程 賢， 畢良武*， 曾維星， 趙振東， 陳玉湘， 張?bào)谢?/p>

(1.中國林業(yè)科學(xué)研究院 林產(chǎn)化學(xué)工業(yè)研究所；生物質(zhì)化學(xué)利用國家工程實(shí)驗(yàn)室；國家林業(yè)和草原局林產(chǎn)化學(xué)工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室；江蘇省生物質(zhì)能源與材料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室；江蘇省林業(yè)資源高效加工利用協(xié)同創(chuàng)新中心，江蘇 南京 210042； 2.廣西中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院 廣西中藥藥效研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣西 南寧 530200； 3.廣西庚源香料有限責(zé)任公司，廣西 東興 538100)

肉桂(CinnamomumcassiaPresl)主要分布在我國的廣西、廣東，此外，印度、老撾以及越南等地也有種植[1]。肉桂中揮發(fā)性活性成分主要為肉桂醛等組成的肉桂油[2]，精油提取后的剩余物中含有大量的非揮發(fā)性活性成分，如酚酸、黃酮、苷等。酚酸類成分主要有原兒茶酸、香豆酸和香草酸等，占非揮發(fā)性活性成分的17.5%[3]；黃酮類成分主要有槲皮素、山柰酚和木犀草素等，占非揮發(fā)性活性成分的4.47%[4]。這些非揮發(fā)性成分具有抗菌、抗氧化、抗腫瘤等作用，具有廣闊的應(yīng)用前景[5-7]，但并沒有得到充分的利用，大多數(shù)肉桂蒸油剩余物被當(dāng)做廢水直接排放，不僅容易造成資源浪費(fèi)，還會導(dǎo)致環(huán)境污染。近年來，針對肉桂蒸油剩余物化學(xué)成分的研究主要集中在紫外分光光度法測定含量及其生物活性的測定[8]。對肉桂蒸油剩余物化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)表征未見報(bào)道，該研究難點(diǎn)在于肉桂蒸油剩余物化學(xué)成分復(fù)雜，并且具有極性大和難揮發(fā)等特點(diǎn)，常規(guī)的分析方法較難實(shí)現(xiàn)對其化學(xué)成分的全面表征。液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)可以快速分析植物提取物復(fù)雜體系內(nèi)結(jié)構(gòu)的化學(xué)成分，在提取物化學(xué)成分的全面表征中已被廣泛應(yīng)用[9]。其中，四極桿飛行時間質(zhì)譜(QTOF MS)能夠測得化合物的精確分子質(zhì)量而不降低靈敏度，通過精確分子質(zhì)量可以獲得化合物的分子式，是提取物化學(xué)成分表征研究的有力工具。韓金美等[10]采用超高效液相色譜-高分辨飛行時間質(zhì)譜(UHPLC-QTOF MS)從蘇格木勒-3水提物中鑒定出42個成分，為其質(zhì)量控制研究奠定了基礎(chǔ)。陳嘉慧等[11]基于UHPLC-QTOF MS技術(shù)指認(rèn)了丹參水提物中的72個成分，為篩選丹參活性成分提供了科學(xué)依據(jù)。本研究采用UHPLC-QTOF MS對肉桂蒸油剩余物的化學(xué)成分進(jìn)行了全面的定性分析，同時對酚類、黃酮類、糖苷類、醇類、醛類和酸類化合物在電噴霧質(zhì)譜中的裂解路徑進(jìn)行研究。由于同一類化學(xué)成分往往具有相同的骨架結(jié)構(gòu)或亞結(jié)構(gòu)，因此這些成分在質(zhì)譜裂解過程中會丟失相同的中性碎片或者形成相同的特征離子，所以本研究不僅能為肉桂蒸油剩余物中化學(xué)成分鑒定提供重要參考，還能為肉桂資源的開發(fā)與利用提供理論基礎(chǔ)。

1 實(shí) 驗(yàn)

1.1 材料與試劑

干燥的肉桂枝葉，由廣西庚源香料有限責(zé)任公司提供，粉碎后過篩，取粒徑0.15～0.25 mm的部分備用；乙腈和甲醇均為色譜純，購自美國Merck公司；甲酸為質(zhì)譜級，購自Sigma-Aldrich公司。

