趙 磊， 段旭彤， 王夏璐， 鄒積宏*

(1.黑龍江大學(xué) 農(nóng)業(yè)微生物技術(shù)教育部工程研究中心， 黑龍江 哈爾濱 150500; 2.黑龍江大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院/黑龍江省普通高校微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，黑龍江 哈爾濱 150080; 3.沈陽(yáng)藥科大學(xué) 生命科學(xué)與生物制藥學(xué)院，遼寧 沈陽(yáng) 110016; 4.沈陽(yáng)藥科大學(xué) 醫(yī)療器械學(xué)院，遼寧 沈陽(yáng) 110016)

昆蟲(chóng)在自然界中分布廣泛，種類繁多，不具備獲得性免疫而僅依賴進(jìn)化保守的先天性免疫應(yīng)答抵御病害，從而維持機(jī)體自身的平衡[1]。昆蟲(chóng)先天性免疫系統(tǒng)由體液免疫和細(xì)胞免疫組成。其中，體液免疫主要包括由酚氧化酶原激活系統(tǒng)(Prophenoloxidase activating system, PPO-AS)介導(dǎo)的黑化反應(yīng)及由Toll、免疫缺陷(immune deficiency, IMD)、JAK/STAT等信號(hào)通路介導(dǎo)的抗菌肽合成；細(xì)胞免疫包括由血細(xì)胞參與的吞噬、包囊、結(jié)節(jié)形成等。2種免疫反應(yīng)相輔相成、協(xié)同合作，共同防御真菌、病毒、細(xì)菌等病原微生物的侵染[2-3]。

隨著對(duì)昆蟲(chóng)先天性免疫系統(tǒng)了解的不斷深入，研究發(fā)現(xiàn)，免疫應(yīng)答反應(yīng)強(qiáng)烈的昆蟲(chóng)有時(shí)會(huì)出現(xiàn)腸道菌群紊亂、神經(jīng)退變、生存期縮短等現(xiàn)象[4-5]。究其原因，發(fā)現(xiàn)與昆蟲(chóng)免疫應(yīng)答的過(guò)度激活相關(guān)。以PPO-AS介導(dǎo)的黑化反應(yīng)為例，當(dāng)病原體入侵誘導(dǎo)昆蟲(chóng)體內(nèi)PPO-AS激活后，適量產(chǎn)生的黑色素可將入侵病原體包裹起來(lái)以防止其在昆蟲(chóng)體內(nèi)擴(kuò)散和繁殖，并通過(guò)形成的黑色素將病原菌殺死，對(duì)機(jī)體起到保護(hù)作用。當(dāng)黑化反應(yīng)過(guò)度激活時(shí)，過(guò)量產(chǎn)生的奎寧等物質(zhì)將對(duì)昆蟲(chóng)自身的組織功能造成損傷，甚至導(dǎo)致死亡[6]。因此，昆蟲(chóng)免疫應(yīng)答的激活強(qiáng)度和持續(xù)時(shí)間必須受到嚴(yán)格和精密的調(diào)控。近年來(lái)，昆蟲(chóng)免疫負(fù)向調(diào)控機(jī)制及其相關(guān)調(diào)控因子逐漸成為免疫學(xué)研究的熱點(diǎn)。目前，已發(fā)現(xiàn)并鑒定出多種昆蟲(chóng)免疫負(fù)向調(diào)控因子，根據(jù)調(diào)控的不同免疫階段，從絲氨酸蛋白酶級(jí)聯(lián)放大系統(tǒng)的負(fù)向調(diào)控、昆蟲(chóng)體液免疫蛋白類效應(yīng)分子合成與降解的負(fù)向調(diào)控和昆蟲(chóng)體液免疫模式識(shí)別過(guò)程的負(fù)向調(diào)控3個(gè)方面對(duì)昆蟲(chóng)體液免疫負(fù)向調(diào)控因子的研究進(jìn)展進(jìn)行了概述，以期為昆蟲(chóng)免疫防御的調(diào)控研究及應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。

