伍少欽，秦榮香，肖有恩，陸 江，盧 劍，蔣志疆，謝露露，吳志君

（廣西農(nóng)墾永新畜牧集團(tuán)有限公司，廣西 南寧 530022）

2008年前我國(guó)大多數(shù)豬場(chǎng)豬群中豬偽狂犬病（Porcine Pseudorabies，PR）野毒感染處在一個(gè)比較高的水平，由此導(dǎo)致豬群繁殖性能和生長(zhǎng)水平的降低，同時(shí)引發(fā)豬群健康狀況惡化。PR的清除與凈化研究在歐美很多先進(jìn)的養(yǎng)豬大國(guó)早已開(kāi)展，并有了成功的案例；其中美國(guó)于1989年制訂了一項(xiàng)長(zhǎng)達(dá)10年的豬偽狂犬病凈化方案，已在豬群成功地清除了PR。2003年前我國(guó)沒(méi)有成功清除豬偽狂犬病的案例，2008年前獸醫(yī)防疫部門(mén)也未頒布豬偽狂犬病控制和凈化操作規(guī)程，國(guó)內(nèi)科研機(jī)構(gòu)對(duì)PR研究基本停留在診斷和控制階段。為了探索與研究大型集約化種豬場(chǎng)豬偽狂犬病的控制與凈化工作，摸索一套適合國(guó)內(nèi)規(guī)模豬場(chǎng)PR凈化的操作規(guī)程（或PR凈化的經(jīng)驗(yàn)與借鑒），良圻原種豬場(chǎng)2003年針對(duì)PR開(kāi)展清除與凈化工作，經(jīng)過(guò)多年的努力，2004年成功地完成核心群PR凈化；2005年所有母豬場(chǎng)完成凈化工作[1，2]。

2011年底和2012年上半年國(guó)內(nèi)多個(gè)省市的養(yǎng)豬場(chǎng)出現(xiàn)豬偽狂犬病疫情，原來(lái)在2002年制定的PR凈化方案是否有效，能否做到豬偽狂犬病的凈化？這些都有待于臨床上進(jìn)一步驗(yàn)證。

1 材料與方法

1.1 血清

被檢血清采自所有基礎(chǔ)公母豬、后備豬、崗哨豬、產(chǎn)房仔豬、保育豬和育肥豬。

1.2 疫苗

豬偽狂犬病 gE 基因缺失弱毒疫苗和滅活疫苗，分別購(gòu)自某動(dòng)物保健品有限公司。

1.3 檢測(cè)試劑盒

豬偽狂犬病 gE 和gB抗體ELISA檢 測(cè)試劑盒， 購(gòu)自國(guó)外某公司。

1.4 酶標(biāo)儀

美國(guó)伯樂(lè) 550S， 美國(guó)寶特Elx800等。

1.5 洗板機(jī)

Thermo WellWash 4 MK2和Biotek-50TS等。

1.6 方法

根據(jù)試劑盒的說(shuō)明，S/N＜0.6的為抗體陽(yáng)性，作淘汰處理；0.6～0.7之間為可疑，重檢，再次可疑作陽(yáng)性處理；S/N≥0.7為抗體陰性。

2 控制與凈化原理

豬只一旦感染PR后，會(huì)終身帶毒，病毒會(huì)長(zhǎng)期潛伏在三叉神經(jīng)節(jié)內(nèi)；豬只受到應(yīng)激后會(huì)造成排毒。通過(guò)高強(qiáng)度的疫苗免疫，會(huì)大幅度減少其排毒，甚至某些階段不在排毒。有免疫效果確實(shí)的gE 基因缺失疫苗和配套的鑒別診斷試劑，使應(yīng)用檢測(cè)淘汰法凈化豬偽狂犬病成為可能。

凈化工作開(kāi)展前，首先評(píng)估群體內(nèi)PR野毒感染的陽(yáng)性率。一般以10%為界限，如果陽(yáng)性率低于10%，直接進(jìn)入凈化模式；若大于10%，先通過(guò)不斷補(bǔ)充PR陰性的后備豬，同時(shí)加強(qiáng)疫苗免疫，當(dāng)群體野毒陽(yáng)率低于10%，執(zhí)行凈化方案，詳見(jiàn)圖1。