1.2 儀器與設(shè)備

Milli-Q純水儀，美國Millipore公司；Waters Acquity BEH C18(2.1 mm×100 mm，1.7 μm)色譜柱，美國Waters公司；Shimadzu LC-30A Series UHPLC系統(tǒng)，配備SIL-20AC自動進(jìn)樣器、LC-20AD 二元泵、CTO-20A柱溫箱和SPD-M20A二極管陣列檢測器，日本島津公司；AB SCIEX QTOFTM 5600+質(zhì)譜儀，美國SCIEX 公司；移液槍、 5424高速離心機(jī)，德國Eppendorf公司。

1.3 樣品制備

1.3.1肉桂蒸油剩余物的制備 取粉碎、過篩后的干燥肉桂枝葉，轉(zhuǎn)移到水蒸氣蒸餾裝置中，按照料液比1 ∶50(g ∶mL)加入蒸餾水，于100 ℃電熱套中加熱8 h，采用抽濾方式分離，分離所得濾液減壓濃縮后真空干燥，得到肉桂蒸油剩余物，干燥器內(nèi)儲存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2供試品溶液配制 取肉桂蒸油剩余物2.50 g，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇水溶液50 mL，超聲波(功率250 W，頻率25 kHz)溶解0.5 h，放冷，搖勻，轉(zhuǎn)移至離心管并13 000 r/min離心10 min，將上清液轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣小瓶中并進(jìn)行UHPLC-QTOF MS分析。

1.4 色譜和質(zhì)譜條件

1.4.1色譜條件 Shimadzu LC-30A Series UHPLC系統(tǒng)，柱溫為35 ℃，流速為0.2 mL/min，流動相A為0.1%甲酸水溶液，流動相B為乙腈。梯度洗脫條件為：0～3 min，95%流動相A，5%流動相B；3～10 min，95%～40% 流動相A，5%～60%流動相B；40～45 min，40%～5%流動相A，60%～95%流動相B；45～55 min，5%流動相A，95%流動相B；55～56 min，5%～95% 流動相A，95%～5%流動相B；56～60 min，95%流動相A，5%流動相B，進(jìn)樣體積為2 μL。

1.4.2質(zhì)譜條件 AB SCIEX QTOF TM 5600+質(zhì)譜儀，電噴霧離子源(ESI)噴霧電壓3 000 V；霧化氣N2，1.5 L/min；干燥氣N2，140 kPa；誘導(dǎo)碰撞解離(CID)碰撞氣為氬氣，50 kPa；解簇電壓90 V；碰撞電壓45 V；離子源溫度350 ℃；毛細(xì)管溫度300 ℃；掃描范圍m/z100～1 000。所有樣品數(shù)據(jù)采集均在正離子模式和負(fù)離子模式2種模式下進(jìn)行，首先通過全掃模式描獲取一級質(zhì)譜信息，然后采用非靶向模式獲得MS/MS二級碎片。

1.5 數(shù)據(jù)處理

應(yīng)用Peak View 軟件(AB公司，美國)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，并通過分子式預(yù)測功能推測化合物的可能分子式。

