不同免疫學(xué)檢驗方法對于結(jié)核病的臨床價值研究

王永春

（濰坊市腦科醫(yī)院，山東濰坊 261000）

結(jié)核病威脅著人們的健康，降低了人們的生活質(zhì)量。研究發(fā)現(xiàn)，我國具有龐大的結(jié)核菌感染群體，可見我國結(jié)核病的防治和診療已經(jīng)到了刻不容緩的時刻[1]。就目前來說，我國結(jié)核病的診斷仍是一個難題，醫(yī)生只能憑借患者的體征和痰涂片培養(yǎng)去分析患者的結(jié)核病類型，具有一定的誤差概率。隨著科技的提升，影像學(xué)的出現(xiàn)改變了醫(yī)生的疾病診斷方式，使得結(jié)核病的檢查更加便捷、高效，但由于痰培養(yǎng)需時較長，再加上患者的陽性反應(yīng)率較高，所以仍難以在第一時間確診患者的結(jié)核病類型。

結(jié)核病被列為免疫介導(dǎo)慢性疾病的范疇，當前最佳的診斷方式是免疫學(xué)檢驗，該方式已經(jīng)在各個醫(yī)療機構(gòu)中廣泛推廣[2]。需要注意的是，免疫學(xué)檢驗方法有多種，其中最為認可的方法有兩種：第一種是蛋白芯片法；第二種是膠體金法。蛋白芯片法又可分為三種抗體形式，即蛋白16 kD、蛋白38 kD和結(jié)核菌脂阿拉伯甘露糖(LAM)，任一形式均可確定患者是否被感染。膠體金色法的原理是葡萄球菌A蛋白(SPA)膠體金綴合物可使得已經(jīng)形成結(jié)合的結(jié)核IgG抗體表現(xiàn)為紅色，所以顏色的變化就代表著患者是否被感染[3]。本研究以2019年10月至2020年4月因結(jié)核病而入濰坊市腦科醫(yī)院治療的90例患者為研究對象，對其實施差異化的免疫學(xué)檢驗方法，分別記錄差異化檢驗方法下結(jié)核病的陽性反應(yīng)率數(shù)據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年10月至2020年4月因結(jié)核病而入濰坊市腦科醫(yī)院治療的90例患者為研究對象納入結(jié)核組，其中男性47例，女性43例，年齡21～87歲，平均年齡（35.54±10.02）歲，90例患者中，3例患者患有骨關(guān)節(jié)結(jié)核，5例患者患有結(jié)核性胸膜炎，7例患者患者結(jié)核性腦膜炎，剩余的75例患者為肺結(jié)核。同期另選取90例非結(jié)核患者作為對照組，其中男性45例，女性45例；年齡33～86歲，平均年齡（47.77±6.02）歲，對照組患者未患有結(jié)核病，27例患者表現(xiàn)為慢性支氣管炎，10例患者表現(xiàn)為塵肺，10例患者表現(xiàn)為支氣管肺炎，18例患者表現(xiàn)為肺癌，13例患者表現(xiàn)為急性下呼吸道感染，12例患者表現(xiàn)為淋巴結(jié)炎。

納入標準：①患者符合2002版《內(nèi)科學(xué)》[4]的相關(guān)診斷標準；②患者同意整個實驗過程；③患者積極配合實驗數(shù)據(jù)的采集；④患者未發(fā)現(xiàn)其它并發(fā)癥。

排除標準：①患者存在嚴重的并發(fā)癥；②患者存在本實驗抵觸情緒；③患者不符合疾病診斷標準。

1.2 方法

1.2.1 蛋白芯片法 借助PBT-X2型芯片閱讀儀(貴州信邦制藥股份有限公司)對患者血清進行檢測，搭配使用結(jié)核分枝桿菌IgG抗體檢測試劑盒（貴州信邦制藥股份有限公司），其中特異性抗體有三種，第一是LAM；第二是蛋白16 kD；第三是38 kD。以上三種抗體出現(xiàn)任一陽性結(jié)果就代表著患者為陽性，如果以上三種抗體檢測結(jié)果均表現(xiàn)為陰性，就代表著患者為陰性。

1.2.2 膠體金法

借助迪比多試劑盒(貴州信邦制藥股份有限公司)實施患者檢測，通過斑點免疫膠體金滲濾技術(shù)去分離結(jié)核桿菌膜蛋白，并在硝酸纖維素膜幫助下進行固定，此時膜下的結(jié)核抗原將與之前分離的結(jié)核桿菌膜蛋白發(fā)生特異性結(jié)合，隨后葡萄球菌A蛋白(SPA)膠體金綴合物可使得已經(jīng)形成結(jié)合的結(jié)核IgG抗體表現(xiàn)為紅色，所以，如果檢測過程中出現(xiàn)紅色斑點，就意味著患者為陽性，反之則患者為陰性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 23.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行處理，計數(shù)資料采用[例（%）]表示，行χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

對于結(jié)核組患者來說，其膠體金法陽性反應(yīng)率數(shù)據(jù)達到了71.11%，對應(yīng)的比例是64/90，而對照組的膠體金法陽性反應(yīng)率數(shù)據(jù)為7.80%，對應(yīng)的比例是7/90，結(jié)核組顯著優(yōu)于對照組，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；另外，LAM數(shù)據(jù)中，結(jié)核組蛋白芯片法反應(yīng)率為47.78%，對應(yīng)的比例是43/90，蛋白16 kD數(shù)據(jù)中，結(jié)核組蛋白芯片法反應(yīng)率為26.67%，對應(yīng)的比例是24/90，蛋白38 kD數(shù)據(jù)中，結(jié)核組蛋白芯片法反應(yīng)率為46.67%，對應(yīng)的比例是42/90，以上數(shù)據(jù)對照組對應(yīng)的蛋白芯片法反應(yīng)率分別是 8.90%（8/90）、0.00%（0/90）、8.90%（8/90），結(jié)核組顯著優(yōu)于對照組，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 差異化檢驗方法下統(tǒng)計結(jié)核病的陽性反應(yīng)率[例（%）]

