王志敬 楊慧山 葛影影

摘要 [目的]探討不同發(fā)酵時間對青貯鳳梨渣pH、亞硝酸鹽、氨態(tài)氮、可溶性糖和有機酸含量的影響。[方法]將含水量65%～75%的新鮮鳳梨渣置于體積2.0 L的密封塑料青貯容器中，分別于發(fā)酵7、14、21、28、35 d 取樣，測定其pH、氨態(tài)氮、亞硝酸鹽、可溶性糖和有機酸等指標(biāo)。[結(jié)果]青貯鳳梨渣的pH均顯著低于新鮮鳳梨渣（P<0.05），青貯21、28和35 d顯著高于7和14 d（P<0.05）;青貯鳳梨渣的亞硝酸鹽含量為3.50～11.13 mg/kg;青貯鳳梨渣的可溶性糖含量均顯著低于新鮮鳳梨渣（P<0.05），青貯28 d時顯著高于其他青貯時間（P<0.05）;青貯28、35 d時青貯鳳梨渣氨態(tài)氮濃度顯著高于21 d（P<0.05）;青貯鳳梨渣的乙酸、丙酸和乳酸含量均顯著高于新鮮鳳梨渣（P<0.05），28 d時乙酸、丙酸和乳酸含量均最高，且顯著高于7 d（P<0.05），14 d后乳酸、丙酸和乳酸含量逐步穩(wěn)定（P<0.05）;青貯鳳梨渣的丁酸含量均顯著低于新鮮鳳梨渣（P<0.05），35 d時丁酸含量最低（P<0.05）。[結(jié)論]青貯鳳梨渣的最佳青貯利用時間為28 d。

關(guān)鍵詞 鳳梨渣;青貯;有機酸;氨態(tài)氮

中圖分類號 S816.6 ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A

文章編號 0517-6611（2020）21-0100-03

Abstract [Objective]To discuss the effects of different fermentation time on pH，contents of nitrite，ammonia nitrogen，soluble sugar and organic acid in silage pineapple residue.[Method]The fresh pineapple residue with water content of 65%-75% was filled in a sealed plastic silage container with the volume of 2.0 L，samples were collected on the 7th，14th，21st，28th，and 35th days after the fermentation.And pH，nitrite，ammonia nitrogen，soluble sugar and organic acid were determined.[Result]pH of silage pineapple residue was significantly lower than that of fresh pineapple residue（P<0.05），that on the 21st，28th and 35th days after the fermentation was significantly higher than that on ?the 7th and 14th days （P<0.05）.The nitrite content of silage pineapple residue was 3.50-11.13 mg/kg.The soluble sugar content of silage pineapple residue was significantly lower than that of fresh pineapple residue（P<0.05），the soluble sugar content on the 28th day of silage was significantly higher than that on other silage time ?（P<0.05）.Ammol/Lonia nitrogen concentration in silage pineapple residue on the 28th and 35th days was significantly higher than that on the 21st day （P<0.05）. The contents of acetic acid，propionic acid and lactic acid in silage pineapple residue was significantly higher than that in fresh pineapple residue （P<0.05）.And the contents of acetic acid，propionic acid and lactic acid on the 28th day was the highest，which was significantly higher than that on the 7th day（P<0.05）.After 14 days，the contents of lactic acid，propionic acid and lactic acid were gradually stabilized （P>0.05）.The content of butyric acid in silage pineapple residue was lower than that in fresh pineapple residue （P<0.05） and that was the lowest on the 35th day （P<0.05）.[Conclusion]The optimal silage utilization time for silage pineapple residue was 28 days.

Key words Pineapple residue;Silage;Organic acid;Ammonia nitrogen

基金項目 2020年度清遠(yuǎn)市社會發(fā)展領(lǐng)域自籌經(jīng)費科技計劃項目（200805164563031）;清遠(yuǎn)市2021年度科技計劃項目專項（200511154563323）。

作者簡介 王志敬（1990—），男，安徽定遠(yuǎn)人，獸醫(yī)師，碩士，從事動物營養(yǎng)與免疫方面研究。*通信作者，副教授，博士，從事動物營養(yǎng)方面研究。