1 絲氨酸蛋白酶級(jí)聯(lián)系統(tǒng)的負(fù)向調(diào)控

絲氨酸蛋白酶級(jí)聯(lián)放大系統(tǒng)是由昆蟲(chóng)體內(nèi)游離的絲氨酸蛋白酶(Serine proteases，SPs)逐級(jí)激活形成的級(jí)聯(lián)放大系統(tǒng)，激活迅速、反應(yīng)靈敏。當(dāng)SPs級(jí)聯(lián)系統(tǒng)被激活后，微弱的病原體入侵信號(hào)被級(jí)聯(lián)反應(yīng)快速放大并向下游傳遞，末端活化的絲氨酸蛋白酶或剪切無(wú)活性的酚氧化酶原(Prophenoloxidase，PPO)為有活性的酚氧化酶(Phenoloxidase，PO)，催化黑色素的產(chǎn)生，抵御病原體的入侵；或通過(guò)激活Toll通路誘導(dǎo)抗菌肽的生成以消滅病原菌[7]。而靶向絲氨酸蛋白酶的抑制劑則在此過(guò)程中通過(guò)調(diào)控SPs的活性，將免疫反應(yīng)限定在一個(gè)安全的范圍內(nèi)，避免了宿主的過(guò)度免疫。研究發(fā)現(xiàn)，靶向絲氨酸蛋白酶的抑制劑有絲氨酸蛋白酶抑制劑(Serine proteinase inhibitors，Serpins)和Kunitz型蛋白酶抑制劑(Kunitz-type protease inhibitors，KPIs)。

1.1 絲氨酸蛋白酶抑制劑

1.1.1 Serpins結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與作用機(jī)制 Serpins是蛋白酶抑制劑中數(shù)量最多的一個(gè)家族。根據(jù)其功能不同可分為抑制型Serpins和非抑制型Serpins。其中，抑制型Serpins具有相似的結(jié)構(gòu)特征，通常由350～500個(gè)氨基酸組成，分子量約40～50 kDa，其結(jié)構(gòu)主要由保守的蛋白主體(α螺旋、β-折疊)及具有靶酶特異性識(shí)別位點(diǎn)(P1)的反應(yīng)中心環(huán)(reactive center loop，RCL)組成[8]。抑制型Serpins不僅結(jié)構(gòu)相似，對(duì)絲氨酸蛋白酶的抑制機(jī)制也大致相同。通常情況下，蛋白酶可與Serpins RCL上的剪切位點(diǎn)(P1-P1’)結(jié)合，形成過(guò)渡態(tài)米氏復(fù)合物。隨后，RCL上P1端的氨基酸與蛋白酶之間形成共價(jià)鍵，導(dǎo)致P1-P1’間的肽鍵斷裂，經(jīng)過(guò)系列結(jié)構(gòu)變化，最終形成穩(wěn)定的Serpin-蛋白酶復(fù)合物，通過(guò)致使靶酶失活而發(fā)揮抑制作用，這種作用機(jī)制即被稱為自殺性抑制[9]。

1.1.2 Serpins對(duì)昆蟲(chóng)體液免疫的負(fù)向調(diào)控作用 目前，已在昆蟲(chóng)中鑒定出1 500余種Serpins超家族成員，大多數(shù)Serpins主要功能是抑制絲氨酸蛋白酶或半胱氨酸蛋白酶的活性，進(jìn)而參與昆蟲(chóng)免疫應(yīng)答的負(fù)向調(diào)控過(guò)程。但非抑制型Serpins則不具有自殺性抑制絲氨酸蛋白酶活性的功能，通常作為儲(chǔ)藏蛋白、激素的前體、激素轉(zhuǎn)運(yùn)體及輔助蛋白折疊的分子伴侶等行駛生理功能[10-11]。目前，Serpins針對(duì)生理發(fā)育的相關(guān)功能已在絕大多數(shù)昆蟲(chóng)中得到廣泛研究，但其免疫相關(guān)功能僅在果蠅、煙草天蛾和黃粉蟲(chóng)等少數(shù)昆蟲(chóng)中較為明確。研究發(fā)現(xiàn)，Serpins主要通過(guò)抑制昆蟲(chóng)絲氨酸蛋白酶級(jí)聯(lián)放大系統(tǒng)特定游離靶酶的活性進(jìn)而對(duì)體液免疫應(yīng)答起負(fù)向調(diào)控作用。

