方宇鵬 （池州職業(yè)技術(shù)學(xué)院，安徽省池州市 247000）

組培苗工廠化生產(chǎn)技術(shù)是在特定的條件下，應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)加快苗木繁殖的方法，是全新的育苗技術(shù)之一，對(duì)一些繁殖系數(shù)較低或難以通過種子繁殖的珍貴樹種尤為重要[1]。大別山冬青(Ilex dabieshanensisK.Yao & M.B.Deng)又名小苦丁茶，是冬青科(Aquifoliaceae)冬青屬(Ilex)常綠闊葉喬木，原產(chǎn)安徽大別山及江西等地[2]，其葉色青翠，果實(shí)紅艷，生長(zhǎng)旺盛，且耐修剪性強(qiáng)，適應(yīng)性強(qiáng)，耐貧瘠和干旱環(huán)境，病蟲害發(fā)生率低，是園林綠化上的優(yōu)良、珍貴樹種[3]。目前，大別山冬青在生產(chǎn)中主要通過扦插進(jìn)行繁殖，但其扦插繁殖系數(shù)較低[4]，導(dǎo)致其種苗在市場(chǎng)上較為短缺。因此，為開發(fā)推廣大別山冬青這種珍稀植物品種，在短期內(nèi)獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)種苗，滿足其生產(chǎn)應(yīng)用的需要，筆者對(duì)大別山冬青組培快繁技術(shù)進(jìn)行了研究，并取得了一定的成效?，F(xiàn)將研究的大別山冬青組培苗工廠化生產(chǎn)技術(shù)總結(jié)介紹如下，以期為推動(dòng)大別山冬青的園林應(yīng)用，豐富我國(guó)綠化樹種奠定基礎(chǔ)。

1 外植體選取

選擇由安徽省安慶市太湖縣宏安冬青樹種植農(nóng)民專業(yè)合作社提供的5年生扦插苗，取無病蟲害、生長(zhǎng)旺盛的一年生枝條作為外植體來源。

2 外植體處理

用自來水將具有腋芽的一年生枝條沖洗30 min，然后去除葉片，留少量葉柄，放入盛有洗衣粉溶液的燒杯中漂洗，并不斷攪動(dòng)，沖洗干凈后瀝干，放置于超凈工作臺(tái)上，用75%酒精消毒20 s，無菌水沖洗5次后，將其置于0.1%升汞液中消毒8 min，然后用無菌水沖洗3～5次，再將其表面的水分用無菌紙吸干，最后將經(jīng)消毒的莖段（外植體）剪切成長(zhǎng)0.5～1.0 cm的莖段，每莖段帶1～2個(gè)腋芽，接種到初代培養(yǎng)基上誘導(dǎo)腋芽萌發(fā)[5]。

3 組培苗擴(kuò)繁

3.1 腋芽誘導(dǎo)培養(yǎng)

以MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L作為培養(yǎng)基進(jìn)行腋芽誘導(dǎo)，每個(gè)培養(yǎng)瓶中分別接種3個(gè)莖段。外植體接種后置于溫度（23±3）℃、光照2 000 Lux、16 h/d的條件下培養(yǎng)，腋芽誘導(dǎo)率可達(dá)100%。

3.2 繼代增殖培養(yǎng)

將前期初代培養(yǎng)誘導(dǎo)后產(chǎn)生的新梢，切割成莖段，每個(gè)莖段帶1個(gè)新腋芽，處理后轉(zhuǎn)接到MS+6-BA 1.0 mg/L +IBA 0.3 mg/L培養(yǎng)基中，每瓶接種2個(gè)莖段，增殖系數(shù)可達(dá)4.6。

3.3 生根培養(yǎng)

將長(zhǎng)至3～4 cm高的健壯大別山冬青試管苗接種到1/2 MS+NAA 0.3 mg/L +IBA 0.2 mg/L生根培養(yǎng)基中，其生根率可達(dá)95%。

3.4 馴化移栽

在大別山冬青組培苗生根后、株高達(dá)4 cm左右時(shí)進(jìn)行煉苗與移栽。選擇根系發(fā)達(dá)、生長(zhǎng)健壯的組培苗，先將瓶蓋打開，覆上保鮮膜在人工氣候室內(nèi)放置2～3 d。再從培養(yǎng)瓶中取出小苗，洗凈根部培養(yǎng)基，移栽至消毒過的蛭石（V）∶珍珠巖（V）∶泥炭土（V）=2∶1∶2的混合基質(zhì)中，要求控制環(huán)境條件，前期適當(dāng)遮陽，保持一定濕度，成活率可達(dá)85%。

4 結(jié)論與討論

大別山冬青作為優(yōu)良的園林綠化珍貴樹種，經(jīng)過組織培養(yǎng)，能進(jìn)行較大規(guī)模的生產(chǎn)，較好地滿足了當(dāng)?shù)厥袌?chǎng)對(duì)大別山冬青的需求。值得注意的是，在組培苗實(shí)際生產(chǎn)中，馴化移栽是極為重要和關(guān)鍵的一個(gè)環(huán)節(jié)，組培苗移栽的成活與否與基質(zhì)、環(huán)境條件等密切相關(guān)。因此，需嚴(yán)格做好組培苗移栽環(huán)境的調(diào)控工作。