3 良圻原種豬場(chǎng)PR控制與凈化過(guò)程

3.1 PR凈化工作的前提

完善豬場(chǎng)生物安全體系，加強(qiáng)員工生物安全培訓(xùn)。要培訓(xùn)豬場(chǎng)管理人員和全體一線(xiàn)員工，讓員工意識(shí)到生物安全重要性，若有人不重視不遵守，其他人再重視再努力也白費(fèi)勁，整個(gè)生物安全體系必定不堪一擊，這很符合“木桶理論”，生物安全的可靠性取決于整體最薄弱的環(huán)節(jié)，所以要經(jīng)常對(duì)員工培訓(xùn)生物安全，有內(nèi)容更新時(shí)要第一時(shí)間告訴全體員工[3]。定期檢查評(píng)估生物安全的薄弱環(huán)節(jié)，限期糾正存在問(wèn)題。PR清除計(jì)劃的開(kāi)始，必須把防疫管理措施放在首位，確保豬只能得到有效的防疫隔離， 避免接觸到傳染源而發(fā)生再次感染。

種豬場(chǎng)內(nèi)所有基礎(chǔ)公母豬、后備豬及種豬場(chǎng)內(nèi)70～80日齡育成/育肥豬均肌注豬偽狂犬病 gE 基因缺失弱毒苗，基礎(chǔ)公母豬每4個(gè)月免疫1次，后備豬配種前免疫2次，育肥/育成豬免1次。如有使用全基因豬偽狂犬病疫苗的豬場(chǎng)，為減少檢測(cè)干擾，鑒別診斷檢測(cè)在gE基因缺失疫苗使用一年后開(kāi)展。

養(yǎng)豬場(chǎng)必須要有本場(chǎng)實(shí)驗(yàn)室（可靠的試劑、設(shè)備和檢測(cè)人員），以便第一時(shí)間出結(jié)果，實(shí)時(shí)指導(dǎo)豬場(chǎng)的疾病凈化工作。

3.2 制定豬偽狂犬病的清除方案

3.2.1 主要的技術(shù)路線(xiàn)

1）路線(xiàn)一：豬偽狂犬?。≒R）陽(yáng)性率10%以?xún)?nèi)的，采用連續(xù)3次，每隔4～6周一次全群采血檢測(cè)淘汰野毒感染的種豬。

2）路線(xiàn)二：豬偽狂犬?。≒R）陽(yáng)性率10%以上的，暫時(shí)不采取凈化措施，全群高強(qiáng)度連續(xù)免疫PRV基因缺失疫苗3次（3次時(shí)間：1周、4周、8周，每次每頭豬4頭份），以后堅(jiān)持引入陰性后備種豬，2～3年后抽檢檢測(cè)評(píng)估群體陽(yáng)性率，當(dāng)陽(yáng)性率≤10%時(shí)，按路線(xiàn)一處理。

3次全群檢測(cè)完成前留取不免疫PR疫苗的崗哨豬（哨兵豬），同時(shí)不斷補(bǔ)充檢測(cè)合格的陰性后備種豬，從而達(dá)到全面清除凈化豬的偽狂犬病毒。

3.3 凈化方案執(zhí)行的前期準(zhǔn)備和輔助措施

3.3.1 淘汰隔離場(chǎng)的準(zhǔn)備

為杜絕陽(yáng)性豬的交叉感染和減少陽(yáng)性豬的淘汰損失，必須有一個(gè)獨(dú)立且方圓3～5 km沒(méi)有豬場(chǎng)的隔離場(chǎng)，用于存放檢測(cè)為野毒陽(yáng)性的妊娠母豬。