在果蠅中發(fā)現(xiàn)多種Serpins參與調(diào)節(jié)先天性免疫應(yīng)答。其中，Serpin-77Ba可以抑制PPO-AS中黑化作用蛋白酶MP1和MP2的活性，從而抑制黑色素的形成；Serpin-27A通過(guò)與酚氧化酶原激活酶(prophenoloxidase-activating enzyme，PPAE)共價(jià)結(jié)合來(lái)抑制黑化反應(yīng)；Serpin-28D可抑制PPO的剪切激活從而抑制PPO-AS，Serpin43Ac與Toll途徑負(fù)調(diào)控相關(guān)[12-15]。

在黃粉蟲(chóng)中，病原體分子模式和模式識(shí)別蛋白復(fù)合體激活模塊化絲氨酸蛋白酶(Modular serine protease，MSP)后，向下順序激活Sp?tzle激活酶(Sp?tzle activating enzyme，SAE)和Sp?tzle加工酶(Sp?tzle-processing enzyme，SPE)[16]。SPE作為此通路的末端絲氨酸蛋白酶，不僅可直接激活Pro-Sp?tzle，活化的Sp?tzle與細(xì)胞膜受體Toll結(jié)合，促使Toll信號(hào)傳導(dǎo)途徑的激活；還可剪切活化PPO，誘導(dǎo)PPO-AS的激活，形成黑化反應(yīng)。現(xiàn)已研究證實(shí)，Serpin-40、-55和-48可分別與上述絲氨酸蛋白酶形成共價(jià)復(fù)合物，即Serpin-40/MSP、Serpin-55/SAE和Serpin-48/SPE，通過(guò)抑制三步絲氨酸蛋白酶級(jí)聯(lián)反應(yīng)對(duì)Toll信號(hào)傳導(dǎo)途徑和PPO-AS起到負(fù)向調(diào)控作用。

在煙草天蛾中，已發(fā)現(xiàn)10余種抑制型Serpins。其中，Serpin-1J不僅通過(guò)抑制血淋巴蛋白酶HP8的活性降低Toll信號(hào)傳導(dǎo)通路的激活程度，還可與酚氧化酶原激活酶PAP-1和PAP-3共價(jià)結(jié)合，對(duì)PPO-AS起到負(fù)向調(diào)控作用；Serpin-3能通過(guò)抑制PAP-1和PAP-3的活性來(lái)負(fù)向調(diào)控PPO的剪切激活；Serpin-4和Serpin-5對(duì)HP6均具有抑制作用，且Serpin-4還可抑制HP21的活性進(jìn)而負(fù)向調(diào)控PPO-AS的激活；Serpin-6和Serpin-7可抑制PAP-3的活性從而對(duì)煙草天蛾的黑化反應(yīng)起到負(fù)向調(diào)控作用；Serpin-6和Serpin-9能夠與HP8共價(jià)結(jié)合，通過(guò)抑制Toll通路抑制抗菌肽的合成；Serpin-9和Serpin-13通過(guò)封閉SPs級(jí)聯(lián)反應(yīng)中的HP6活性抑制PPO-AS和Toll通路的激活；Serpin-12則可與HP14共價(jià)結(jié)合進(jìn)而抑制PPO的激活，目前，煙草天蛾中僅Serpin-2尚未發(fā)現(xiàn)具有免疫相關(guān)功能[17-20]。