3 討論

結(jié)核病屬于致命傳染病的一種，其主要是由分歧桿菌引發(fā)的，可借助影像學(xué)或者顯微鏡培養(yǎng)法進行判斷。在臨床上，結(jié)核病表現(xiàn)出了低熱和咳嗽等癥狀，部分患者也出現(xiàn)了夜間盜汗癥狀，必須得到重視。當前來說，結(jié)核病是我國致死率最高的感染疾病，如不及時進行有效的預(yù)防和控制，必將危及人們的生命。據(jù)不完全統(tǒng)計，我國肺結(jié)核患病率數(shù)據(jù)為421/10萬，菌陽患病率數(shù)據(jù)為171/10萬，涂陽性肺結(jié)核患病率達到了154/10萬[5]。由此可見，我國的基礎(chǔ)衛(wèi)生狀況仍存在嚴重的不足，且群眾不具備完善的醫(yī)療意識，結(jié)核病仍在繼續(xù)蔓延。

對于結(jié)核病來說，群眾需要做好有效的預(yù)防，而醫(yī)護人員也應(yīng)尋找快速、準確的診斷方案。分枝桿菌培養(yǎng)是目前最常見的結(jié)核病診斷方式，其優(yōu)勢是精度高、操作簡單，但其同樣存在著培養(yǎng)周期長等問題，患者疾病的確診需要等待6周的時間，患者正是由于漫長時間的等待才延誤了最佳的治療時機，造成了疾病的不必要傳染。另外，影像學(xué)診斷也是當前的主流診斷方式，其表現(xiàn)為快速有效，受到了廣泛的認可，但該方式對于小典型的癥狀無法診斷，形成了患者誤診或漏診的狀況。隨著科技的發(fā)展，免疫學(xué)檢驗方法成為了最佳的檢驗途徑，其中最為認可的方法有兩種：第一種是蛋白芯片法；第二種是膠體金法。免疫學(xué)檢驗方法既包含了影像學(xué)信息，又彌補了痰涂片培養(yǎng)法的缺點，檢驗效果不錯。

蛋白芯片法又可分為三種抗體形式，即蛋白16 kD、蛋白38 kD和結(jié)核菌脂阿拉伯甘露糖(LAM)，任一形式均可確定患者是否被感染。對于結(jié)核分枝桿菌來說，其細胞壁的主要成分是LAM，所以LAM角度的抗原性檢測有著極強的特異性，需要注意的是，其他的菌落細胞壁也存在LAM，所以該方式并不能全完確定患者的疾病類型。與LAM不同的是，蛋白16 kD和蛋白38 kD僅在結(jié)核分枝桿菌中存在，在其它的菌落中未發(fā)現(xiàn)，抗原性檢測具有特異性，并作為患者疾病診斷的主要依據(jù)。

膠體金色法的原理是葡萄球菌A蛋白(SPA)膠體金綴合物可使得已經(jīng)形成結(jié)合的結(jié)核IgG抗體表現(xiàn)為紅色，所以顏色的變化就代表著患者是否被感染。膠體金法的疾病診斷存在三個角度的優(yōu)勢：第一，結(jié)果穩(wěn)定。血清中IgG的含量一直處于穩(wěn)定的狀態(tài)，并不受細菌活力等的影響，最后的檢驗結(jié)果數(shù)據(jù)非常穩(wěn)定；第二，使用方便。由于膠體金法需要高精度的儀器，所以檢驗過程中都是自動化進行，人工操作的部分較少，單次的膠體金法數(shù)據(jù)檢驗只需要十幾分鐘，使用非常便捷；第三，準確率高。不同于蛋白芯片法，其最主要的區(qū)別就是準確率高，這也是其在臨床上廣泛使用的原因。

本研究發(fā)現(xiàn)，對于結(jié)核組患者來說，其膠體金法陽性反應(yīng)率數(shù)據(jù)達到了71.11%，而對照組的膠體金法陽性反應(yīng)率數(shù)據(jù)為7.80%，結(jié)核組顯著優(yōu)于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；另外，LAM、蛋白16 kD和蛋白38 kD數(shù)據(jù)中，結(jié)核組蛋白芯片法陽性反應(yīng)率分別是 47.78%（43/90）、26.67%（24/90）、46.67%（42/90），而對照組蛋白芯片法陽性反應(yīng)率分別是8.90%（8/90）、0.00%（0/90）、8.90%（8/90），結(jié)核組顯著優(yōu)于對照組，且膠體金法免疫檢驗優(yōu)于蛋白芯片法免疫檢驗，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。周方明等[6]指出，蛋白芯片法與膠體金法的結(jié)合檢測并不會大幅度提高疾病診斷率，所以膠體金法更佳。

綜下所述，膠體金法對于結(jié)核疾病的診斷有著顯著的優(yōu)勢，表現(xiàn)為結(jié)果穩(wěn)定、使用便捷、準確率高，該方式可在以后工作中實施廣泛的推廣。