(遼寧省現代農業(yè)生產基地建設工程中心,遼寧 遼陽 111000)
絨山羊診斷技術分為常規(guī)妊娠診斷技術和非常規(guī)妊娠診斷技術兩種。常規(guī)妊娠診斷技術較為簡單,操作方便,容易掌握,便于在生產臨床上應用。非常規(guī)妊娠診斷技術由于需要必備的儀器、藥品和較高的操作水平,目前還停留在實驗室階段,只在少數情況下使用。
絨山羊母羊未妊娠時,在發(fā)情季節(jié)會定期發(fā)情和排卵,妊娠后停止發(fā)情。絨山羊母羊的發(fā)情周期平均為21 d,超過21 d沒有發(fā)情,即有可能妊娠[1]。如果配種后在一個發(fā)情周期內沒有發(fā)情,則可確定已經妊娠。母羊未妊娠時不一定在下一個情期發(fā)情(如母羊處于春季、夏季乏情季節(jié),或因疾病、瘦弱、內分泌異常等,導致發(fā)情停止),但可以肯定的是如果再次出現發(fā)情,則母羊一定未妊娠。在秋季發(fā)情期開展人工授精時,往往于母羊配種30 d或60 d后統(tǒng)計返情母羊的數量,以此來提高判定結果的準確性。
在母羊配種大約2個月后,于清晨進行空腹檢查。由一人將母羊站立保定,另一人站在母羊的后方,將兩手放在母羊的乳房前,向上緩慢托起,如發(fā)現有硬塊,則判定母羊妊娠[2]。這種方法準確性較高,但需要注意,如果檢查手法粗暴,容易造成母羊流產。
母羊妊娠后增膘較快,毛梢發(fā)亮有光澤,性情較未妊娠時溫順,采食量增加,外陰不再有黏液流出。妊娠3個月后,母羊外陰出現浮腫,外表似面團狀,比較平坦或稍有隆起。妊娠后4個月后,母羊乳房稍微隆起。妊娠4個半月至分娩前,乳房隆起比較明顯或有黃色初乳可以擠出。外陰腫脹更為明顯,常常離群尋找僻靜之所。
主要檢查母羊的陰道和子宮頸口的顏色、分泌物狀態(tài)等[3]。母羊在配種后,用開膣器打開母羊的陰道,發(fā)現陰道黏膜在開張陰道時變?yōu)樯n白色且發(fā)澀,子宮頸口蒼白,有白色膿狀分泌物堵塞頸口(子宮栓),則可確定母羊已經妊娠。這種檢查方法適用于母羊配種后的3~7 d內。
取妊娠母羊早晨的尿液20 mL,裝于試管中,加入少許醋,再加入碘酒1 mL,在火焰上慢慢加熱煮沸后觀察。妊娠母羊的尿液呈紅色,空懷母羊的尿液呈淺黃色或褐色。
母羊配種后5~8 d,給其注射促排3號 15.2 μg,若母羊發(fā)情,則為空懷羊,反之為妊娠羊。
母羊配種后1周,給其肌肉注射雌二醇2 mg,3 d內發(fā)情則為空懷羊,若不發(fā)情則為妊娠羊。
在靠近羊舍的光線偏暗的干凈場所,將母羊放倒,使其呈坐姿且后肢對著操作人員,由保定人員將母羊前肢抓穩(wěn),操作人員將耦合劑涂抹于母羊鼠蹊部的無毛區(qū),然后將探頭緊貼于鼠蹊部來回掃描數遍,同時觀察顯示屏上有無出現胎盤子葉狀黑色物質、胎兒骨骼及胎兒蠕動等[4-5]。檢查后將妊娠與未妊娠的母羊用涂料予以標記,以便做相應處理。這種診斷方法適用于母羊配種1個月以后的時間范圍內,且需要較高的B超儀使用技術和豐富的臨床解剖經驗。
令禁食一夜的母羊仰臥在保定床上,將其后腿置于能使腹部肌肉松弛的位置,用溫肥皂水灌腸(直腸內灌入肥皂水150~200 mL),以排出直腸內的宿糞。然后將涂有滑潤劑(肥皂水亦可)的探診棒(直徑1.5 cm,長45 cm,前端為圓形、光滑的塑料棒)插入肛門,貼近脊柱,向直腸內插入23~35 cm (配種后50~60 d,插入深度以 28~30 cm 為宜;70~83 d,以 31~35 cm 為宜),然后一手將探診棒的直腸外部分輕輕下壓,使直腸內一端稍微挑起,從而托起胎胞。當感覺到狀似子宮的實體有重量感或妊娠子宮在探診棒上滑動,即可判定為妊娠。插入探診棒時,如母羊出現努責即需暫停,待弛緩后再插入,以防直腸出血。對配種已滿115 d的母羊要慎用此法。
孕酮是由母畜卵巢上的黃體及胎盤產生的一種類固醇激素,能夠促進生殖道發(fā)育,給胚胎附著及發(fā)育創(chuàng)造有利條件,并使子宮能夠維持胚胎的發(fā)育。所以孕酮是維持家畜懷孕所必需的激素。通常在母羊受精后的17~24 d靜脈采血,每頭母羊每次采血1 mL,自然析出血清或經離心后加入防腐劑硫柳汞,冷凍保存24 h,其后測定孕酮濃度。此法的妊娠診斷準確率為90%,空懷診斷準確率為100%。
主要參照人的妊娠檢查方法。
母羊妊娠后,胎盤細胞會大量產生一種糖蛋白,也即絨毛膜促性腺激素(HCG)。該激素會通過孕羊的血液循環(huán)而被排泄到尿液中,因此檢測孕羊尿液中的HCG可以判斷其是否懷孕。本法于1 d內任何時間均可操作,以測定第一次晨尿效果最佳。
主要見于有關綿羊的報道,在絨山羊方面未見應用,但可以參考使用。
無菌采集5~10 mL靜脈血,置于清潔干燥的小玻璃瓶中,于室溫下靜置8~10 h后3000轉/min離心25 min。然后吸取0.5 mL被檢血清于小燒杯內,加入7.5 mL濃度為0.2 mmol/L的鹽酸,于磁力攪拌器內攪拌1~2 min使之混勻。憑借酸度計用13%(V/V)的硝酸將被檢血清的pH值滴定至0.68,滴定時間不少于5 min。然后,立即將被檢血清置于試管中靜置20 min判定結果。在透射光下觀察反應,若溶液中有乳白色絮狀物或乳黃色絮狀物,則可判定為妊娠陽性;若溶液呈乳白色或無色透明狀,則判定為未妊娠。