純酰素抗抑郁作用研究

張榮軒 陸大杰 張 怡 翁智兵

（1 常州九福來純酰素蘆薈生物技術(shù)有限公司，江蘇 常州 213161；2 常州大學(xué)制藥與生命科學(xué)學(xué)院，江蘇 常州 213161；3 常州工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇 常州 213164）

蘆薈為百合科蘆薈屬植物，已有幾千年的藥用歷史，被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、日用和美容等領(lǐng)域，被聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織（FAO）譽(yù)為“21世紀(jì)最佳保健食品”。蘆薈多糖是蘆薈的主要活性成分[1-2]，可以提高生物體的免疫力[3-4]，具有抗腫瘤[5-6]、抗艾滋病、抗輻射[7]等作用。蘆薈多糖經(jīng)過進(jìn)一步分離純化后，發(fā)現(xiàn)其組成主要為乙?；事毒厶?。乙酰化甘露聚糖并不是都能為人體吸收，科學(xué)家在對(duì)比不同分子量的吸收率后，將最容易被吸收部分再次分離濃縮，所得即稱之為純酰素（PMAS）[8]。PMAS只占到乙?；事毒厶强偭康?5%～80%。目前尚無PMAS抗抑郁作用方面的相關(guān)報(bào)道。本文通過小鼠抑郁模型對(duì)PMAS的抗抑郁作用進(jìn)行了初步研究。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物 健康雌性ICR小鼠，體質(zhì)量18～22 g，由揚(yáng)州大學(xué)比較醫(yī)學(xué)中心提供，生產(chǎn)許可證：SCXK（蘇）2012-0004。實(shí)驗(yàn)過程中小鼠自由飲水、攝食，適應(yīng)性喂養(yǎng)5 d后開始進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.2 藥物及主要試劑 PMAS，注射粉針形式，呈淡棕色，規(guī)格：每瓶含可溶性成分0.75 g，自產(chǎn)。利血平注射液，上海醫(yī)科大學(xué)紅旗制藥廠提供，批號(hào)：081019。鹽酸氟西汀片，常州四藥制藥有限公司，批號(hào)：130509。羧甲基纖維素納，中國(guó)醫(yī)藥上?；瘜W(xué)試劑公司，批號(hào)：20070817。丁苯那嗪，中國(guó)醫(yī)藥上?；瘜W(xué)試劑公司，批號(hào)：20101012。

1.3 主要儀器 半導(dǎo)體體溫表（上海醫(yī)用儀表廠）；木箱（40 cm×40 cm×40 cm，長(zhǎng)×寬×高）（自制）；懸尾支架（自制）；BSA223S-CW萬分之一電子天平，上海菁海儀器有限公司；LX300型低速迷你離心機(jī)，海門市其林貝爾儀器制造有限公司。

1.4 方法

1.4.1 利血平抑郁動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)[9]取健康雌性ICR小鼠70只，隨機(jī)分5組，每組15只（正常組10只）。即①正常對(duì)照組（0.1 mL/10 g）；②模型組（0.1 mL/10 g）；③氟西汀組（15.6 mg/kg，口服灌胃）；④PMAS低劑量（144 mg/kg）；⑤PMAS高劑量（288 mg/kg）。灌胃給藥6 d，于第6日上午，除正常組外，其余各組尾靜脈注射2 mg/kg利血平。觀察指標(biāo)為眼簾下垂、運(yùn)動(dòng)不能及動(dòng)物體溫。1 h后將動(dòng)物放于支架上觀察15 s，比較動(dòng)物關(guān)閉眼簾一半的動(dòng)物數(shù)；然后，將動(dòng)物放于直徑7.5 cm圓形白紙的中央觀察15 s或更長(zhǎng)時(shí)間，比較待在圈內(nèi)動(dòng)物數(shù)；結(jié)果進(jìn)行χ2檢驗(yàn)；4 h后測(cè)量動(dòng)物肛溫。

1.4.2 丁苯那嗪抑郁動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)[10]取健康雌性ICR小鼠70只，隨機(jī)分5組，每組15只（正常組10只）。即①正常對(duì)照組（0.1 mL/10 g）；②模型組（0.1 mL/10 g）；③氟西汀組（15.6 mg/kg，口服灌胃）；④PMAS低劑量（144 mg/kg）；⑤PMAS高劑量（288 mg/kg）。給藥6 d，實(shí)驗(yàn)前禁食不禁水12 h，于第6日上午，灌胃給藥60 min后，除正常組外，其余各組腹腔注射40 mg/kg丁苯那嗪。于注射30 min后，每30 min重復(fù)觀察一次直到注射后90 min。關(guān)閉眼簾一半和僵住癥為觀察指標(biāo)。僵住癥觀察方法：用兩軟木塊作成3 cm的兩極小梯，將動(dòng)物的前肢放于頂部的木塊上，頭朝下，丁苯那嗪引起僵直作用后，動(dòng)物就能保持此狀態(tài)不動(dòng)，如果60 s后，僵直狀態(tài)不能對(duì)抗，將動(dòng)物放回正常姿勢(shì)。