3.3.2 大力開(kāi)展滅鼠工作

偽狂犬gE基因缺失疫苗的應(yīng)用，提高了免疫豬群抵抗PRV感染的能力，提高感染PR所需的病毒含量，但不能完全阻止PRV野毒對(duì)豬的潛伏感染。由于老鼠會(huì)攜帶PRV等病毒，大量老鼠的存在會(huì)增加豬只再次感染PR的風(fēng)險(xiǎn)。因此在凈化工作前中后期，都需要定期開(kāi)展大規(guī)模的滅鼠工作：一是交替使用不同的滅鼠藥；二是清除豬場(chǎng)內(nèi)的雜草，使老鼠在場(chǎng)區(qū)無(wú)法藏身；最后全體員工行動(dòng)，對(duì)豬場(chǎng)內(nèi)部所有的老鼠洞逐個(gè)進(jìn)行排除，使用高壓噴槍噴水入老鼠洞，另外幾人守住鄰近的鼠洞，滅鼠率可達(dá)90%以上。一個(gè)豬場(chǎng)連續(xù)做3 d；做完一個(gè)輪回后再做一個(gè)回合。與滅鼠公司簽訂合同，要求用藥后有效減少90%以上的老鼠，同時(shí)積極發(fā)動(dòng)員工參與滅鼠工作，清理現(xiàn)場(chǎng)與阻塞老鼠洞，通過(guò)以上的措施后，豬場(chǎng)內(nèi)的老鼠基本上很少看到。

3.3.3 豬偽狂犬病免疫程序的制定

基礎(chǔ)母豬根據(jù)疫苗公司推薦的免疫程序，在產(chǎn)前4周免疫，同時(shí)監(jiān)測(cè)疫苗抗體的保護(hù)期，試驗(yàn)表明疫苗足夠保護(hù)一個(gè)妊娠周期，后備豬和部分育肥豬則根據(jù)PRV-gB抗體監(jiān)測(cè)結(jié)果進(jìn)行免疫，發(fā)現(xiàn)母源抗體能保護(hù)到10～12周，因而選擇在第11周進(jìn)行測(cè)定豬（生長(zhǎng)育肥豬）的首次免疫，留種后備豬在175日齡再次免疫PRV基因缺失疫苗。

3.3.4 車(chē)流、豬流和人流的控制

3.3.4.1 車(chē)流的控制

內(nèi)部車(chē)流：配備專(zhuān)用運(yùn)輸車(chē)輛，分別用于飼料、豬只運(yùn)送和物資的采購(gòu)等；不得交叉使用。在豬場(chǎng)內(nèi)部運(yùn)輸飼料和豬只的車(chē)輛，嚴(yán)格按照規(guī)定線(xiàn)路和時(shí)間順序操作。車(chē)輛每次運(yùn)輸后都要充分清洗、消毒和干燥。外部車(chē)流：所有不必要車(chē)輛嚴(yán)禁停在豬場(chǎng)，外來(lái)車(chē)輛停放在生物安全區(qū)的周?chē)狻Ｍ鈦?lái)買(mǎi)豬車(chē)輛，必須在公司指定的消毒點(diǎn)嚴(yán)格清洗消毒。持有第一次消毒單的車(chē)輛才能進(jìn)到場(chǎng)區(qū)進(jìn)行第二次消毒，在第二消毒區(qū)經(jīng)消毒人員驗(yàn)收第一次消毒單后，再經(jīng)過(guò)3～5 min的噴淋消毒才能真正進(jìn)入場(chǎng)區(qū)，到各場(chǎng)裝豬的車(chē)輛還必須經(jīng)過(guò)該場(chǎng)門(mén)衛(wèi)進(jìn)行第三次消毒后才能靠近裝豬臺(tái)。裝豬人員必須憑借三次的消毒證明才能進(jìn)行裝豬。

3.3.4.2 豬流的控制

豬群的流向采用單向流動(dòng)，哺乳仔豬→保育豬→育肥豬，每批豬只全進(jìn)全出，不同來(lái)源的豬只能流向特定的豬場(chǎng)，嚴(yán)禁隨意交叉。

