STAT3在ICP孕婦胎盤中的表達(dá)及臨床意義分析

陳 麗

（深圳市婦幼保健院，廣東 深圳 518028）

妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥（Intrahepatic Cholestasis in Pregnancy，ICP）主要是指特發(fā)于妊娠期女性的一種以肝臟功能紊亂為主要表現(xiàn)特征的疾病，主要臨床癥狀包括皮膚瘙癢以及血清總膽汁酸水平異常升高等，發(fā)病率為0.2%～2.0%，且隨著近年來人們生活方式的不斷改變，該病發(fā)病率有隱隱升高趨勢[1]。另有相關(guān)研究證實，作為一種妊娠期嚴(yán)重并發(fā)癥，ICP極易引發(fā)早產(chǎn)、羊水胎糞污染、新生兒窒息以及宮內(nèi)窘迫等一系列不良妊娠結(jié)局事件，繼而對母嬰生命健康造成極大的威脅[2]。ICP的發(fā)病機制較為復(fù)雜，迄今為止關(guān)于該病的具體發(fā)病機制尚存在一定爭議，不少學(xué)者認(rèn)為其可能和遺傳、內(nèi)分泌異常、免疫功能紊亂以及環(huán)境因素等密切相關(guān)[3]。且隨著研究的日益深入，越來越多的學(xué)者發(fā)現(xiàn)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄活化因子3（Signal Transduction and Transcriptional Activator 3，STAT3）可能在 ICP 的發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮著關(guān)鍵性作用，值得進(jìn)一步研究[4-5]。鑒于此，本文通過研究STAT3在ICP孕婦胎盤中的表達(dá)及臨床意義，旨在為臨床ICP的診治提供一種新的靶點和思路。

1 對象與方法

1.1 一般資料

將2019年1—12月醫(yī)院收治的60例ICP孕婦納入研究，記作病變組。年齡20～40歲，平均（28.33±4.31）歲；孕周37～42周，平均（39.59±1.44）周；初產(chǎn)婦39例，經(jīng)產(chǎn)婦21例；受教育程度：大專以下14例，大專及以上46例。另取同期在我院接受規(guī)律性產(chǎn)檢的健康順產(chǎn)孕婦60例作為對照組。年齡21～38歲，平均（28.19±4.22）歲；孕周 37～41 周，平均（39.24±1.34）周；初產(chǎn)婦36例，經(jīng)產(chǎn)婦24例；受教育程度：大專以下12例，大專及以上48例。兩組上述各項指標(biāo)比較差異不顯著（P＞0.05），均衡可比。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）所有病變組孕婦均與中華醫(yī)學(xué)會婦產(chǎn)科學(xué)分會2015年制定的ICP診療指南[6]中所制定的ICP相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)相符；（2）年齡均在18周歲以上；（3）臨床病歷資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并肝炎病毒、巨細(xì)胞病毒或EB病毒感染者；（2）無法正常交流溝通或存在精神疾病者；（3）正接受其他研究者。所有受試者及其家屬均在知情同意書上簽字，同時本研究獲得了醫(yī)院倫理委員會的批準(zhǔn)。

1.2 研究方法

采用免疫組織化學(xué)法檢測兩組胎盤組織中的STAT3和IL-6以及TNF-α表達(dá)水平：待胎盤娩出后10 min內(nèi)取絨毛組織，采用生理鹽水沖洗擦干后置于10%甲醛中固定1～2 d后，通過乙醇梯度脫水，二甲苯透明，石蠟包埋后實施免疫組織化學(xué)檢測。具體操作務(wù)必以試劑盒說明書為準(zhǔn)，相關(guān)試劑盒購自武漢博士德生物工程有限公司。此外，通過Imagepro-plus 6.0專業(yè)圖像分析軟件（購自美國Media cybernetics公司）完成光密度的分析。

1.3 評價指標(biāo)