收稿日期 2020-07-15

青貯飼料是由新鮮青綠飼料（含水量為65%～75%）在密封厭氧的條件下經(jīng)過乳酸菌等厭氧發(fā)酵微生物的作用得到的一種發(fā)酵飼料。由于青貯飼料pH較低，從而可以抑制其他微生物的生長，可以長期保存，同時還具有酸香氣味、適口性好、軟柔多汁、營養(yǎng)豐富等特點，是畜禽尤其是草食家畜的重要飼料來源，青貯鳳梨渣是由鳳梨加工副產(chǎn)品（皮、渣、果肉等）經(jīng)過青貯后而得到的一種青貯飼料。

據(jù)統(tǒng)計，2015年我國鳳梨收獲面積為5.37萬hm2，鳳梨總收獲量為149.55萬t，鳳梨在加工過程中約有50%～60%的副產(chǎn)品[1]，2015年就有74.78萬～89.73萬t的鳳梨渣，如此多的鳳梨渣直接丟棄不僅對自然生態(tài)環(huán)境造成不利影響，而且還造成了資源的浪費，關(guān)于青貯時間對鳳梨渣干物質(zhì)、粗蛋白、纖維物質(zhì)和相對飼喂價值的影響已發(fā)表于草業(yè)科學(xué)。Gowda等[2]研究表明鳳梨可作為青貯飼料飼養(yǎng)綿羊或奶牛，可以提高飼料的利用率。龔霄等[3]用鳳梨皮、麩皮和干酒糟等混合后進(jìn)行發(fā)酵，結(jié)果表明氨基酸和乳酸含量顯著提高。李夢楚等[4]分析了瘤胃對不同青貯方式的青貯鳳梨渣的降解率的影響。Gowda等[2]研究表明新鮮鳳梨渣可以制作出品質(zhì)優(yōu)良的青貯飼料，對綿陽和奶牛的生產(chǎn)性能和營養(yǎng)物質(zhì)利用率無不良影響。由此可見，利用新鮮鳳梨渣制作青貯飼料并且用于動物生產(chǎn)是可行的，但目前關(guān)于鳳梨渣青貯和動物生產(chǎn)試驗相關(guān)研究較少，尤其是發(fā)酵時間對其pH、亞硝酸鹽、氨態(tài)氮、可溶性糖和有機酸的影響還未見報道。筆者探討了發(fā)酵時間對青貯鳳梨渣氨態(tài)氮、亞硝酸鹽和有機酸等指標(biāo)的影響，旨在為青貯鳳梨渣的合理利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 鳳梨渣取自廣東省徐聞縣某罐頭加工廠，切至長寬為1～3 cm大小后，自然風(fēng)干水分含量為65%～70%。

1.2 鳳梨渣的青貯 選擇2.0 L的密封塑料青貯容器，將鳳梨渣填充于塑料青貯容器中，壓實、封緊容器蓋后于避光處室溫保存。分為5組，每組3個重復(fù)，每組青貯時間分別為7、14、21、28、35 d 。

1.3 測定指標(biāo)與方法

1.3.1 pH的測定。

取發(fā)酵鮮樣10 g，加入90 mL蒸餾水，充分?jǐn)嚢韬笥? ℃下浸提24 h，用紗布過濾后用于pH的測定。

1.3.2 亞硝酸鹽、可溶性糖和氨態(tài)氮含量的測定。亞硝酸鹽含量采用鹽酸萘乙二胺法（GB 13085—1991）測定;可溶性糖含量采用蒽酮比色法測定;氨態(tài)氮含量采用蒸餾法[5]測定。

1.3.3 有機酸含量的測定。取適量“1.3.1”制備的液體稀釋至200倍，用0.22 μm濾膜過濾待上機。取25 μL樣品溶液，經(jīng)ICS-3000離子色譜儀（戴安，美國）進(jìn)行檢測。多種有機酸經(jīng)AS11分析柱（250 mm×4 mm）及AG11保護(hù)柱分離，流動相洗脫條件如下：氫氧化鉀梯度，0～5 min，0.8～1.5 mmol/L;5～10 min，1.5～2.5 mmol/L;10～15 min，2.5 mmol/L，流速為1 mL/min。

1.4 數(shù)據(jù)處理 使用Excel 2007軟件對試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行初步整理，使用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件中ANOVA 模型進(jìn)行單因素方差分析，采用Duncans多重比較進(jìn)行統(tǒng)計分析，結(jié)果均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P<0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 發(fā)酵時間對青貯鳳梨渣pH、氨態(tài)氮、亞硝酸鹽和可溶性糖含量的影響