1.4.3 小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)（TST）[11]取健康雌性ICR小鼠70只，隨機(jī)分5組，每組15只（正常組10只）。即①正常對(duì)照組（0.1 mL/10 g）；②模型組（0.1 mL/10 g）；③氟西汀組（15.6 mg/kg，口服灌胃）；④PMAS低劑量（144 mg/kg）⑤PMAS高劑量（288 mg/kg）。給藥6 d，實(shí)驗(yàn)前禁食不禁水12 h，于第6日上午，除正常組外，其余各組尾靜脈注射2 mg/kg利血平，同時(shí)給藥1 h后，將小鼠尾部2 cm處用膠布黏于高5 cm處，讓小鼠先適應(yīng)1 min后開始記錄時(shí)間，記錄6 min中小鼠不動(dòng)的時(shí)間。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS22.0對(duì)本文數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，量反應(yīng)組間采用t檢驗(yàn)法比較，以（±s）表示；質(zhì)反應(yīng)組間采用χ2檢驗(yàn)法比較，以[n（%）]表示。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 PMAS對(duì)利血平抑郁動(dòng)物模型的影響 數(shù)據(jù)表明，PMAS對(duì)利血平引起動(dòng)物抑郁模型的眼簾下垂、運(yùn)動(dòng)不能的癥狀有明顯改善作用，抑郁動(dòng)物數(shù)明顯減少，并能在一定程度上升高動(dòng)物體溫，與模型組相比，有顯著差異（P＜0.01）。且PMAS高劑量效應(yīng)要強(qiáng)于低劑量，PMAS對(duì)利血平引起的小鼠抑郁有顯著改善作用。見表1。

2.2 PMAS對(duì)丁苯那嗪抑郁動(dòng)物模型的影響 數(shù)據(jù)顯示，丁苯那嗪能明顯的引起小鼠眼簾下垂、運(yùn)動(dòng)不能（僵?。┑纫钟舭Y狀，而給予PMAS的小鼠同樣注射丁苯那嗪，抑郁動(dòng)物數(shù)明顯減少，并能在一定程度上升高動(dòng)物體溫，與模型組相比，有顯著差異（P＜0.01）。PMAS對(duì)丁苯那嗪引起的小鼠抑郁有顯著抑制作用。見表2。

表1 PMAS對(duì)利血平引起動(dòng)物抑郁模型的影響（n=15，±s）

表1 PMAS對(duì)利血平引起動(dòng)物抑郁模型的影響（n=15，±s）

注：關(guān)閉眼簾一半的動(dòng)物數(shù)和運(yùn)動(dòng)不能動(dòng)物數(shù)，結(jié)果進(jìn)行χ2檢驗(yàn)；動(dòng)物肛溫，結(jié)果進(jìn)行t檢驗(yàn)。與正常對(duì)照組相比，aP＜0.05，bP＜0.01；與模型組相比，cP＜0.05，dP＜0.01。

表2 PMAS對(duì)丁苯那嗪引起動(dòng)物抑郁模型的影響（n=15，±s）

表2 PMAS對(duì)丁苯那嗪引起動(dòng)物抑郁模型的影響（n=15，±s）

注：關(guān)閉眼簾一半的動(dòng)物數(shù)和僵住動(dòng)物數(shù)；結(jié)果進(jìn)行χ2檢驗(yàn)；與正常對(duì)照組相比，aP＜0.01；與模型組相比，bP＜0.05；cP＜0.01。

2.3 PMAS對(duì)小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間的影響 數(shù)據(jù)顯示，模型組小鼠保持靜止不動(dòng)的時(shí)間平均達(dá)到212 s左右。而抗抑郁陽(yáng)性藥氟西汀給藥組小鼠的靜止時(shí)間明顯要短于模型組，說明小鼠的抑郁狀態(tài)得到一定的糾正。PMAS兩給藥組小鼠的懸尾靜止不動(dòng)時(shí)間分別為169 s和147 s左右，與模型組比較也有明顯差異，說明PMAS對(duì)小鼠的抑郁狀態(tài)有改善作用，能增強(qiáng)其活動(dòng)性。見表3。

表3 PMAS在TST中對(duì)小鼠不動(dòng)時(shí)間的影響（n=20，±s）

表3 PMAS在TST中對(duì)小鼠不動(dòng)時(shí)間的影響（n=20，±s）

注：與正常對(duì)照組相比，aP＜0.05，bP＜0.01；與模型組相比cP＜0.05，dP＜0.01。

3 討 論

抑郁癥是一種常見的精神疾病，以顯著而持久的心境低落為主要臨床特征并伴有食欲減退、性功能減退、睡眠障礙等軀體性癥狀綜合征。藥物治療是抑郁癥最主要的治療方法，然而目前常用的抗抑郁藥長(zhǎng)期應(yīng)用易產(chǎn)生不良反應(yīng)，因此從天然植物中篩選具有抗抑郁活性的物質(zhì)具有重要意義。

本文采用利血平致抑郁、丁苯那嗪致抑郁以及小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)的抑郁癥模型，對(duì)PMAS的抗抑郁效果進(jìn)行了研究。結(jié)果顯示，PMAS能明顯縮短小鼠懸尾的不動(dòng)時(shí)間；拮抗利血平致眼瞼下垂、小鼠體溫降低及行為學(xué)缺損作用；拮抗丁苯那嗪致眼瞼下垂、小鼠體溫為學(xué)缺損作用，表明PMAS具有一定的抗抑郁作用。其作用機(jī)制推測(cè)可能與抑制腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)的合成、代謝或重吸收有關(guān)，后續(xù)的相關(guān)研究正在進(jìn)行中。