3.3.4.3 人流的控制

內(nèi)部人流：嚴(yán)格限制人員的流動(dòng)，本場(chǎng)內(nèi)各豬舍的飼養(yǎng)員禁止互相竄欄；技術(shù)人員進(jìn)入不同豬舍要洗手更衣?lián)Q鞋；工作人員定期體檢，豬場(chǎng)獸醫(yī)人員不準(zhǔn)對(duì)外診療疾?。回i場(chǎng)配種人員不準(zhǔn)對(duì)外開(kāi)展配種工作。公司員工及其家屬不得購(gòu)買(mǎi)市場(chǎng)上的生肉，也不得到賣(mài)生肉的地方停留，公司定期供給員工本場(chǎng)豬肉。外部人流：所有外來(lái)人員及非生產(chǎn)人員不得進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)，特殊情況下，必須隔離凈化3～5 d，經(jīng)淋浴消毒，更換豬場(chǎng)的防護(hù)服后方可入場(chǎng)，并嚴(yán)格遵守場(chǎng)內(nèi)的防疫制度。參觀人員進(jìn)場(chǎng)前必須有領(lǐng)導(dǎo)簽字。

3.4 豬偽狂犬病凈化方案執(zhí)行過(guò)程和結(jié)果

3.4.1 豬偽狂犬病實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果

根據(jù)2003年抽檢發(fā)現(xiàn)3個(gè)母豬場(chǎng)的總體陽(yáng)性和可疑率共為4.7%，因此按方案一進(jìn)行。分階段對(duì)3個(gè)豬場(chǎng)的種豬采血檢測(cè)。從2003年-2005年，通過(guò)對(duì)全體基礎(chǔ)公、母豬采血檢測(cè)淘汰陽(yáng)性豬、嚴(yán)格的防疫措施、加強(qiáng)管理、嚴(yán)把后備豬質(zhì)量關(guān)等技術(shù)措施，共檢測(cè)血清44 648頭份（其中3次全群血清檢測(cè)12 631頭份），每年對(duì)自留的后備種豬、部分對(duì)外銷(xiāo)售種豬、種公豬、有問(wèn)題的種豬以及設(shè)置崗哨豬定期檢測(cè)，共監(jiān)測(cè)26 628頭份血清，檢測(cè)結(jié)果全為陰性，成功地完成豬偽狂犬病的凈化工作。

3.4.2 豬偽狂犬病凈化前后對(duì)生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)的影響（2003-2008年）

凈化方案從2003年開(kāi)始，至2008年共實(shí)施6年，期間共出欄商品豬523 111頭，平均87 185頭/年，比執(zhí)行前3年平均增加57 459頭/年，增長(zhǎng)1.93倍；推廣PR陰性種豬70 366頭，平均11 728頭/年，比前3年平均增加4 088頭/年，增長(zhǎng)53.5%；平均每頭基本母豬年產(chǎn)2.22胎，年產(chǎn)活仔21.07頭；比前3年窩產(chǎn)活仔提高1.12頭，提高5.61%；哺乳豬死亡率 2.79%，比前3年平均3.65%降低0.86個(gè)百分點(diǎn)；保育豬死亡率3.42%，比前3年平均上升0.26個(gè)百分點(diǎn)；育肥豬死亡率2.41%，比前3年平均上升0.37個(gè)百分點(diǎn)；全群豬死亡率5.98%，比前3年平均6.81%下降12.9%。部分指標(biāo)上升原因是受2007和2008年自然冰凍災(zāi)害的影響。全群增重料重比平均為3.11:1，比前3年平均下降了0.19，下降5.76%；每頭基礎(chǔ)母豬年提供商品豬18.96頭，比前3年平均17.9頭增加了1.06頭，增長(zhǎng)5.92%。項(xiàng)目實(shí)施6年，實(shí)現(xiàn)利潤(rùn)5 412.88萬(wàn)元，年均利潤(rùn)902.15萬(wàn)元, 比前3年平均110.84萬(wàn)元增長(zhǎng)7.14倍（詳見(jiàn)表1）。

3.5 豬偽狂犬病凈化小結(jié)

采用全群采血檢測(cè)、淘汰野毒感染種豬、強(qiáng)化豬偽狂犬病gE基因缺失疫苗免疫、引入陰性后備種豬群、嚴(yán)格執(zhí)行生物安全防疫體制及管理等綜合性措施，成功地在大于6 000頭母豬的種豬場(chǎng)凈化了豬偽狂犬病，構(gòu)建了陰性種豬群。在國(guó)內(nèi)首家建立了豬偽狂犬病毒感染低陽(yáng)性率的大型種豬場(chǎng)的豬偽狂犬病凈化模式。

