血細(xì)胞分析儀測血小板結(jié)果偏低的原因分析及對策

馬國福

（吐魯番市高昌區(qū)人民醫(yī)院，新疆 吐魯番）

0 引言

血細(xì)胞分析儀，又稱之為血液細(xì)胞分析儀或血球儀等，屬于醫(yī)院中臨床檢驗極為廣泛應(yīng)用的檢測儀器之一，隨著現(xiàn)代計算機(jī)技術(shù)的不斷發(fā)展，血細(xì)胞分析儀對于各類疾病的血小板檢出率越來越高，具有快速和方便以及重復(fù)性好等優(yōu)勢，而血小板技術(shù)屬于肝炎患者血液學(xué)檢查的動態(tài)指標(biāo)之一，但目前在臨床檢測中時常伴有肝炎患者的血小板計數(shù)結(jié)果偏低的問題[1]。因此，我院探討了血細(xì)胞分析儀測血小板結(jié)果偏低的原因并提出分析對策，現(xiàn)報告如下。

1 對象和方法

1.1 對象

選擇我院2019年2月至2020年2月收治的60例肝炎患者，根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法分為觀察組和對照組，觀察組30例，對照組30例。觀察組男25例，女5例。年齡35～70歲，平均（50.05±5.15）歲。對照組男15例，女15例，年齡38～70歲，平均（50.25±5.05）歲。兩組一般資料無明顯差異（P＞0.05），存在可比性。

1.2 方法

選擇深圳市庫貝爾生物科技有限公司生產(chǎn)的μs-2000五分類全自動血液細(xì)胞分析儀，采用與該血液細(xì)胞分析儀配套的稀釋液、溶血劑和清潔液，按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》配置血小板稀釋液，并放置冷凍設(shè)備儲藏，采用EDTA-K2抗凝劑[2]。

采用1 mL EDTA-K2抗凝全血，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝螅? h之內(nèi)通過μs-2000五分類全自動血液細(xì)胞分析儀進(jìn)行分析。采用顯微鏡法（0.38 mL血小板稀釋液加20 μL血液，攪拌均勻，實(shí)施充液，進(jìn)行鏡檢計數(shù)）計數(shù)血小板，所有標(biāo)本都需要3次計數(shù)結(jié)果，采取3次標(biāo)本結(jié)果中的平均值與血細(xì)胞儀法的結(jié)果進(jìn)行對比，同時涂片瑞氏三染后實(shí)施油鏡鏡檢[3]。

1.3 觀察指標(biāo)

比較兩組患者的計數(shù)值的一致性和差異性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 21.0分析，計數(shù)資料經(jīng)t檢驗，以（±s）表示，計數(shù)資料經(jīng)χ2檢驗，以（%）表示，差異有統(tǒng)計學(xué)意義為P＜0.05。

2 結(jié)果

2.1 兩組一致性標(biāo)本對比

兩組的測定結(jié)果具有一致性的有49例標(biāo)本，就結(jié)果的一致性部分而言，兩組患者無顯著差異（P＞0.05），并且該類標(biāo)本中的血小板直方圖都分布在15 fL以內(nèi)，具有鮮明的主峰，通過涂片瑞氏染色油鏡，可清楚觀察到血小板呈現(xiàn)均勻散在的狀態(tài)，形態(tài)無異常。

2.2 兩組差異性標(biāo)本對比

兩組測定結(jié)果中差異性較大的有11例標(biāo)本，觀察組與對照組的計數(shù)值比較，觀察組的計數(shù)值顯著高于對照組的計數(shù)值（P＜0.05），其中血小板直方圖有7例的分布方式低而寬，左側(cè)峰值起點(diǎn)較高，右峰值較高，顯著區(qū)別于正常圖。白細(xì)胞直方圖可見一處小峰，瑞氏染色涂片可明顯看見聚集血小板。3例血小板直方圖的曲線到達(dá)峰值后，無明顯下降，無右邊界下降到最低值。瑞氏染色涂片顯著可見大血小板。3例血小板直方圖變化呈現(xiàn)不規(guī)則樣式，顯著區(qū)別于正態(tài)分布曲線。涂片上偶然可見大血小板，無其他顯著異常發(fā)生。