2 結(jié)果與討論

2.1 肉桂蒸油剩余物主要化學(xué)成分

肉桂枝葉蒸油剩余物來自水蒸氣蒸餾法提取精油后的水溶液，其主要化學(xué)成分均具有非揮發(fā)性，因此采用超高效液相色譜-高分辨飛行時間質(zhì)譜(UHPLC-QTOF MS)儀能對肉桂蒸油剩余物的主要化學(xué)成分進(jìn)行全面的表征。本研究在文獻(xiàn)中肉桂乙醇提取物的液相分離條件基礎(chǔ)上稍作調(diào)整[12]。鑒于前期研究已經(jīng)表明，肉桂中的非揮發(fā)性成分以酚酸和黃酮類成分為主，酚酸類成分在質(zhì)譜檢測中容易丟失H+產(chǎn)生[M-H]-，黃酮類成分在質(zhì)譜檢測中容易加和H+產(chǎn)生[M+H]+，因此本研究在質(zhì)譜檢測過程中采用了正離子和負(fù)離子2種檢測模式。首先利用全掃描模式獲取主要化學(xué)成分的一級質(zhì)譜信息，然后采用非靶向掃描模式獲取二級質(zhì)譜信息。基于二級質(zhì)譜信息和相關(guān)文獻(xiàn)，進(jìn)一步分析了化合物的質(zhì)譜裂解路徑。最終，綜合考慮保留時間、精確分子質(zhì)量、分子式、特征性離子碎片及文獻(xiàn)數(shù)據(jù)，共鑒定了26個化學(xué)成分，總離子流色譜圖見圖1，化合物定性分析結(jié)果見表1。26個化合物在圖1中的出峰順序表明，所使用的液相分離條件使肉桂蒸油剩余物的主要化學(xué)成分得到充分的分離，有利于進(jìn)一步的質(zhì)譜檢測。肉桂油中含量較高的揮發(fā)性成分如肉桂醛、肉桂酸容易殘留在肉桂蒸油剩余物中，由于質(zhì)譜分析靈敏度高，上述物質(zhì)會在肉桂蒸油剩余物中被檢測到，如表1中的化合物23和24。

a.正離子檢測模式positive mode； b.負(fù)離子檢測模式negative mode

2.2 不同類型化合物結(jié)構(gòu)表征

2.2.1酚類化合物 酚類化合物種類眾多，其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)為芳環(huán)上直接連接了羥基，由于羥基的取代使酚類化合物通常具有抗氧化活性的潛力。

化合物1準(zhǔn)分子離子峰是m/z165.1，通過軟件計(jì)算其分子組成，推測該化合物分子式為C10H12O2，加和離子為[M+H]+，m/z105.1推斷為準(zhǔn)分子離子先丟失一個CH4O(32 u)后繼續(xù)丟失一個CO(28 u)所產(chǎn)生，上述碎片與丁香酚連續(xù)丟失CH4O、CO所得碎片完全一致，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)[12]，推斷化合物1為丁香酚，推測的質(zhì)譜裂解路徑見圖2路徑I。

化合物2準(zhǔn)分子離子峰是m/z417.1，通過軟件計(jì)算其分子組成，推測該化合物分子式為C22H26O8，加和離子為[M-H]-，m/z387.1推斷為準(zhǔn)分子離子丟失2個CH3(15 u)所產(chǎn)生，m/z181.0推斷為醚鍵斷裂所產(chǎn)生，m/z166.0推斷為m/z181.0碎片繼續(xù)丟失1個CH3所產(chǎn)生，上述碎片與丁香脂素連續(xù)丟失CH3以及醚鍵斷裂所得碎片完全一致，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)[13]，推斷化合物2為丁香脂素，推測的質(zhì)譜裂解路徑見圖2路徑II。

表1 肉桂枝葉蒸油剩余物中化學(xué)成分的定性分析

圖2 酚類化合物質(zhì)譜裂解路徑

2.2.2黃酮類化合物 黃酮類化合物指具有2-苯基色原酮結(jié)構(gòu)的化合物，天然黃酮類化合物母核上常含有羥基、甲氧基等取代基，很多黃酮類化合物具有藥用價(jià)值，不僅具有止咳、祛痰、平喘及抗菌的活性，同時能用于防治心腦血管疾病。

化合物3準(zhǔn)分子離子峰是m/z303.0，加和離子為[M+H]+，通過軟件計(jì)算其分子組成，推測該化合物分子式為C15H10O7，m/z229.0推斷為準(zhǔn)分子離子A環(huán)丟失一個H2O(18 u)和CO(28 u)，B環(huán)繼續(xù)丟失一個CO(28 u)所產(chǎn)生，m/z153.0推測為C環(huán)C—C的斷裂，即逆狄爾斯-阿爾德反應(yīng)(RDA)，該碎片也是黃酮類物質(zhì)的特征離子碎片。m/z153.0碎片與槲皮素分子在正離子模式下C環(huán)C—C的斷裂所產(chǎn)生的碎片完全一致，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)[14]，推斷化合物3為槲皮素，推測的質(zhì)譜裂解路徑見圖3路徑I。