隨著研究的深入，Serpins在其他鱗翅目昆蟲(chóng)物種中的免疫相關(guān)功能也被陸續(xù)被發(fā)現(xiàn)。如，家蠶中，Serpin5通過(guò)與HP6和SP21形成復(fù)合物，抑制PPO-AS和Toll通路的活性；Serpin-32通過(guò)抑制PAP-3的剪切激活從而抑制黑化反應(yīng)的發(fā)生；Serpin6和Serpin15均能抑制PPO的活化和抗菌肽的表達(dá)，Serpin28則抑制抗菌肽的合成，但其具體的作用機(jī)制尚不可知[21-25]。柞蠶Serpin-6和Serpin-14可抑制其體內(nèi)的黑化反應(yīng)，調(diào)控由病原體侵染介導(dǎo)機(jī)體的免疫激活程度[26-27]。柞蠶Serpin-3在抑制PPO激活的同時(shí)，還可以抑制Toll通路的關(guān)鍵蛋白Sp?tzle及多種抗菌肽的產(chǎn)生[7]。但目前家蠶及柞蠶等昆蟲(chóng)中多數(shù)Serpins的靶酶尚未確定。此外，CHU等[28]在亞洲玉米螟中克隆得到Serpin-3 cDNA全序列的研究表明，其與絲氨酸蛋白酶SP13形成復(fù)合物，從而抑制真菌誘導(dǎo)的PPO-AS及抗菌肽的表達(dá)。另一方面，YUAN等[29]在棉鈴蟲(chóng)中利用蛋白質(zhì)組學(xué)和免疫印跡分析發(fā)現(xiàn)，在桿狀病毒感染后，Serpin-5及Serpin-9的表達(dá)量升高，說(shuō)明其與病毒介導(dǎo)的免疫應(yīng)答相關(guān)；進(jìn)一步試驗(yàn)證明，Serpin-5和Serpin-9分別通過(guò)抑制絲氨酸蛋白酶cSP4和cSP6來(lái)調(diào)節(jié)黑化反應(yīng)進(jìn)而抑制病毒感染。

1.2 Kunitz型蛋白酶抑制劑

1.2.1 KPIs結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與作用機(jī)制 KPIs是動(dòng)植物在長(zhǎng)期進(jìn)化過(guò)程中所形成的一類抑制性多肽，因1945年由Kunitz首次從大豆中分離而得名，在昆蟲(chóng)的生存和發(fā)育過(guò)程中具有重要作用。KPIs家族成員的氨基酸序列同源性較高，空間結(jié)構(gòu)相對(duì)較保守，通常含有一個(gè)獨(dú)特的Kunitz結(jié)構(gòu)域，由2對(duì)或3對(duì)高度保守的二硫鍵維持蛋白的空間結(jié)構(gòu)，但也有部分KPIs只有1對(duì)甚至不含有二硫鍵，推測(cè)其依賴氫鍵來(lái)維持結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定[30-31]。KPIs通常呈β-三葉草形狀，其抑制中心突出于三維結(jié)構(gòu)的表面且可通過(guò)深入到靶酶的底物口袋，形成穩(wěn)定的靶酶-抑制劑復(fù)合物來(lái)封閉靶酶的活性中心，從而抑制胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶等絲氨酸蛋白酶的活性[32]。

1.2.2 KPIs對(duì)昆蟲(chóng)體液免疫的負(fù)向調(diào)控作用 迄今為止，在昆蟲(chóng)中已發(fā)現(xiàn)多種KPIs。RAMESH 等[33]從煙草天蛾中鑒定出2種KPIs(HLTIs A和B)，其不僅可以抑制血淋巴中PPO的激活，還可保護(hù)昆蟲(chóng)免受入侵寄生蟲(chóng)所分泌的蛋白酶所侵害。蓖子硬蜱絲氨酸蛋白酶抑制劑IrSPI也是一種Kunitz型抑制劑，其可降低T淋巴細(xì)胞的增殖能力及促炎細(xì)胞因子的分泌，從而調(diào)節(jié)宿主的免疫應(yīng)答反應(yīng)[34]。亞洲璃眼蜱11 kDa蛋白HA11具有抗凝血的作用，相同現(xiàn)象也在果蠅中被發(fā)現(xiàn)；用細(xì)菌或真菌感染果蠅，可使其體內(nèi)兩種KPIs的表達(dá)量增加，說(shuō)明KPIs具有免疫相關(guān)性，可能參與果蠅的免疫應(yīng)答[35-36]。盡管上述KPIs凝血作用的抗凝作用機(jī)制目前還不明確，但可以此為基礎(chǔ)開(kāi)發(fā)新型的抗凝藥物和防治寄生蟲(chóng)疫苗。此外，美洲鉤蟲(chóng)中發(fā)現(xiàn)的NaKuI3可通過(guò)抑制絲氨酸蛋白酶的活性進(jìn)而抑制宿主的炎癥反應(yīng)和免疫應(yīng)答[37]。當(dāng)變異革蜱中被立克次氏體感染時(shí)，KPI在中腸的表達(dá)量持續(xù)增加，體外試驗(yàn)也證明變異革蜱中的KPI可影響小鼠成纖維細(xì)胞的立克次氏定殖，推測(cè)這可能與KPIs胰蛋白酶抑制能力有關(guān)[38]。

