王化同，王 俠，于 瑤

（1.長春市食品藥品檢驗(yàn)中心，吉林 長春 130012；2.通化市食品藥品檢驗(yàn)所，吉林 通化 134001）

當(dāng)歸是我國比較常用的中藥材，其不僅能夠補(bǔ)血活血，還能夠調(diào)經(jīng)止痛，目前主要應(yīng)用于經(jīng)閉痛經(jīng)、腸燥便秘等病癥中。然而在當(dāng)歸加工的過程中，由于一些商人為了增加自己的經(jīng)濟(jì)效益，使用硫磺熏蒸當(dāng)歸，盡管能夠在一定程度上避免當(dāng)歸被蟲吞食，但是卻導(dǎo)致當(dāng)歸當(dāng)中殘留二氧化硫，當(dāng)人體攝入之后，會與人體內(nèi)蛋白質(zhì)發(fā)生可逆反應(yīng)，對消化道的黏膜進(jìn)行刺激，從而讓人體出現(xiàn)過敏癥狀，降低人體的免疫力。目前我國針對中藥材中殘留的二氧化硫還沒有制定出統(tǒng)一、限量規(guī)定，危害了我國人民的生命財產(chǎn)安全，所以本文主要研究了離子色譜法對當(dāng)歸中二氧化硫殘留量的測定，發(fā)現(xiàn)該類測定方法具有簡便、快捷等特點(diǎn)，且測定的準(zhǔn)確度較高，具有較好的應(yīng)用前景。

1 實(shí)驗(yàn)儀器及試藥

采用離子色譜儀為THERMO FISHER ICS-5000+離子色譜儀；陰離子分析柱；電導(dǎo)檢測器；A10純水儀以及萬能粉碎機(jī)等儀器。試藥包括優(yōu)級純的碳酸鈉、碳酸氫鈉；分析純的亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉、甲醛、碘和淀粉；實(shí)驗(yàn)水為去離子水，實(shí)驗(yàn)采用當(dāng)歸樣品為硫磺熏制以及普通當(dāng)歸。對照品為水中硫酸根，來源為北京壇墨質(zhì)檢科技有限公司，批號為B1807067，濃度為1000μg·mL^(-1)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 配置對照品溶液

使用去離子水將硫酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行稀釋，稀釋成不同濃度的溶液，作為對照品溶液，其濃度分別為

5μg/mL、105μg/mL、205μg/mL、305μg/mL、50μg/mL、75μg/mL、100μg/mL、150μg/mL、200μg/mL、250μg/mL、300μg/mL、400μg/mL、500μg/mL。

2.2 制備樣品溶液

將當(dāng)歸樣品進(jìn)行粉碎，并精密稱定5g，置于水蒸氣蒸餾裝置的樣品瓶當(dāng)中，將20 mL的水加入樣品瓶中攪拌均勻，將20mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%的雙氧水加入100 mL的量瓶中，讓其作為接收液，并與水蒸氣蒸餾裝置連接，將5mL鹽酸快速加入樣品瓶中密封，再進(jìn)行水蒸氣蒸餾步驟。當(dāng)接收瓶內(nèi)的液體將要達(dá)到100mL時，停止蒸餾，使用去離子水將接收瓶內(nèi)的物質(zhì)進(jìn)行稀釋并定容至刻度，搖勻，作為樣品溶液。

2.3 色譜條件

色譜柱為AS19陰離子分析柱，其規(guī)格為250×4 mm、5 μm；3.2mmol/L碳酸鈉和1.0 mmol/L碳酸氫鈉組合成淋洗液；流速為0.7 mL/min；進(jìn)樣量為20 μL。

2.4 考察線性范圍

分別將不同濃度的對照品溶液進(jìn)樣20μL，得出最終的峰面積和濃度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并得出相關(guān)的回歸方程為：

