張敏敏,裴懷弟,劉新星
(甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所,甘肅 蘭州 730070)
植物在整個(gè)生長(zhǎng)發(fā)育過程中,經(jīng)常會(huì)遭受到干旱、鹽漬、低溫、病蟲害等各種生物及非生物脅迫的影響,其中水分脅迫是最常見的逆境影響因子之一。棉花是我國的重要經(jīng)濟(jì)作物,在整個(gè)生長(zhǎng)發(fā)育過程中,干旱對(duì)棉花生長(zhǎng)期產(chǎn)生的危害以及由此造成的產(chǎn)量損失往往比較嚴(yán)重。目前,作物抗旱性的研究方法很多,大多是在人工控制的干旱或人工模擬干旱條件下進(jìn)行,主要方法有室外盆栽控制水分、室內(nèi)水培或采用PEG滲透脅迫、人工控制的溫室、氣候室和培養(yǎng)箱等[1-3]。其中,聚乙二醇(PEG)是一種高分子的滲透劑,其最大特點(diǎn)是本身不能穿越細(xì)胞壁進(jìn)入細(xì)胞質(zhì),因而不會(huì)引起質(zhì)壁分離,使植物組織和細(xì)胞處于類似于干旱的水分脅迫之中[4]。相關(guān)研究表明,棉花種子在受到不同程度的干旱脅迫時(shí),隨著水勢(shì)的下降,其發(fā)芽率、發(fā)芽速度、發(fā)芽指數(shù)、苗高、根長(zhǎng)、根莖比、幼苗干鮮重等均出現(xiàn)不同程度的降低[5-6]。我們采用室內(nèi)高滲溶液PEG-6000模擬干旱脅迫,對(duì)棕色棉BC05、隴綠棉3號(hào)種子萌發(fā)期子葉干重和鮮重、胚根干重、胚根長(zhǎng)及下胚軸長(zhǎng)等指標(biāo)進(jìn)行了測(cè)定,旨在為棉花抗旱性評(píng)價(jià)、栽培和育種提供參考。
供試彩棉品種為棕色棉BC05、隴綠棉3號(hào),均由甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所提供。
選取飽滿、整齊一致的彩色棉種子,用1 g/kg HgCl滅菌10 min,再用水沖洗3~5遍,分別加入6個(gè)濃度梯度PEG-6000溶液,處理濃度分別為5%、10%、15%、20%、25%、30%,空白對(duì)照(CK)為蒸餾水。每品種各處理50粒種子,3次重復(fù),置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中用紙床發(fā)芽。7 d后測(cè)定彩色棉萌發(fā)期子葉鮮重、下胚軸長(zhǎng)、胚根長(zhǎng)。然后105℃殺青,80℃烘干,測(cè)定子葉干重、胚根干重。彩色棉子葉鮮重、干重、胚根干重用1/1 000天平稱量,下胚軸長(zhǎng)和胚根長(zhǎng)用直尺測(cè)量。
采用Excel 2007對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行繪圖分析,SPASS1 7.0進(jìn)行數(shù)據(jù)的顯著性分析。
從表1可以看出,隨著PEG-6000脅迫濃度的增加,BC05子葉鮮重呈不規(guī)則下降的趨勢(shì)。脅迫濃度為5%~15%時(shí),子葉鮮重與CK差異不顯著;當(dāng)脅迫濃度為20%時(shí),子葉鮮重比CK下降了28.8%,與CK差異達(dá)顯著水平;PEG-6000濃度大于25%時(shí),BC05種子萌發(fā)受抑制,種子未萌發(fā)。隨著PEG-6000脅迫濃度的增加,隴綠棉3號(hào)子葉鮮重呈現(xiàn)不規(guī)則的下降趨勢(shì)。當(dāng)脅迫濃度為5%~20%時(shí),子葉鮮重與CK差異不顯著;當(dāng)脅迫濃度為25%時(shí),比CK下降了12.9%,差異達(dá)顯著水平;當(dāng)脅迫濃度為30%時(shí),隴綠棉3號(hào)種子萌發(fā)受抑,種子未萌發(fā)。表明低濃度PEG-6000對(duì)彩色棉子葉鮮重影響不顯著,高濃度下種子萌發(fā)受抑制,且隴綠棉3號(hào)抗逆性強(qiáng)于BC05。