2.3 糾正方法

2.3.1 顯微鏡計數(shù)法糾正

儀器無法直觀地顯示異常直方圖標(biāo)本樣品的準(zhǔn)確值，所以在臨床檢測時，必須采用顯微鏡計數(shù)法糾正，具體的實(shí)施方法為：取20 μL同一批混合的全血標(biāo)本加入0.38 mL血小板稀釋液加20 μL血液，攪拌均勻，實(shí)施充液，靜置5 min后，實(shí)施鏡檢計數(shù)[4]。

2.3.2 抽血糾正

部分標(biāo)本存在抽血不順或未充分混勻的現(xiàn)象，進(jìn)而導(dǎo)致標(biāo)本發(fā)生率肉眼無法可見的微凝現(xiàn)象，此類標(biāo)本在實(shí)施瑞氏染色涂片后可見血小板大量聚集，應(yīng)重新實(shí)施抽血后，再進(jìn)行測定。

2.3.3 冷凝集糾正

部分標(biāo)本因為冷凝集的冷凍效果影響，導(dǎo)致血小板技術(shù)產(chǎn)生一定偏差，應(yīng)該放置在37 ℃的水浴箱中回溫后再實(shí)施測定。

2.3.4 手動檢測糾正

部分標(biāo)本在實(shí)施單份標(biāo)本手動檢測的時候沒有混勻，上機(jī)就進(jìn)行操作是血小板總體結(jié)果偏低的一大因素，所以規(guī)范化和標(biāo)準(zhǔn)化才做，能夠大大減少結(jié)果偏差。

3 討論

根據(jù)有關(guān)臨床報道，部分肝炎患者的體外EDTA抗凝血，處于室溫條件下血小板會產(chǎn)生FDTA的依賴性凝聚，血細(xì)胞無法完全確定血小板數(shù)和凝集體的結(jié)構(gòu)，促使血小板的測定結(jié)果降低。并且血小板EDTA依賴性凝聚和患者血清中的抗心磷脂抗體的滴度以及血小板表面抗原的自身抗體具有關(guān)聯(lián)性[5]。在HBV的長期刺激下，機(jī)體缺乏正常的免疫調(diào)節(jié)功能和T下包功能，促使B細(xì)胞無法正常的產(chǎn)生抗體，進(jìn)而產(chǎn)生抗血小板的自身抗體[6]。另外，有學(xué)者認(rèn)為抗血小板的抗體產(chǎn)生的主要場所在外脾臟，肝炎能夠?qū)е聶C(jī)體脾功能亢進(jìn)，所以臨床上認(rèn)為部分肝病患者血小板計數(shù)較低的原因在于患者自身血小板產(chǎn)生EDTA依賴性凝聚[7-8]。

在本次研究中對我院觀察組30例肝炎患者實(shí)施了顯微鏡計數(shù)法檢測，取得了顯著的效果：兩組的測定結(jié)果具有一致性的有49例標(biāo)本，就結(jié)果的一致性部分而言，兩組患者無顯著差異（P＞0.05），并且該類標(biāo)本中的血小板直方圖都分布在15 fL以內(nèi)，具有鮮明的主峰，通過涂片瑞氏染色油鏡，可清楚觀察到血小板呈現(xiàn)均勻散在的狀態(tài)，形態(tài)無異常；兩組測定結(jié)果中差異性較大的有11例標(biāo)本，觀察組與對照組的計數(shù)值比較，觀察組的計數(shù)值顯著高于對照組的計數(shù)值（P＜0.05）。

綜上所述，在血細(xì)胞分析儀測試血小板結(jié)果的時候，伴有部分結(jié)果偏低的現(xiàn)象，這是因為儀器受限于性能影響無法計算出樣品的準(zhǔn)確值，必須要實(shí)施顯微鏡計數(shù)法進(jìn)行糾正，部分血小板受到抽血過程、冷凝、手動檢測等因素的影響，對血小板的檢驗造成了一定的干擾，應(yīng)分別針對干擾因素實(shí)施針對性措施。