化合物4準(zhǔn)分子離子峰是m/z287.0，加和離子為[M+H]+，通過軟件計(jì)算其分子組成，推測該化合物分子式為C15H10O6，同化合物3類似，m/z153.0推測為黃酮類物質(zhì)的特征離子碎片，m/z165.0推測為準(zhǔn)分子離子A環(huán)(C6H6O，94 u)斷開后，B環(huán)丟失1分子CO(28 u)所產(chǎn)生。m/z153.0碎片與山柰酚分子在正離子模式下所產(chǎn)生的碎片完全一致，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)[14]，推斷化合物4為山柰酚，推測的質(zhì)譜裂解路徑見圖3路徑II。

化合物5準(zhǔn)分子離子峰是m/z287.0，加和離子為[M+H]+，通過軟件計(jì)算其分子組成，推測該化合物分子式為C15H10O6，同化合物4為同分異構(gòu)體，m/z153.0推測為黃酮類物質(zhì)的特征離子碎片，m/z241.0推測為準(zhǔn)分子離子A環(huán)丟失1分子H2O(18 u)和1分子CO(28 u)所產(chǎn)生，m/z213.0推測為m/z241.0 碎片繼續(xù)丟失1分子CO(28 u)所產(chǎn)生，m/z153.0碎片與木犀草素分子在正離子模式下所產(chǎn)生的碎片完全一致，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)[14]，推斷化合物5為木犀草素，推測的質(zhì)譜裂解路徑見圖3路徑III。

圖3 黃酮類化合物質(zhì)譜裂解路徑

肉桂蒸油剩余物中黃酮類化合物的質(zhì)譜行為研究表明：化合物3、 4和5的結(jié)構(gòu)區(qū)別在于A/B環(huán)上的羥基位置或數(shù)量不同，在正離子模式下都可以通過RDA反應(yīng)產(chǎn)生m/z153的特征碎片。

2.2.3糖苷類化合物 糖苷類化合物是由糖或糖衍生物的端基碳原子與另一類非糖物質(zhì)連接形成的化合物，如黃酮類化合物在植物體中通常與糖結(jié)合成糖苷類。

化合物6準(zhǔn)分子離子峰是m/z611.1，加和離子為[M+H]+，通過軟件計(jì)算其分子組成，推測該化合物分子式為C27H30O16，m/z303.0推測為準(zhǔn)分子離子連續(xù)丟失1分子鼠李糖和1分子葡萄糖所產(chǎn)生，因此推測化合物6為雙糖苷。m/z303.0碎片與化合物3的分子離子峰相同，因此推測化合物6的母核為槲皮素，同時，上述碎片與蘆丁分子丟失葡萄糖和鼠李糖所產(chǎn)生的碎片完全一致，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)[15]，推斷化合物6為蘆丁，推測的質(zhì)譜裂解路徑見圖4路徑I。同理，推測化合物9以槲皮素為母核并連接了1分子半乳糖，推測化合物9為金絲桃苷。同理，推測化合物10以槲皮素為母核并連接了1分子木糖，推測化合物10為槲皮素-3-O-木糖苷，推測的質(zhì)譜裂解路徑見圖4路徑I。

圖4 糖苷類化合物質(zhì)譜裂解路徑

化合物7準(zhǔn)分子離子峰是m/z327.1，加和離子為[M-H]-，通過軟件計(jì)算其分子組成，推測該化合物分子式為C15H20O8，m/z147.0推測為準(zhǔn)分子離子丟失1分子葡萄糖(C6H12O6，180 u)所產(chǎn)生，m/z103.0 推測為準(zhǔn)分子離子丟失1分子葡萄糖后繼續(xù)丟失1分子CO2(44 u)所產(chǎn)生，上述2種碎片與木犀草苷分子連續(xù)丟失葡萄糖和CO2所產(chǎn)生的碎片完全一致，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)[16]，推斷化合物7為木犀草苷，推測的質(zhì)譜裂解路徑見圖4路徑II。