4 2011年P(guān)R毒株出現(xiàn)變異時(shí)的應(yīng)對(duì)措施

2011年底和2012年國(guó)內(nèi)多個(gè)省市的養(yǎng)豬場(chǎng)出現(xiàn)豬偽狂犬病疫情，先是從北方開(kāi)始，后面逐漸漫延至南方。為應(yīng)對(duì)這波疫情，主要開(kāi)展如下工作：疫苗篩選試驗(yàn)；母源抗體檢測(cè)試驗(yàn)；中和抗體試驗(yàn)；免疫程序優(yōu)化試驗(yàn)；PR新感染場(chǎng)凈化方案的優(yōu)化。

4.1 疫苗篩選試驗(yàn)

因2011年中國(guó)北方地區(qū)PR疫情較復(fù)雜，為應(yīng)對(duì)將來(lái)可能出現(xiàn)的疫情，2012年12月再次開(kāi)展不同疫苗的比對(duì)試。B苗和M苗二種疫苗，在后備豬（育肥豬）、母豬等免疫對(duì)比試驗(yàn)，整體分析后M苗優(yōu)于B苗。因此2012年豬群的PR免疫改用M苗。

4.2 母源抗體檢測(cè)試驗(yàn)

2013年進(jìn)一步開(kāi)展母源抗體衰減試驗(yàn)。理論上M疫苗母源抗體在仔豬可以持續(xù)14周齡左右，2013年的檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)母源抗體在7周齡就衰減至只有22%為陽(yáng)性（當(dāng)時(shí)懷疑與方法有關(guān)系？）

2014年3-4月的試驗(yàn)（表2）證實(shí)當(dāng)時(shí)是操作問(wèn)題（2013年當(dāng)時(shí)的被檢樣品被稀釋40倍）。2014年3-4月的母源抗體衰減試驗(yàn)證實(shí)M苗的母源抗體可持續(xù)14周（14周60%豬只gB抗體陽(yáng)性）。通過(guò)母源抗體試驗(yàn)，表明在14周齡進(jìn)行首免是合理的。2015年進(jìn)一步抽檢部分豬場(chǎng)檢測(cè)母源抗體，驗(yàn)證使用M疫苗仔豬可在14周進(jìn)行首免（表3）。

4.3 PR疫苗的中和抗體試驗(yàn)

鑒于目前國(guó)內(nèi)各個(gè)地區(qū)的PR疫情變得復(fù)雜，周邊的感染壓力在加大，2014-2015年開(kāi)展中和抗體試驗(yàn)。針對(duì)不同疫苗（活疫苗/滅活疫苗）的組合試驗(yàn)和不同免疫方式進(jìn)行試驗(yàn)，應(yīng)用中和抗體評(píng)估疫苗的質(zhì)量和免疫程序的合理性。把試驗(yàn)血清一式三份送到3個(gè)不同省份檢測(cè)機(jī)構(gòu)，進(jìn)行PR的中和抗體檢測(cè)，3個(gè)單位的檢測(cè)結(jié)果基本一致。

4.3.1 活苗多次免疫后的中和抗體試驗(yàn)

選擇不同胎次的妊娠母豬，分兩種方法跟胎免疫。A組連續(xù)免疫3次2頭份活疫苗，B組連續(xù)3次免疫1頭份同批號(hào)的活疫苗，中和抗體的結(jié)果如表4。

4.3.2 后備豬加強(qiáng)免疫試驗(yàn)

選擇后備母豬30頭，分為兩組，A組只免疫活疫苗；B組在活疫苗的基礎(chǔ)上4周再加強(qiáng)免疫1針滅活苗，試驗(yàn)結(jié)果如表5。

4.3.3 后備豬免疫方式的對(duì)比試驗(yàn)

試驗(yàn)分兩組，每組25頭，試驗(yàn)前所有后備豬已免疫過(guò)2頭份活苗。第1組，3周后加強(qiáng)免疫1次滅活苗，4周后采血檢測(cè)中和抗體；第2組，間隔3周連續(xù)免疫2次滅活苗，3周后檢測(cè)中和抗體。檢測(cè)結(jié)果如表6。