比較兩組STAT3細(xì)胞陽性率與平均光密度值，IL-6以及TNF-α細(xì)胞陽性率與平均光密度值。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 22.0軟件分析，計數(shù)及計量數(shù)據(jù)用%、（±s）表示，且分別實施χ2及t檢驗。以Pearson相關(guān)性分析方法分析ICP孕婦胎盤中STAT3和IL-6、TNF-α表達(dá)水平的關(guān)系。以受試者工作特征（ROC）曲線分析胎盤中STAT3和IL-6、TNF-α表達(dá)水平診斷ICP孕婦的效能。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組STAT3細(xì)胞陽性率與平均光密度值比較

病變組STAT3細(xì)胞陽性率與平均光密度值均高于對照組（均 P＜0.05，見表 1）。

表1 兩組STAT3細(xì)胞陽性率與平均光密度值對比

2.2 兩組IL-6以及TNF-α細(xì)胞陽性率與平均光密度值比較

病變組IL-6及TNF-α細(xì)胞陽性率與平均光密度值均高于對照組（均 P＜0.05，見表 2）。

表2 兩組IL-6及TNF-α細(xì)胞陽性率與平均光密度值對比

2.3 病變組孕婦胎盤中STAT3和IL-6、TNF-α水平的相關(guān)性分析

經(jīng)Pearson相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，病變組孕婦胎盤中STAT3和IL-6、TNF-α 水平均呈正相關(guān)關(guān)系（均 P＜0.05，見表 3）。

表3 病變組孕婦胎盤中STAT3和IL-6、TNF-α水平的相關(guān)性分析

2.4 胎盤中STAT3和IL-6、TNF-α水平診斷ICP的ROC曲線分析

經(jīng)ROC曲線分析可知，胎盤中STAT3和IL-6、TNF-α水平聯(lián)合檢測診斷ICP的曲線下面積、敏感度以及特異度均高于上述3項指標(biāo)單獨檢測（均P＜0.05，見表4）。

表4 胎盤中STAT3和IL-6、TNF-α水平診斷ICP的ROC曲線分析

3 討論

3.1 ICP的診斷及與細(xì)胞因子的關(guān)系

ICP作為妊娠期特發(fā)并發(fā)癥之一，會導(dǎo)致患者出現(xiàn)皮膚瘙癢、失眠、惡心等癥狀，繼而對其日常生活及工作產(chǎn)生極大影響[7-9]。因此，如何有效早期診斷并治療ICP顯得尤為重要。既往，臨床上主要是通過血清膽酸測定、肝功能檢測以及組織病理學(xué)檢查等手段診斷ICP。前兩者受多種因素的影響，各自存在一定的假陽性和假陰性，而組織病理學(xué)檢查屬于有創(chuàng)檢查，存在一定的局限性。因此，尋找一種有效的早期準(zhǔn)確診斷ICP的方式顯得尤為重要。STAT3可被多種細(xì)胞因子、生長因子以及其他刺激因素激活，繼而調(diào)節(jié)多種細(xì)胞因子的表達(dá)，可參與細(xì)胞增殖、凋亡以及分化等過程[10-12]。目前，已有學(xué)者發(fā)現(xiàn)細(xì)胞因子信號傳導(dǎo)負(fù)調(diào)控因子3參與了ICP的發(fā)生過程，而關(guān)于STAT3在ICP患者胎盤中表達(dá)的相關(guān)研究并不多見，具有較高的臨床研究價值[13-15]。

3.2 ICP孕婦胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞中STAT3細(xì)胞陽性率與平均光密度值升高

本文結(jié)果發(fā)現(xiàn)，病變組STAT3細(xì)胞陽性率與平均光密度值均高于對照組。這在葉云飛等的研究中得到了佐證[16]，提示ICP孕婦胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞中的STAT3細(xì)胞陽性率與平均光密度值均明顯高于健康順產(chǎn)孕婦。說明STAT3可能在ICP的發(fā)生、發(fā)展過程中起著至關(guān)重要的作用。分析原因，筆者認(rèn)為STAT3可被多種細(xì)胞因子、生長因子以及其他刺激因素激活，繼而發(fā)揮相關(guān)作用，其中激活的STAT3可有效調(diào)控多種細(xì)胞因子的表達(dá)水平，進(jìn)一步在細(xì)胞的增殖、凋亡以及分化等多種生理過程中起著至關(guān)重要的作用。