化合物8準(zhǔn)分子離子峰是m/z595.1，加和離子為[M+H]+，通過軟件計(jì)算其分子組成，推測該化合物分子式為C27H30O15，m/z287.0推測為準(zhǔn)分子離子連續(xù)丟失1分子鼠李糖和1分子葡萄糖所產(chǎn)生，因此推測化合物8為雙糖苷。m/z287.0碎片與化合物4、 5的分子離子峰相同，由于黃酮苷的糖基取代位點(diǎn)通常在B環(huán)的羥基，因此推測化合物8的母核為山柰酚，同時，上述碎片與煙花苷分子丟失葡萄糖和鼠李糖所產(chǎn)生的碎片完全一致，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)[17]，推斷化合物8為煙花苷，推測的質(zhì)譜裂解路徑見圖4路徑III。

2.2.4醇類化合物 化合物11準(zhǔn)分子離子峰是m/z135.1，加和離子為[M+H]+，通過軟件計(jì)算其分子組成，推測該化合物分子式為C9H10O，m/z103.1推測為準(zhǔn)分子離子連續(xù)丟失1分子H2O(18 u)和1分子CH2(14 u)所產(chǎn)生，上述碎片與肉桂醇分子連續(xù)丟失H2O和CH2所產(chǎn)生的碎片完全一致，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)[12]，推斷化合物11為肉桂醇，推測的質(zhì)譜裂解路徑見圖5路徑I。

化合物12準(zhǔn)分子離子峰是m/z381.2，加和離子為[M-H]-，通過軟件計(jì)算其分子組成，推測該化合物分子式為C20H30O7，m/z271.0推測為準(zhǔn)分子離子丟失1分子C7H10O(110 u)所產(chǎn)生，m/z167.1推測為準(zhǔn)分子離子丟失1分子C11H18O4(214 u)所產(chǎn)生，上述2種碎片與肉桂萜醇A分子在五碳環(huán)處斷裂所產(chǎn)生的2種碎片完全一致，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)[17]，推斷化合物12為肉桂萜醇A，推測的質(zhì)譜裂解路徑見圖5路徑II。

圖5 醇類化合物質(zhì)譜裂解路徑

化合物13準(zhǔn)分子離子峰是m/z365.2，加和離子為[M-H]-，通過軟件計(jì)算其分子組成，推測該化合物分子式為C20H30O6，m/z285.2推測為準(zhǔn)分子離子丟失1分子C6H8(80 u)所產(chǎn)生，m/z215.1推測為準(zhǔn)分子離子丟失1分子C9H10O2(150 u)所產(chǎn)生，上述2種碎片與無水桂二萜醇分子在五碳環(huán)處斷裂所產(chǎn)生的2種碎片完全一致，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)[18]，推斷化合物13為無水桂二萜醇，推測的質(zhì)譜裂解路徑見圖5路徑III。

化合物14準(zhǔn)分子離子峰是m/z407.2，加和離子為[M-H]-，通過軟件計(jì)算其分子組成，推測該化合物分子式為C22H32O7，m/z365.2推測為準(zhǔn)分子離子丟失1分子C2H2O(42 u)所產(chǎn)生，m/z347.2推測為準(zhǔn)分子離子丟失1分子C2H2O后脫H2O(18 u)所產(chǎn)生，m/z329.2推測為m/z347.2的碎片繼續(xù)脫水所產(chǎn)生，m/z365.2的碎片從精確分子可以推測與化合物13的準(zhǔn)分子離子峰一致，同時也檢測到m/z215.1和m/z285.2的碎片，因此可以推測化合物14的化學(xué)結(jié)構(gòu)與化合物13相似，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)[13]，推斷化合物14為脫水錫蘭肉桂素，推測的質(zhì)譜裂解路徑見圖5路徑IV。

2.2.5醛類化合物 化合物15準(zhǔn)分子離子峰是m/z179.1，加和離子為[M+H]+，通過軟件計(jì)算其分子組成，推測該化合物分子式為C10H10O3，m/z147.1推斷為準(zhǔn)分子離子丟失一個CH4O(32 u)所產(chǎn)生，m/z119.1推斷為繼續(xù)丟失一個CO(28 u)所產(chǎn)生，上述2種碎片與松柏醛分子丟失CH4O、CO所得碎片完全一致，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)[16]，推斷化合物15為松柏醛，推測的質(zhì)譜裂解路徑見圖6中路徑I，因?yàn)镠+加和位點(diǎn)的不同，分別產(chǎn)生醛基的丟失或醚鍵的斷裂。