Y=85.27X+515.4 相關(guān)系數(shù)r=0.9996

通過計算可以知道，當(dāng)硫酸根處于5-500 μg/mL范圍內(nèi)具有較好的線性。

2.5 考察專屬性

進(jìn)行專屬性試驗(yàn)的主要目的是為了了解是否存在假陽性情況對測定造成干擾。主要使用沒有經(jīng)過硫磺熏制的當(dāng)歸作為對照，將其粉碎成中粉之后，精密稱定5 g，置于水蒸氣蒸餾裝置當(dāng)中，加入20 mL的水進(jìn)行混合，并將20 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%的雙氧水加入100 mL量瓶中與水蒸氣蒸餾裝置相連接，把5 mL的鹽酸快速加入樣品瓶中，密封之后進(jìn)行水蒸氣蒸餾，當(dāng)接收瓶內(nèi)的液體將近達(dá)到100mL時就停止蒸餾，并使用去離子水將接收瓶內(nèi)的物質(zhì)進(jìn)行稀釋并定容，從而制成陰性對照溶液。通過測定結(jié)果可以知道，當(dāng)當(dāng)歸沒有經(jīng)過硫磺熏制，其中不會存在二氧化硫物質(zhì)。

2.6 考察精密度

使用去離子水將硫酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋成不同濃度的對照品溶液，取濃度為100μg/mL的對照品溶液連續(xù)進(jìn)樣6次之后，將峰面積記錄下來，對其進(jìn)行計算可以得出峰面積的RAD為0.61%，由此結(jié)果可以知道其具有較好的精密度。

2.7 考察穩(wěn)定性

將同一經(jīng)過蒸餾和稀釋之后的樣品溶液在24 h之內(nèi)進(jìn)行進(jìn)樣，進(jìn)樣6次，將峰面積記錄下來，并對其進(jìn)行計算，通過計算可以知道峰面積的RSD為0.46%，說明在24 h之內(nèi)，樣品溶液具有較好的穩(wěn)定性。

2.8 考察重復(fù)性

將經(jīng)過粉碎后的當(dāng)歸樣品進(jìn)行蒸餾稀釋之后制備出6份樣品，并按照以上的測定方法進(jìn)行測定，經(jīng)過計算可以得到樣品中二氧化硫的殘留量平均含量為407.17μg/g，RSD為1.7%。

2.9 考察回收率

制備不同濃度的樣品進(jìn)行測定，分別稱取2.0、2.5、3.0g樣品，每個濃度各制3份，將5.0、4.0以及3.0 mL的硫酸根對照品溶液分別精密加入樣品當(dāng)中，該對照品溶液的濃度為0.5008mg/mL，臨用時用碘量法對其進(jìn)行標(biāo)定，并將其進(jìn)行蒸餾和稀釋之后制備出供試品溶液，測定之后對其回收率進(jìn)行計算，可以得到該溶液的平均回收率為91%， RSD為3.5%。

2.10 測定供試品

按上述方法制備供試品溶液，分別對相應(yīng)的當(dāng)歸（不同產(chǎn)地批次20批）進(jìn)行二氧化硫的殘留量測定，根據(jù)測定可以知道未檢出的二氧化硫殘留量占總樣品量的40%；殘留量≤30mg/kg占總樣品量的50%；30 mg/kg＜?xì)埩袅俊?50 mg/kg-的占總樣品量的5%；殘留量＞150 mg/kg占總樣品量的5%。

3 試驗(yàn)結(jié)果與討論

在試驗(yàn)過程中主要采用了四種測定方法，其中包括離子色譜法直接測定、樣品直接超聲測定、在氮?dú)獾谋Ｗo(hù)下進(jìn)行水蒸氣蒸餾以及直接水蒸氣蒸餾等方法。使用離子色譜法直接對樣品中的亞硫酸鹽進(jìn)行測定，當(dāng)對淋洗液進(jìn)行調(diào)整之后，盡管離子色譜上的硫酸根和亞硫酸根能夠?qū)崿F(xiàn)完全分離，但是該類樣品處理方法的可控性相對較難，影響了測定的效果；將樣品進(jìn)行直接超聲，盡管在一定程度上讓測定的步驟更加簡便，但是需要提取的溶液中的雜質(zhì)太多，相對比較復(fù)雜；樣品在氮?dú)獾谋Ｗo(hù)下進(jìn)行水蒸氣蒸餾，在整個蒸餾的過程中其無法控制使用的氮?dú)鈿饬髁?，同時盡管在蒸餾液中使用了一些穩(wěn)定劑進(jìn)行保護(hù)，但是亞硫酸根依舊存在不穩(wěn)定的情況，其濃度出現(xiàn)不斷降低的趨勢，所以其測定的結(jié)果與分析要求不相符。最后直接使用水蒸氣進(jìn)行蒸餾，將雙氧水加入接收液當(dāng)中，讓亞硫酸鹽能夠反應(yīng)生成硫酸鹽，并使用離子色譜法對溶液中的硫酸根離子進(jìn)行測定，該類方法具有較好的可操作性和可控性，且其測定的結(jié)果能夠達(dá)到規(guī)定的分析要求。

