王長斌,陳建英,孔 霞
(1. 山東省藥學(xué)科學(xué)院,山東 濟(jì)南 250101;2. 魯南厚普制藥有限公司,山東 臨沂 276003)
玻色因(Pro-Xylane),化學(xué)名為羥丙基四氫吡喃三醇(CAS號439685-79-7),是一種具有抗衰老活性的木糖衍生物,常用于化妝品中。研究證明,玻色因可直接影響皮膚三層結(jié)構(gòu)中的細(xì)胞外基質(zhì),影響糖胺聚糖(GAG)的分泌,促進(jìn)皮膚中GAG的合成,改善真皮與表皮間的黏合度,促進(jìn)受損組織的再生,幫助維持真皮的彈性,可有效地保持皮膚緊致細(xì)膩,延緩皮膚的衰老。目前,生產(chǎn)玻色因的方法主要有兩種,一種是生物合成方法[1-2],酶的選擇有一定難度,其收率可能低于化學(xué)合成法,反應(yīng)過程中可能會引入酶蛋白,產(chǎn)生一定的生物膠體。另一種方法是化學(xué)合成法,國內(nèi)外僅有少量的文獻(xiàn)公開了化學(xué)合成玻色因的方法。Cavezza等[3]以木糖為原料,在堿性條件下,與乙酰丙酮縮合反應(yīng)12 h,經(jīng)強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂酸化,再用硼氫化物對羰基還原反應(yīng)12 h,合成玻色因。因反應(yīng)條件環(huán)保低毒,是綠色化學(xué)被應(yīng)用到化妝品的第一個(gè)成功范例。Philippe等[4]于2014年以木糖為原料,在碳酸氫鈉作用下,與乙酰丙酮進(jìn)行縮合反應(yīng),轉(zhuǎn)換為 C-糖苷,再用重金屬催化劑Ru/C對羰基還原,合成玻色因。黃冬婷等[5]對此路線進(jìn)行了改進(jìn),第一步是以木糖為原料,采用強(qiáng)堿性陰離子樹脂代替了普通的無機(jī)堿,第二步再用硼氫化鈉對羰基進(jìn)行還原,合成玻色因。由于這兩步反應(yīng)的產(chǎn)物均采用了柱層析純化,操作復(fù)雜,工業(yè)化放大有一定難度。
本文在上述化學(xué)合成基礎(chǔ)上,對反應(yīng)條件進(jìn)行了優(yōu)化。以木糖為原料,在強(qiáng)堿性條件下,與乙酰丙酮縮合反應(yīng)1 h,經(jīng)鹽酸酸化,乙醇處理得到中間體;再采用了較為溫和的三乙酰氧基硼氫化鈉對羰基還原5 h,2 mol/L鹽酸處理,乙酸乙酯萃取,得到玻色因。兩步化學(xué)反應(yīng)時(shí)間短,各反應(yīng)物料常見,整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程簡單,易操作。
優(yōu)化后的合成路線見圖1。
圖1 玻色因的合成路線
INOVA-300核磁共振波譜儀(美國Varian,內(nèi)標(biāo)TMS);4000 Qtrap質(zhì)譜儀(美國AB)。
D-木糖(阿拉丁試劑);乙酰丙酮(上海國藥試劑);三乙酰氧基硼氫化鈉(阿拉丁試劑);其余試劑為分析純。
向500 ml四口瓶中加入氫氧化鉀(6.7 g,0.12 mol)和水(130 ml),攪拌至溶解,加入D-木糖(15.0 g,0.1 mol),溶解后,再加入乙酰丙酮(12.0 g,0.12 mol),升溫至80 ℃,繼續(xù)反應(yīng)1 h,反應(yīng)液用TLC檢測至D-木糖基本消失(GF254硅膠板,展開劑為二氯甲烷:甲醇=4:1,20 %硫酸乙醇溶液顯色),反應(yīng)結(jié)束。用2 mol/L鹽酸調(diào)pH至中性,旋蒸除去溶劑和低沸物,余下黏稠物用200 ml乙醇溶解,濾除未溶物,旋干,得到淺黃色油狀物,即為中間體1-C-(β-D-吡喃木糖基)丙酮,收率>90 %。ESI-MSm/z:213.07378[M+Na]+。
向500 ml四口瓶中加入1-C-(β-D-吡喃木糖基)丙酮(17.1 g,0.09 mol)和無水乙醇(250 ml),在0~5 ℃,加入三乙酰氧基硼氫化鈉(25.4 g,0.12 mol),攪拌反應(yīng)5 h,反應(yīng)液用TLC檢測至中間體基本消失(GF254硅膠板,展開劑為二氯甲烷:甲醇=3:1,20 %硫酸乙醇溶液顯色),反應(yīng)結(jié)束。緩慢滴加2 mol/L鹽酸,調(diào)pH至中性。加入乙酸乙酯萃取分液,有機(jī)相旋干,得無色至微黃色液體,即為玻色因,收率>80 %。ESI-MSm/z:215.08780[M+Na]+,1H NMR(300 MHz,D2O)δ:3.95(m,1H);3.82(m,1H);3.46(m,1H);3.33~3.04(m,4H);1.81(m,1H);1.55(m,1H);1.08(s,3H)。
本文以常見的D-木糖為起始原料,在堿性條件下與乙酰丙酮反應(yīng),將半縮醛羥基取代為C-糖苷,合成1-C-(β-D-吡喃木糖基)丙酮。再用三乙酰氧基硼氫化鈉將羰基還原為羥基,經(jīng)兩步反應(yīng)即得玻色因,并通過TLC對實(shí)驗(yàn)過程進(jìn)行監(jiān)控,用TLC、高分辨MS和1H NMR對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行確證。采用了反應(yīng)較為溫和的三乙酰氧基硼氫化鈉替代硼氫化鈉,5 h即可將羰基還原為羥基。其后處理用2 mol/L鹽酸對其進(jìn)行分解,不會產(chǎn)生大量氫氣,降低了生產(chǎn)的危險(xiǎn)系數(shù)??傊摴に嚨母魑锪铣R娨椎?,價(jià)格便宜,反應(yīng)時(shí)間短,操作簡單易行,適合工業(yè)化生產(chǎn)。