化合物16準(zhǔn)分子離子峰是m/z133.1，加和離子為[M+H]+，通過軟件計(jì)算其分子組成，推測該化合物分子式為C9H8O，m/z105.1推斷為準(zhǔn)分子離子丟失一個CO(28 u)所產(chǎn)生，該碎片與肉桂醛的醛基部位丟失CO所得碎片完全一致，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)[12]，推斷化合物16為肉桂醛,推測的質(zhì)譜裂解路徑見圖6路徑II。同理，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)，推斷化合物17為鄰甲氧基肉桂醛，推測的質(zhì)譜裂解路徑見圖6路徑III。

圖6 醛類化合物質(zhì)譜裂解路徑

2.2.6酸類化合物 化合物18準(zhǔn)分子離子峰是m/z167.0，加和離子為[M-H]-，通過軟件計(jì)算其分子組成，推測該化合物分子式為C8H8O4，m/z137.0推斷為準(zhǔn)分子離子丟失一個CH2O(30 u)所產(chǎn)生，m/z108.0推斷為準(zhǔn)分子離子連續(xù)丟失CO2(44 u)和CH3(15 u)所產(chǎn)生，上述2種碎片與香草酸分子丟失CH2O、CO2、CH3所得碎片完全一致，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)[19]，推斷化合物18為香草酸，推測的質(zhì)譜裂解路徑見圖7中路徑I。

化合物19準(zhǔn)分子離子峰是m/z153.0，加和離子為[M-H]-，通過軟件計(jì)算其分子組成，推測該化合物分子式為C7H6O4，m/z109.0推斷為準(zhǔn)分子離子丟失一個CO2(44 u)所產(chǎn)生，該碎片與原兒茶酸分子的羧基部位丟失CO2所得碎片完全一致，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)[20]，推斷化合物19為原兒茶酸，推測的質(zhì)譜裂解路徑見圖7中路徑II。同理，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)，推斷化合物22為咖啡酸(C9H8O4)，推測的質(zhì)譜裂解路徑見圖7中路徑III。

化合物20準(zhǔn)分子離子峰是m/z225.1，通過軟件計(jì)算其分子組成，推測該化合物分子式為C11H12O5，加和離子為[M+H]+，m/z193.0推斷為準(zhǔn)分子離子丟失一個CH4O(32 u)所產(chǎn)生，m/z165.1推斷為繼續(xù)丟失一個CO(28 u)所產(chǎn)生，上述2種碎片與芥子酸分子丟失CH4O、CO所得碎片完全一致，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)[19]，推斷化合物20為芥子酸，推測的質(zhì)譜裂解路徑見圖7中路徑IV。

圖7 酸類化合物質(zhì)譜裂解路徑

化合物21和化合物24準(zhǔn)分子離子峰都是m/z163.0，加和離子為[M-H]-，通過軟件計(jì)算其分子組成，推測該化合物分子式為C9H8O3，推斷化合物21和24為同分異構(gòu)體，且2個化合物碎片相同，m/z119.1推斷為準(zhǔn)分子離子丟失一個CO2(44 u)所產(chǎn)生，m/z117.0推斷為繼續(xù)丟失一個H2(2 u)所產(chǎn)生，上述2種碎片與香豆酸分子丟失CO2、H2所得碎片完全一致，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)[12]，推斷化合物21和24為香豆酸，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)可以推測肉桂的化學(xué)成分中通常包括對香豆酸和鄰香豆酸，2個化合物由于苯環(huán)羥基的取代位置不同，導(dǎo)致化合物極性有差異，其中對香豆酸極性較強(qiáng)，在反相色譜中優(yōu)先被洗脫出來，因此推測化合物21(保留時間9.90 min)為對香豆酸，化合物24(保留時間12.97 min)為鄰香豆酸，推測的質(zhì)譜裂解路徑見圖7路徑V。