3.3 ICP孕婦胎盤中IL-6以及TNF-α細(xì)胞陽性率與平均光密度值升高

病變組IL-6以及TNF-α細(xì)胞陽性率與平均光密度值均高于對照組。這和既往相關(guān)研究相似[17]：IL-6以及TNF-α在ICP孕婦胎盤中存在明顯高表達(dá)，可能介導(dǎo)了ICP的發(fā)生、發(fā)展過程。究其原因，IL-6主要是源自淋巴細(xì)胞以及單核巨噬細(xì)胞分泌而來的一種炎性細(xì)胞因子，具有廣泛的生物學(xué)作用，可通過誘導(dǎo)B細(xì)胞分化以及免疫球蛋白的合成、分娩，繼而刺激T細(xì)胞的增殖、生長。同時，IL-6可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞合成以及分泌黏附分子，進(jìn)一步起到損傷作用，從而刺激ICP的發(fā)生、發(fā)展。而TNF-α存在雙重生物學(xué)效應(yīng)，在正常生理狀態(tài)下可介導(dǎo)機體的免疫防護(hù)，而在病理狀態(tài)下TNF-α的大量合成、分泌會對機體造成免疫損傷。后者已被證實在孕婦ICP等多種病理性妊娠反應(yīng)中起著至關(guān)重要的作用，因此，TNF-α水平的檢測可能有利于ICP的診斷以及病情評估[18]。

3.4 ICP孕婦胎盤中STAT3與IL-6、TNF-α呈正相關(guān)關(guān)系

經(jīng)Pearson相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，病變組孕婦胎盤中STAT3和IL-6、TNF-α水平均呈正相關(guān)關(guān)系，這提示STAT3和IL-6、TNF-α可能與孕婦ICP的發(fā)生、發(fā)展過程密切相關(guān)。其中STAT3可有效促進(jìn)TNF-α以及IL-6大量合成、釋放，繼而可促進(jìn)JAK/STAT信號通路的活化，進(jìn)一步對JAK/STAT信號通路產(chǎn)生“正反饋”調(diào)節(jié)，從而促使炎癥級聯(lián)反應(yīng)逐漸加劇，最終促進(jìn)了ICP的發(fā)生、發(fā)展[19]。

3.5 胎盤中STAT3和IL-6、TNF-α對ICP的聯(lián)合診斷效果較好

本文中經(jīng)ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，胎盤中STAT3和IL-6、TNF-α水平聯(lián)合檢測診斷ICP的曲線下面積、敏感度以及特異度均高于上述3項指標(biāo)單獨檢測結(jié)果。這提示在臨床實際工作中可以通過聯(lián)合檢測上述3項指標(biāo)表達(dá)水平，繼而達(dá)到輔助診斷ICP的目的。此外，陳忠等的研究發(fā)現(xiàn)[20]，IL-6、TNF-α以及血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）在ICP早期檢測中具有極其重要的意義，和本研究存在一定的不同之處：該研究并未對STAT3和ICP的關(guān)系進(jìn)行研究，反而研究了VEGF和ICP的關(guān)系。這為今后的研究提供了新的方向，可以通過研究STAT3和IL-6、TNF-α、VEGF水平在ICP早期檢測中的價值，繼而為臨床ICP的診治提供更為可靠的參考依據(jù)。

4 結(jié)語

STAT3于ICP孕婦胎盤中存在異常高表達(dá)，有望成為臨床診斷ICP的潛在生物學(xué)標(biāo)志物之一，且在和IL-6以及TNF-α聯(lián)合檢測時，在一定程度上提高了診斷ICP的效能，值得在臨床工作中重點關(guān)注。