當(dāng)樣品進(jìn)行粉碎之后，其粉碎的細(xì)度在一定程度上影響著測定的結(jié)果，經(jīng)過相應(yīng)的考察（測定粗粉、中粉、細(xì)粉）可以發(fā)現(xiàn)，粉碎樣品為細(xì)粉的測定結(jié)果比粗粉的測定結(jié)果高5%，且比中粉的測定結(jié)果高2%，但考慮到粉碎過細(xì)會增加粉碎難度，藥材組織中細(xì)胞壁破裂致使大量不溶物及粘液質(zhì)等雜質(zhì)析出，對水的膨脹系數(shù)變大，易發(fā)生糊化，對后續(xù)操作帶來困難等缺點(diǎn)，所以在實(shí)際實(shí)驗(yàn)的過程中主要采用中粉的測定值，并通過研究可以知道，當(dāng)樣品粉碎之后放置的時間越長，其含量測定的結(jié)果將會呈現(xiàn)出下降的趨勢。

社會在不斷發(fā)展，人們的生活水平和生活質(zhì)量不斷提高，有害物質(zhì)的殘留對食品、藥品等的安全問題已經(jīng)逐漸引起了重視，所以加大對相關(guān)檢測技術(shù)和方法的研究是必然趨勢。目前檢測二氧化硫的方法包括滴定法、比色法以及離子色譜法等，其中離子色譜法具有靈敏度高、操作比較簡單以及自動化程度較好等特點(diǎn)，所以在對當(dāng)歸等中藥材中殘留的二氧化硫進(jìn)行檢測主要采用離子色譜法。在選擇吸收液的過程中，首先選擇了氫氧化鈉為吸收液，由于測定樣品中含有亞硫酸根，具有較大的不穩(wěn)定性，所以需要加入穩(wěn)定劑進(jìn)行測定，整個操作相對比較復(fù)雜，且重復(fù)較差，所以選擇雙氧水作為吸收液檢測，通過檢測結(jié)果可以知道，其樣品檢測的結(jié)果與相關(guān)的分析要求相符。

在實(shí)際實(shí)驗(yàn)的過程中，還根據(jù)水蒸氣蒸餾裝置對其進(jìn)行了一定的改進(jìn)工作，將T型管加入到系統(tǒng)當(dāng)中，能夠保證在蒸餾的過程中將冷凝下的水滴及時去除，并保證當(dāng)系統(tǒng)出現(xiàn)堵塞情況時，其能夠與大氣相通，同時在蒸餾的過程中并不需要進(jìn)行通氮等步驟，通過這些改進(jìn)，能夠?qū)⒄麄€實(shí)驗(yàn)的安全性和可操控性有效提高，并保證測定結(jié)果的準(zhǔn)確性。

4 結(jié)束語

在現(xiàn)代社會中，人們的生活品質(zhì)的提高說明人們越來越重視自己的身體健康，國家也積極制定出了相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)，保證食品、藥材等的安全性。因?yàn)槎趸驅(qū)θ梭w的身體健康擁有較大的影響，如果過量攝入會導(dǎo)致人體出現(xiàn)支氣管炎、氣管炎等多種疾病，所以為了保證當(dāng)歸等中藥的質(zhì)量和安全，制定出相關(guān)的二氧化硫殘留限量標(biāo)準(zhǔn)，要求二氧化硫的殘留量不能超過150mg·kg-1，目前離子色譜法是一類測定二氧化硫殘留量較好的測定方法，其具有較好的適用性，能夠?qū)?dāng)歸等中藥材中二氧化硫的殘留量準(zhǔn)確測量出來，為國家制定相關(guān)的殘留量限定標(biāo)準(zhǔn)提供數(shù)據(jù)支持。隨著時代不斷進(jìn)步，相關(guān)研究學(xué)者還應(yīng)該針對離子色譜法進(jìn)行更加深入的研究，不斷提高離子色譜法測定的準(zhǔn)確性，讓我國中藥材的質(zhì)量安全得到更加有效的保障。