由表1可知，青貯鳳梨渣的pH均顯著低于新鮮鳳梨渣（P<0.05），發(fā)酵21、28和35 d差異不顯著（P>0.05）;發(fā)酵14 d亞硝酸鹽含量最低（P<0.05），35 d亞硝酸鹽含量最高（P<0.05）;青貯鳳梨渣的可溶性糖含量均顯著低于新鮮鳳梨渣（P<0.05），發(fā)酵14 d可溶性糖含量最低（P<0.05），青貯鳳梨渣中以28 d可溶性糖含量最高，且顯著高于其他時間段的青貯鳳梨渣;青貯鳳梨渣的氨態(tài)氮濃度均高于新鮮鳳梨渣，發(fā)酵28、35 d顯著高于新鮮鳳梨渣（P<0.05），但2個發(fā)酵時間點間差異不顯著（P>0.05）。

2.2 發(fā)酵時間對青貯鳳梨渣有機酸含量的影響

由表2可知，青貯鳳梨渣的乙酸含量顯著高于新鮮鳳梨渣（P<0.05），分別高177.17%、206.82%、254.07%、317.85% 和206.56%;青貯鳳梨渣的丙酸含量均高于新鮮鳳梨渣，分別高311.11%（P>0.05）、394.44%（P<0.05）、530.56%（P<0.05）、611.11%（P<0.05）和422.22%（P<0.05）;青貯鳳梨渣的丁酸含量均低于新鮮鳳梨渣，發(fā)酵7 d丁酸含量與新鮮鳳梨渣差異不顯著（P>0.05），發(fā)酵14、21、28和35 d的丁酸含量均顯著低于新鮮鳳梨渣（P<0.05），且35 d丁酸含量顯著低于14、21、28 d（P<0.05）。青貯鳳梨渣的乳酸含量均顯著高于新鮮鳳梨渣（P<0.05），分別高572.77%、516.96%、680.36%、734.82%和527.23%，但各發(fā)酵時間點間差異不顯著（P>0.05）;青貯鳳梨渣的乳酸比值均顯著高于新鮮鳳梨渣，發(fā)酵7、21 d時最高（P>0.05），且顯著高于其他時間點（P<0.05）。

3 討論

3.1 發(fā)酵時間對青貯鳳梨渣pH、亞硝酸鹽、氨態(tài)氮和可溶性糖含量的影響

鳳梨渣營養(yǎng)豐富，是畜禽的優(yōu)良飼料資源[6-8]，華南地區(qū)多雨濕熱不易制作干草，青貯是華南地區(qū)合理利用鳳梨渣的重要途徑。pH是衡量青貯飼料品質(zhì)的重要指標(biāo)，只有較低的pH才能抑制微生物活動從而保持飼料養(yǎng)分。Gowda等[2]研究表明鳳梨渣經(jīng)過15 d 的發(fā)酵后即可獲得品質(zhì)較好的青貯飼料，pH為4.2～4.3，這與該試驗結(jié)果相一致，發(fā)酵14 d 時pH為4.31，21 d 時降至4.25，此后趨于穩(wěn)定。亞硝酸鹽在生態(tài)環(huán)境中廣泛存在，亞硝酸鹽可使人和動物血液內(nèi)的低鐵血紅蛋白氧化為高鐵血紅蛋白失去攜帶氧氣的能力，從而造成組織缺氧，攝入過多的亞硝酸鹽可導(dǎo)致亞硝酸鹽中毒，嚴(yán)重時可致死。亞硝酸鹽不僅危害動物機體，而且會對肉、蛋和奶等畜禽產(chǎn)品產(chǎn)生不利影響。牧草種類、貯存方式、牧草產(chǎn)區(qū)和氣候等都會對牧草的亞硝酸鹽產(chǎn)生不良影響，一般認(rèn)為青貯飼料的亞硝酸鹽含量在0～10 mg/kg 范圍內(nèi)不會對動物產(chǎn)生不良影響[9-13]。該試驗結(jié)果表明青貯鳳梨渣的亞硝酸鹽含量為3.50～11.13 mg/kg，按65%的含水量折算后亞硝酸鹽含量為2.28～7.15 mg/kg，表明青貯鳳梨渣的亞硝酸鹽在安全范圍內(nèi)。可溶性糖含量的高低是青貯成功與否的關(guān)鍵因素，一定含量的可溶性糖可為乳酸菌的代謝提供充足的能量物質(zhì)，從而有利于青貯發(fā)酵過程的進(jìn)行，因此在一定范圍內(nèi)可溶性糖含量越高青貯發(fā)酵就越容易完成[14-15]。該試驗結(jié)果表明青貯鳳梨渣的可溶性糖含量均顯著低于新鮮鳳梨渣，其主要原因是青貯期間乳酸菌活動旺盛，消耗的可溶性糖較多。青貯后期青貯鳳梨渣的可溶性糖含量呈上升的趨勢，原因可能是青貯發(fā)酵過程中部分微生物分解纖維、淀粉等物質(zhì)而使得可溶性糖含量升高。