化合物23準(zhǔn)分子離子峰是m/z355.1，通過軟件計(jì)算其分子組成，推測該化合物分子式為C16H18O9，加和離子為[M+H]+，m/z193.0推斷為準(zhǔn)分子離子丟失一個咖啡酸(180 u)所產(chǎn)生，m/z163.0推斷為準(zhǔn)分子離子丟失一個奎寧酸(192 u)后繼續(xù)丟失一個H2O(18 u)所產(chǎn)生，上述2種碎片與綠原酸酯鍵斷裂所得碎片完全一致，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)[19]，推斷化合物23為綠原酸，推測的質(zhì)譜裂解路徑見圖7路徑VI。

化合物25準(zhǔn)分子離子峰是m/z149.1，加和離子為[M+H]+，通過軟件計(jì)算其分子組成，推測該化合物分子式為C9H8O2，m/z131.0推斷為準(zhǔn)分子離子丟失1個H2O(18 u)所產(chǎn)生，m/z103.1推斷為準(zhǔn)分子離子丟失一個H2O后繼續(xù)丟失1個CO(28 u)所產(chǎn)生，上述碎片與肉桂酸在羧基位點(diǎn)連續(xù)丟失 H2O 和CO所得碎片完全一致，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)[12]，推斷化合物25為肉桂酸。推測的質(zhì)譜裂解路徑見圖7路徑VII。

化合物26準(zhǔn)分子離子峰是m/z339.3，加和離子為[M-H]-，通過軟件計(jì)算其分子組成，推測該化合物分子式為C22H44O2，m/z183.0推斷為準(zhǔn)分子離子丟失1個C11H24(156 u)所產(chǎn)生，上述碎片與山崳酸在碳鏈中間斷裂所得碎片完全一致，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)[12]，推斷化合物26為山崳酸。推測的質(zhì)譜裂解路徑見圖7路徑VIII。

肉桂蒸油剩余物中酸類化合物的質(zhì)譜行為研究表明： 1) 具有甲氧基的取代酸類化合物，如化合物18、 20，在正離子模式下容易丟失CH4O和CO，在負(fù)離子模式下容易丟失CH2O和CO2。2) 無甲氧基的取代酸類化合物，如化合物19、 21、 22、 23、 24，在正離子模式或負(fù)離子模式下容易直接丟失CO2或CO。

3 結(jié) 論

3.1本研究采用UHPLC-QTOF MS技術(shù)在肉桂蒸油剩余物中鑒定出26個化學(xué)成分，包括2個酚類成分，3個黃酮類成分，5個糖苷類成分，4個醇類成分，3個醛類成分和9個酸類成分。其中，多數(shù)肉桂黃酮類成分在治療心血管疾病、糖尿病等方面具有一定的藥用價(jià)值，在開發(fā)天然防腐劑、抗菌劑和抗氧化劑方面具有廣闊的應(yīng)用前景。肉桂醛、鄰甲氧基肉桂醛等少數(shù)化合物屬于肉桂油的成分，但高溫蒸油環(huán)境增加了其在水中的溶解度，因此在肉桂蒸油剩余物中被高靈敏度的質(zhì)譜檢測器檢出。

3.2肉桂蒸油剩余物中種類最豐富的為酸類成分，并且以酚酸類化合物為主。有甲氧基取代的酚酸類化合物在正離子模式下容易丟失CH4O和CO，從而產(chǎn)生32 u和28 u的中性丟失，在負(fù)離子模式下容易丟失CH2O和CO2，從而產(chǎn)生30 u和44 u的特征性中性丟失。無甲氧基取代的酚酸類化合物則容易直接丟失CO2或CO。

3.3肉桂蒸油剩余物中黃酮類化合物數(shù)量僅次于酸類，包括槲皮素、山柰酚和木犀草素和4個黃酮苷，結(jié)構(gòu)區(qū)別在于A/B環(huán)上的羥基位置或數(shù)量不同，在正離子模式下都可以通過RDA反應(yīng)產(chǎn)生m/z153的特征碎片。