2 昆蟲(chóng)體液免疫蛋白類效應(yīng)分子合成與降解的負(fù)向調(diào)控

2.1 對(duì)IMD通路的負(fù)向調(diào)控

對(duì)昆蟲(chóng)免疫效應(yīng)分子合成的抑制也是針對(duì)體液免疫負(fù)向調(diào)控的重要手段之一。胡杰等[39]從家蠶中鑒定得到的Caspase-8-Like蛋白可通過(guò)抑制家蠶轉(zhuǎn)錄因子Relish的切割，通過(guò)負(fù)調(diào)控IMD信號(hào)通路來(lái)抑制抗菌肽基因(如Cecropin A1)的表達(dá)。在果蠅中發(fā)現(xiàn)2種可能對(duì)IMD通路具有負(fù)調(diào)控作用的因子：一是鋅指同源結(jié)構(gòu)域zfh1，當(dāng)敲除果蠅S2細(xì)胞中的zfh1后，IMD通路介導(dǎo)的抗菌肽Cecropin B表達(dá)量增加，但Toll通路介導(dǎo)的Drosomycin表達(dá)卻不受影響[40]；二是潛在的免疫效應(yīng)分子合成負(fù)向調(diào)控因子是Morris等在果蠅中發(fā)現(xiàn)的一種I κB超家族蛋白Pickle，其可通過(guò)與Relish和組蛋白去乙?；竏HDAC1相互作用，抑制IMD通路的過(guò)度激活。但當(dāng)Toll和IMD通路同時(shí)激活時(shí)，Pickle只影響由RelN驅(qū)動(dòng)的抗菌肽的誘導(dǎo)[41]。目前，上述2因子的負(fù)向調(diào)控具體機(jī)制尚不清楚。

2.2 泛素化和去泛素化酶的負(fù)向調(diào)控

平衡泛素化和去泛素化之間的關(guān)系對(duì)調(diào)節(jié)昆蟲(chóng)免疫信號(hào)通路尤為重要。現(xiàn)已研究證實(shí)：一些泛素化和去泛素化酶對(duì)體液免疫效應(yīng)分子的轉(zhuǎn)錄過(guò)程具有負(fù)調(diào)控作用。例如，果蠅中的去泛素酶Trabid可與TAK1相互作用，降低免疫信號(hào)輸出和k63連接的泛素化，從而抑制IMD信號(hào)通路[42]；去泛素化酶Fas相關(guān)因子(Fas associated factor，F(xiàn)AF)可誘導(dǎo)IMD的多泛素化，從而抑制IMD通路中抗菌肽Diptericin的表達(dá)[43]。而家蠶FAF則通過(guò)與Relish結(jié)合并促進(jìn)其降解，最終抑制IMD信號(hào)通路的激活[44]。