3.2 發(fā)酵時間對青貯鳳梨渣有機酸含量的影響

青貯飼料的有機酸含量和有機酸的組成是衡量青貯飼料青貯品質(zhì)好壞的重要指標(biāo)，有機酸一般包括乙酸、丙酸、丁酸和乳酸等，其中乳酸、乙酸和丙酸含量與青貯飼料青貯品質(zhì)呈正相關(guān)，乳酸、乙酸和丙酸含量越高，青貯飼料的青貯品質(zhì)就越好。乳酸是乳酸菌代謝的產(chǎn)物，其酸性顯著高于乙酸、丙酸和丁酸等有機酸，是引起青貯飼料pH下降、穩(wěn)定青貯飼料品質(zhì)的重要因素。一般認(rèn)為乳酸含量占總酸含量的65%～70%時[12]，可判定青貯飼料的品質(zhì)為優(yōu)質(zhì)。該試驗結(jié)果表明青貯鳳梨渣的乳酸占總酸的比值均高于65%，表明青貯鳳梨渣是優(yōu)質(zhì)的青貯飼料，這與前人研究結(jié)果[2，4]相一致。青貯飼料的乳酸含量與青貯原料的含水量、發(fā)酵時間和緊實程度等有關(guān)，乙酸含量對動物生產(chǎn)和生理機能不產(chǎn)生負(fù)面作用，但可以降低青貯飼料的pH，抑制其他有害微生物的繁殖活動，從而提高青貯飼料的品質(zhì)和穩(wěn)定性。丙酸對青貯飼料的好氧穩(wěn)定性具有一定的改善功能，丙酸可以抑制好氧微生物和酵母菌的活動，因此丙酸也可作為衡量青貯飼料品質(zhì)的指標(biāo)，一般丙酸含量越高，好氣性微生物和酵母菌的活動受到抑制，青貯飼料的品質(zhì)就好[12]。該試驗結(jié)果表明，青貯7 d青貯罐內(nèi)殘留有一定濃度的氧氣，好氣性微生物活動較為活躍，丁酸抑制不大明顯。從青貯14 d開始，丙酸含量和乳酸含量呈正相關(guān)，其原因是隨著氧氣的減少好氣性微生物的活動逐步受到抑制，乳酸菌和酵母菌等在缺氧的條件下仍可繼續(xù)活動，丙酸含量高時酵母菌的活動受到抑制，乳酸菌成為主要活動菌類，所以乳酸含量高。丁酸主要是由梭狀芽胞桿菌和霉菌等腐敗菌活動產(chǎn)生的，丁酸具有腐敗臭味，一般來說丁酸含量越高，梭狀芽胞桿菌和霉菌等腐敗菌活動越頻繁，蛋白質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)降解的就越嚴(yán)重，從而判定飼料的品質(zhì)就越差。該試驗結(jié)果表明，青貯鳳梨渣的丁酸含量均顯著低于新鮮鳳梨渣，且隨著發(fā)酵時間的延長，丁酸含量逐步降低，表明鳳梨渣經(jīng)過青貯發(fā)酵后可以提高飼料品質(zhì)且有利于保持養(yǎng)分恒定和長期保存。

4 結(jié)論

青貯鳳梨渣的pH均顯著低于新鮮鳳梨渣，21 d開始趨于穩(wěn)定;青貯鳳梨渣的亞硝酸鹽含量為3.50～11.13 mg/kg，均在安全范圍內(nèi);青貯鳳梨渣的丁酸含量顯著低于新鮮鳳梨渣，乙酸、丙酸和乳酸含量均顯著高于新鮮鳳梨渣，28 d時均最高。綜上所述，青貯鳳梨渣的最佳青貯利用時間為28 d。

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