表1 PR凈化前后對(duì)生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)的影響

表2 2014年3-4月免M疫苗后母源PRVgB抗體檢測(cè)結(jié)果

表3 2015年P(guān)R母源抗體（PRVgB）檢測(cè)結(jié)果

4.4 免疫程序優(yōu)化試驗(yàn)

因篇幅限制，不做表格。僅使用上部分試驗(yàn)結(jié)論：當(dāng)豬場(chǎng)周邊或內(nèi)部有疫情危脅時(shí)，使用滅活苗進(jìn)行加強(qiáng)免疫，能夠獲得更高的中和抗體。育肥豬使用進(jìn)口滅活苗做二免要優(yōu)于國(guó)產(chǎn)活苗（2014-2015年的試驗(yàn)數(shù)據(jù)）。

4.5 PR新感染場(chǎng)的凈化

2014-2016年3年來(lái)，與良圻公司緊密合作的部分規(guī)模豬場(chǎng)新感染了PR。按良圻公司的凈化方案，在相關(guān)技術(shù)人員的指導(dǎo)下，成功地完成了豬偽狂犬病凈化。進(jìn)一步驗(yàn)證原來(lái)的方案和措施是行之有效的。

4.5.1 案例一： 僅使用活疫苗的凈化模式（見(jiàn)表7）。

4.5.2 案例二：使用進(jìn)口滅活疫苗的凈化模式（見(jiàn)表8）

5 討論

5.1 疫苗的選擇

開(kāi)展PR的凈化，必須要篩選質(zhì)量可靠的gE基因缺失疫苗；疫苗的批間差異要小。企業(yè)必須了解并驗(yàn)證疫苗的特點(diǎn)，開(kāi)展疫苗的相關(guān)試驗(yàn)，比如疫苗的保護(hù)力試驗(yàn)、疫苗效價(jià)持續(xù)時(shí)間等。企業(yè)用上一個(gè)疫苗之后，不要輕易更換疫苗品牌，除非此疫苗出現(xiàn)質(zhì)量問(wèn)題或臨時(shí)有其他方面的特殊要求等。

5.2 疫苗免疫程序的制定與優(yōu)化

根據(jù)疫苗的特點(diǎn)，要制定適合本場(chǎng)的免疫程序。比如選擇水佐劑疫苗或油佐劑疫苗，二者抗體的持續(xù)時(shí)間會(huì)有一定的差異。母豬場(chǎng)執(zhí)行一刀切或跟胎免疫，其對(duì)應(yīng)仔豬的免疫也會(huì)有差異。這些都需要養(yǎng)殖企業(yè)根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行相應(yīng)的優(yōu)化。

5.3 企業(yè)實(shí)驗(yàn)室的建立與完善

把檢測(cè)結(jié)果第一時(shí)間服務(wù)于養(yǎng)豬生產(chǎn)，規(guī)模豬場(chǎng)的獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室必須要配置，建設(shè)在豬場(chǎng)或周邊，讓檢測(cè)結(jié)合生產(chǎn)一線(xiàn)，真正指導(dǎo)并服務(wù)于一線(xiàn)；更加有利于豬場(chǎng)日常疾病監(jiān)測(cè)或某項(xiàng)疾病的控制與凈化。

5.4 PR凈化陽(yáng)性率的界定

通常來(lái)說(shuō)，10%是較好的一個(gè)指標(biāo)。超過(guò)10%需要淘汰較多的感染豬群，有時(shí)有些豬群還處于妊娠階段，淘汰的代價(jià)是很高的，尤其是2019-2020這兩年，豬價(jià)相當(dāng)高。但10%不是固定不變的，企業(yè)可以根據(jù)自己的實(shí)際情況和市場(chǎng)情況，可以調(diào)高或降低相應(yīng)的設(shè)定陽(yáng)性比例，比如5%或15%。

