較強(qiáng)的抑制活性[56]，羥基積雪草苷具有抗炎藥理作用，已在臨床上得到應(yīng)用[57]。此外，梔子鮮花花水中還存在雙環(huán)孢素、塔羅霉素A等抗生素，而鮮花細(xì)胞液中僅含有塔羅霉素A。梔子鮮花細(xì)胞液中含有相對(duì)含量較高的大觀霉素，梔子鮮花花水中也含有大觀霉素，其具有抗淋球菌活性[58]。由此可見(jiàn)，梔子鮮花花水中的抗菌、抗炎成分更為多樣，在抗菌、抗炎功效上更為突出。京尼平酸是梔子中存在的特征性活性成分之一，是評(píng)價(jià)梔子藥效的主要化學(xué)成分[59]，具有抗氧化、抗應(yīng)激等藥理作用[60]，負(fù)離子模式下，在梔子鮮花花水中的相對(duì)含量達(dá)1.76%，占其單萜類成分的比例為67.95%；而在梔子鮮花細(xì)胞液中的相對(duì)含量?jī)H有0.18%，占其單萜類成分的比例為48.65%，可見(jiàn)京尼平酸在梔子鮮花花水抗氧化功效的表現(xiàn)上更突出。芥酸酰胺作為芥酸的重要衍生物，是一種應(yīng)用范圍廣泛的生物活性物質(zhì)，有研究表明，芥酸酰胺對(duì)小鼠具有一定的抗焦慮樣作用[61]。芥酸酰胺作為梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液中相對(duì)含量最高的一種生物堿成分，賦予了梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液具有一定的抗焦慮生理功能。

4 結(jié)論

通過(guò)氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)分析了梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液的香氣成分，表明芳樟醇是梔子鮮花細(xì)胞液和梔子鮮花花水的主要香氣成分。梔子鮮花細(xì)胞液較梔子鮮花花水具有充足的頭香，但香氣簡(jiǎn)單，留香時(shí)間短；而梔子鮮花花水含有更多的代表?xiàng)d子花特征香氣成分的惕各酸酯類化合物，香氣成分較梔子鮮花細(xì)胞液豐富，各類化合物含量分布較均衡，使梔子鮮花花水除了具有良好的頭香，而且具有濃郁的底香，持香時(shí)間長(zhǎng)，香氣層次更豐富。通過(guò)超高效液相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（UPLC-ESI-QTOF-MS/MS）分析了梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液液相化學(xué)成分，表明生物堿類成分是梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液中的主要特征性物質(zhì)，可作為梔子鮮花花水和鮮花細(xì)胞液品質(zhì)的評(píng)價(jià)指標(biāo)。梔子鮮花花水含有豐富的萜類成分及生物堿成分，而梔子鮮花細(xì)胞液在營(yíng)養(yǎng)功效上更顯著。