3 昆蟲(chóng)體液免疫模式識(shí)別過(guò)程的負(fù)向調(diào)控

模式識(shí)別受體對(duì)外來(lái)入侵者的免疫識(shí)別被認(rèn)為是啟動(dòng)先天性免疫系統(tǒng)進(jìn)而產(chǎn)生信號(hào)傳導(dǎo)的“開(kāi)門磚”，但也有研究表明，一些模式識(shí)別受體不僅能識(shí)別病原菌表面的模式分子介導(dǎo)免疫反應(yīng)的激活，還可通過(guò)抑制其他模式識(shí)別受體的模式識(shí)別能力的方式對(duì)昆蟲(chóng)體液免疫起到負(fù)向調(diào)節(jié)作用。然而關(guān)于模式識(shí)別過(guò)程負(fù)向調(diào)節(jié)昆蟲(chóng)免疫的研究甚少，目前僅對(duì)肽聚糖模式識(shí)別蛋白(Peptidoglycan recognition proteins，PGRPs)超家族成員參與調(diào)控體液免疫應(yīng)答的研究相對(duì)較為清楚。果蠅體內(nèi)存在多種PGRPs，根據(jù)分子量大小將其分為長(zhǎng)型和短型PGRPs，即：PGRP-Ls和PGRP-Ss。多數(shù)果蠅PGRPs可通過(guò)識(shí)別入侵細(xì)菌表面的典型PAMP-PGN啟動(dòng)先天性免疫應(yīng)答，但也有一些PGRPs卻對(duì)體液免疫信號(hào)通路起到抑制作用。例如，PGRP-LF可與Imd途徑的主要跨模型PRR-PGRP-LC形成異二聚體，通過(guò)阻止PGRP-LC識(shí)別PGN進(jìn)而負(fù)向調(diào)控由Imd途徑介導(dǎo)的抗菌肽轉(zhuǎn)錄[45]；此外，PGRP-LB、-SB和-SC還可利用其自身酰胺酶活性促使PGN裂解，通過(guò)降低入侵PGN的激活濃度進(jìn)而下調(diào)PGRP-LC模式識(shí)別的方式抑制Imd通路的激活[46-47]。

4 問(wèn)題與展望

4.1 問(wèn)題

多樣的免疫負(fù)向調(diào)控因子及其精準(zhǔn)的調(diào)控機(jī)制是昆蟲(chóng)既能抵御病原微生物入侵威脅又能正常生理發(fā)育的重要保障。雖目前已在昆蟲(chóng)免疫抑制劑研究方面取得了階段性進(jìn)展，但有關(guān)昆蟲(chóng)體液免疫負(fù)向調(diào)控的相關(guān)理論仍有許多問(wèn)題尚不清楚。具體內(nèi)容可分為如下幾方面：

首先，絲氨酸蛋白酶級(jí)聯(lián)系統(tǒng)是PPO-AS介導(dǎo)的黑化反應(yīng)，是由Toll、IMD途徑介導(dǎo)的抗菌肽合成兩大體液免疫反應(yīng)胞外激活途徑的重要組成部分。目前已鑒定出許多具有針對(duì)上述級(jí)聯(lián)系統(tǒng)的Serpins類和KPIs類免疫抑制劑，但有關(guān)兩者的研究尚不夠深入。就Serpins而言，除黃粉蟲(chóng)和煙草天蛾外，絕大多數(shù)昆蟲(chóng)體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的Serpins參與調(diào)控的具體免疫信號(hào)通路及其共價(jià)抑制的靶酶類型仍不清楚。而作為發(fā)現(xiàn)數(shù)量?jī)H次于Serpins的KPIs類抑制劑，絕大多數(shù)相關(guān)研究尚處于免疫抑制現(xiàn)象發(fā)現(xiàn)階段，目前尚無(wú)明確闡述其抑制靶酶、參與調(diào)控體液免疫應(yīng)答的類型及調(diào)控具體分子機(jī)制的相關(guān)研究報(bào)道。