5.5 PR控制與凈化中滅活疫苗的使用和全群檢測(cè)頻率

凈化開(kāi)始后，加強(qiáng)疫苗的免疫劑量和頻率，有助于減少部分潛伏感染豬只的排毒，有利于快速完成PR的凈化。通過(guò)試驗(yàn)和臨床凈化經(jīng)驗(yàn)，在活疫苗的基礎(chǔ)上，間隔2～4周加強(qiáng)免疫一針滅活疫苗，可顯著提高中和抗體水平，十分有益于豬群提高抗感染的風(fēng)險(xiǎn)，降低被感染的概率（注意滅活疫苗免疫后僅僅是降低被感染的風(fēng)險(xiǎn)；當(dāng)接觸的高含量病毒時(shí)，還是有可能被感染）。開(kāi)始凈化方案時(shí)，至少每個(gè)月要開(kāi)展一次的全群檢測(cè)，在條件許可時(shí)，最好能15 d全群檢測(cè)一次（《豬病學(xué)》第11版第560頁(yè)：IgG 抗體在感染后7 d開(kāi)始出現(xiàn)，接種后10 d開(kāi)始出現(xiàn)）。由于PR病毒在體內(nèi)排毒持續(xù)時(shí)間久（《豬病學(xué)》第11版第554頁(yè)：感染后18～25 d可以在口咽拭子中檢測(cè)到，病毒感染后1～2 d開(kāi)始散毒, 2～5 d到達(dá)高峰，可持續(xù)17 d）[4]，全群檢測(cè)至少要連續(xù)檢測(cè)3次，連續(xù)2次陰性后，才能設(shè)置崗哨豬，進(jìn)入假定陰性和驗(yàn)證階段。

表4 活苗不同劑量多次免疫后中和抗體結(jié)果

表5 后備豬加強(qiáng)免疫監(jiān)測(cè)結(jié)果

表6 后備豬不同免疫次數(shù)的中和抗體檢測(cè)結(jié)果

表7 某豬場(chǎng)PR全群檢測(cè)結(jié)果匯總

表8 某豬場(chǎng)PR全群檢測(cè)結(jié)果匯總

5.6 生物體系的完善

一般來(lái)說(shuō)疾病的凈化不是最難，更難的是凈化后的維持，繼續(xù)多年保持陰性。這就需要企業(yè)不斷地完善生物安全措施，同時(shí)根據(jù)周邊疫情情況，調(diào)整本場(chǎng)生物安全體系，能適應(yīng)周邊最新形勢(shì)的變化。如果最基本的生物安全措施都無(wú)法保障，建議先建立和完善本場(chǎng)的生物安全體系，再考慮某項(xiàng)疾病的清除與凈化工作。

6 結(jié)論

良圻原種豬場(chǎng)2003年實(shí)施的豬偽狂犬病凈化方案，通過(guò)完善并嚴(yán)格執(zhí)行生物安全措施，采用全群檢測(cè)淘汰法、加強(qiáng)豬偽狂犬病gE基因缺失疫苗免疫、不斷引入PR陰性后備種豬群和加強(qiáng)日常飼養(yǎng)管理等綜合性措施，成功地在大于6 000頭母豬的種豬場(chǎng)凈化了豬偽狂犬病。在國(guó)內(nèi)首家建立豬偽狂犬病毒感染低陽(yáng)性率的大型種豬場(chǎng)的豬偽狂犬病凈化模式，為規(guī)?；i場(chǎng)開(kāi)展豬偽狂犬病的控制與凈化提供了寶貴的經(jīng)驗(yàn)與借鑒。在此凈化方案的基礎(chǔ)上，加上對(duì)基礎(chǔ)豬群免疫滅活疫苗，可縮短基礎(chǔ)豬群PR的凈化進(jìn)程，進(jìn)而表明多年前制定的PR凈化方案依然有效。

致謝

感謝明尼蘇達(dá)大學(xué)HanSoo Joo和Bob Morrsion二位教授對(duì)良圻公司PR凈化方案的修改和指導(dǎo)，感謝閆之春博士的技術(shù)指導(dǎo)，也感謝良圻原種豬全體員工的辛苦付出，尤其是早年第二原種豬場(chǎng)全體員工和獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室全體成員不辭辛勞奮戰(zhàn)精神。