從表1可以看出,BC05子葉干重均低于CK。脅迫濃度為 5%~15%時(shí),隨著PEG-6000濃度的增加,BC05子葉干重先減后增,與CK的差異均達(dá)顯著水平;當(dāng)脅迫濃度為20%時(shí),BC05單株子葉干重為0.025 g,比CK降低了50%,差異顯著;當(dāng)PEG-6000濃度為25%時(shí),BC05種子萌發(fā)受抑制,種子未萌發(fā)。隴綠棉3號(hào)子葉干重隨著PEG脅迫濃度的增加,呈現(xiàn)不規(guī)則下降的趨勢(shì),脅迫濃度為5%~20%時(shí),與對(duì)照差異均不顯著;脅迫濃度為25%時(shí),隴綠棉3號(hào)子葉干重為0.043 g/株,比CK下降了33.8%,差異達(dá)顯著水平;脅迫濃度為30%時(shí),種子萌發(fā)受抑制,種子未萌發(fā)。
從表1可以看出,BC05和隴綠棉3號(hào)胚根干重均隨著PEG-6000脅迫濃度的增加而降低。當(dāng)脅迫濃度大于5%時(shí),2個(gè)彩色棉品種的胚根干重下降明顯,均與CK達(dá)顯著差異。BC05在脅迫濃度為20%時(shí)胚根干重降到最低,比CK降低了70%;在脅迫濃度為25%時(shí),種子萌發(fā)受抑制。隴綠棉3號(hào)在脅迫濃度為25%降到最低,較CK降低53.8%;在脅迫濃度為30%時(shí)種子萌發(fā)受抑制。可見,在高濃度脅迫下,彩棉種子萌發(fā)受抑制,胚根不生長(zhǎng)。
從表1可以看出,隨著PEG-6000脅迫濃度的增加,BC05和隴綠棉3號(hào)的下胚軸長(zhǎng)均呈下降的趨勢(shì)。BC05在脅迫濃度為5%~20%時(shí),與CK相比,各處理下胚軸長(zhǎng)下降趨勢(shì)明顯,差異均達(dá)顯著水平;脅迫濃度為25%時(shí),種子不萌發(fā),下胚軸不生長(zhǎng)。隴綠棉3號(hào)在脅迫濃度為5%~10%時(shí),下胚軸長(zhǎng)與CK差異不顯著;濃度為15%~25%時(shí),與CK差異顯著;在脅迫濃度為25%時(shí),隴綠棉3號(hào)下胚軸為0.90 cm,脅迫濃度為30%時(shí),種子不萌發(fā),下胚軸不生長(zhǎng)。
表1 不同濃度PEG-6000處理彩棉種子萌發(fā)期的指標(biāo)
從表1可以看出,隨著PEG-6000脅迫濃度的增加,BC05和隴綠棉3號(hào)的胚根長(zhǎng)均呈現(xiàn)不規(guī)則下降趨勢(shì)。當(dāng)脅迫濃度為5%~20%時(shí),與CK相比,2個(gè)彩色棉種子的胚根長(zhǎng)下降趨勢(shì)明顯,差異均達(dá)顯著水平;在脅迫濃度為25%時(shí),BC05萌發(fā)受抑制,胚根未生長(zhǎng),而隴綠棉3號(hào)在濃度為30%時(shí)種子不萌發(fā)、胚根未生長(zhǎng)??梢?,隴綠棉3號(hào)較BC05有較強(qiáng)的抗逆性。
試驗(yàn)結(jié)果表明,不同濃度PEG-6000脅迫對(duì)彩色棉BC05和隴綠棉3號(hào)種子的萌發(fā)期相關(guān)生長(zhǎng)指標(biāo)產(chǎn)生不同程度的影響。隨著PEG-6000濃度的增加,BC05和隴綠棉3號(hào)子葉鮮重、子葉干重、胚根干重、下胚軸長(zhǎng)、胚根長(zhǎng)等指標(biāo)均呈下降趨勢(shì)??梢钥闯觯S著干旱脅迫濃度的增加,2個(gè)彩棉品種的種子萌發(fā)均受到不同程度的抑制,干旱脅迫顯著地影響了棉花單株子葉干鮮重、下胚軸的伸長(zhǎng)生長(zhǎng)和干物質(zhì)的形成。但不同彩色棉品種降低的幅度存在著很大的差異。在PEG-6000脅迫濃度大于25%時(shí),BC05種子萌發(fā)被完全抑制,而隴綠棉3號(hào)在PEG-6000脅迫為30%時(shí)種子萌發(fā)被抑制,各項(xiàng)生長(zhǎng)指標(biāo)均降到最低。
植物種子的萌發(fā)和初期生長(zhǎng)對(duì)外界環(huán)境脅迫較為敏感,因此可以用種子萌發(fā)及其初期生長(zhǎng)狀況來評(píng)價(jià)植物的抗逆性[7]。PEG-6000處理對(duì)種子萌發(fā)期來說,起到了水分脅迫的作用[8-10]。孫彩霞等[11]在玉米上的研究表明,PEG滲透脅迫處理下,玉米種子胚芽及胚根在伸長(zhǎng)生長(zhǎng)和干物質(zhì)形成方面均受到了明顯的抑制,與本試驗(yàn)結(jié)果一致。