其次，對(duì)入侵病原體的模式識(shí)別是啟動(dòng)昆蟲(chóng)免疫應(yīng)答的物質(zhì)基礎(chǔ)，“病原體-模式識(shí)別受體”復(fù)合物的形成數(shù)量及親和力大小直接決定激活免疫反應(yīng)的強(qiáng)度和時(shí)間，所以針對(duì)模式識(shí)別過(guò)程的抑制因子也可被認(rèn)為是一種有效的昆蟲(chóng)免疫抑制劑。然而，目前這部分內(nèi)容的相關(guān)研究甚少，但由果蠅PGRPs的研究結(jié)果可以推測(cè)：昆蟲(chóng)體內(nèi)的某些模式識(shí)別受體可能在特定情況下也充當(dāng)“免疫抑制劑”的角色。

最后，信號(hào)通路激活所產(chǎn)生的免疫效應(yīng)分子是清除入侵病原體的直接殺傷利器。抑制免疫效應(yīng)分子的數(shù)量及其活性也屬于免疫反應(yīng)負(fù)向調(diào)節(jié)的一種有效方式，但目前針對(duì)此部分內(nèi)容的研究幾乎空白。其中，針對(duì)抗菌肽合成抑制劑的相關(guān)研究，可將重點(diǎn)鎖定在介導(dǎo)抗菌肽激活的Toll、IMD和JAK/STAT途徑胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)通路，發(fā)現(xiàn)并鑒定的細(xì)胞核中針對(duì)抗菌肽轉(zhuǎn)錄具有抑制作用的細(xì)胞因子；而針對(duì)抗黑色素形成相關(guān)抑制劑的研究，則需在深入了解黑色素形成的機(jī)制并鎖定其形成所必需的關(guān)鍵物質(zhì)基礎(chǔ)上，尋找體液中針對(duì)各種關(guān)鍵蛋白的抑制劑。

4.2 展望

抗病蟲(chóng)害一直是動(dòng)植物科學(xué)領(lǐng)域的熱門研究話題，目前已研制出多種有效的農(nóng)業(yè)和畜牧業(yè)殺蟲(chóng)劑，但這些產(chǎn)品由不同的活性成分組成，大多數(shù)活性成分為化學(xué)物質(zhì)，此類藥物雖殺蟲(chóng)效果良好，但藥物殘留、環(huán)境污染、耐藥性等問(wèn)題也日益突出。因此，尋找并研發(fā)新型無(wú)害無(wú)污染殺蟲(chóng)劑成為了當(dāng)今抗病蟲(chóng)害研究的新目標(biāo)。而昆蟲(chóng)體液免疫負(fù)向調(diào)控因子的蛋白質(zhì)屬性、無(wú)害性及對(duì)免疫系統(tǒng)抑制作用的有效性為研發(fā)新型、無(wú)污染、生物制品類殺蟲(chóng)劑開(kāi)辟新思路。例如，將昆蟲(chóng)Serpin的編碼基因利用基因工程手段導(dǎo)入昆蟲(chóng)病原真菌——白僵菌中，以表達(dá)昆蟲(chóng)Serpin的白僵菌作為殺蟲(chóng)劑感染昆蟲(chóng)，高效表達(dá)的Serpin可有效抑制宿主昆蟲(chóng)的免疫反應(yīng)以保證白僵菌在宿主昆蟲(chóng)中的有效繁殖，最終達(dá)到殺死宿主昆蟲(chóng)的目的[15]。此外，目前KPIs在抗凝血、抗腫瘤等方面的研究成果也適合用于研制人類的抗凝藥物及防治寄生的昆蟲(chóng)疫苗等。

簡(jiǎn)而言之，負(fù)向調(diào)控因子在昆蟲(chóng)免疫反應(yīng)調(diào)節(jié)和維持免疫穩(wěn)態(tài)方面起到極其重要的作用，開(kāi)展針對(duì)昆蟲(chóng)負(fù)向調(diào)控因子及其調(diào)控分子機(jī)制的研究，不僅能為深入了解昆蟲(chóng)免疫信號(hào)通路及其調(diào)節(jié)機(jī)制提供理論依據(jù)，同時(shí)，也能為研發(fā)適用于農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)、醫(yī)療等應(yīng)用領(lǐng)域相關(guān)制品提供必要的理論依據(jù)和物質(zhì)基礎(chǔ)。