近紅外光譜法對(duì)鹽酸坦索羅辛緩釋膠囊的定量分析

田國(guó)賀，王保森，韓曉紅

（吉林省藥品檢驗(yàn)所，吉林 長(zhǎng)春 130033）

鹽酸坦索羅辛緩釋膠囊用于治療前列腺增生癥引起的排尿障礙。臨床應(yīng)用十分廣泛。該品種法定含量測(cè)定方法為帶內(nèi)標(biāo)物的高效液相法，樣品制備過程均較為復(fù)雜。同時(shí)緩釋制劑的生產(chǎn)工藝復(fù)雜，因此建立一種快速的定量分析方法有利于縮短生產(chǎn)企業(yè)工藝條件摸索的時(shí)間和經(jīng)濟(jì)成本，有望實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品的在線的質(zhì)量監(jiān)控。

近紅外光譜分析利用光譜所包含的物質(zhì)信息與化學(xué)計(jì)量學(xué)結(jié)合，提取光譜中的有效信息建立模型，對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性、定量分析[1,2]。近紅外光譜分析（NIRS）技術(shù)具有操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確度高、無(wú)污染、分析時(shí)間短等特點(diǎn)。在藥品領(lǐng)域中，該技術(shù)廣泛應(yīng)用于產(chǎn)品質(zhì)量及批次工藝一致性的分析、中藥材鑒別、中藥生產(chǎn)檢驗(yàn)、藥用植物品種鑒定等方面[3-5]。近年來(lái)近紅外定量分析是以建立模型為基礎(chǔ)，對(duì)未知樣品進(jìn)行預(yù)測(cè)的二次分析方法，由于光譜采集較為簡(jiǎn)單，對(duì)于大量樣品的分析十分有效。

本文采用近紅外光纖漫反射光譜法，采用固體光纖探頭，對(duì)收集到得全國(guó)6家企業(yè)98批鹽酸坦索羅辛緩釋膠囊直接進(jìn)行快速、無(wú)損測(cè)定。建立的定量分析方法用于評(píng)價(jià)鹽酸坦索羅辛緩釋膠囊的產(chǎn)品質(zhì)量。

1 實(shí)驗(yàn)方法

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑

Matrix-F型近紅外掃描儀, OPUS 7.8光譜采集和處理軟件（德國(guó)布魯克光學(xué)儀器公司）；Agilent1260全自動(dòng)高效液相色譜儀；Alltech Apollo C18 250×4.6 mm，5 μm色譜柱；Sartorius BT25S電子天平，鹽酸坦索羅辛對(duì)照品購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院（批號(hào)：100688-20110），乙腈、甲醇均為色譜純，水為超純水，其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.2 方法

1.2.1 HPLC法測(cè)定鹽酸坦索羅辛緩釋膠囊主成分含量

色譜條件：流動(dòng)相為乙腈—高氯酸溶液（取高氯酸8.7 mL和氫氧化鈉3g，加水1900 mL溶解，用氫氧化鈉試液調(diào)pH值至2.0，加水至2000 mL）（3:7）；十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱；檢測(cè)波長(zhǎng)225 nm。

測(cè)定法：取對(duì)羥基苯甲酸丙酯適量，精密稱定，加流動(dòng)相溶液溶解并稀釋制成每1 mL中含0.4 mg的內(nèi)標(biāo)溶液。取鹽酸坦索羅辛對(duì)照品，精密稱定，加流動(dòng)相溶液溶解并稀釋成每1 mL中約含0.2 mg的對(duì)照品溶液；精密量取對(duì)照品溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各5 mL，置50 mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，取10 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取供試品內(nèi)容物，精密稱取約相當(dāng)于鹽酸坦索羅辛1.0 mg的內(nèi)容物，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液5 mL，加入流動(dòng)相定容至50ml，作為供試品溶液，同法測(cè)定，按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

1.2.2 近紅外光譜的采集

采用漫反射模塊采集NIRS圖譜，采用無(wú)損傷測(cè)定，不破壞樣品的包裝，用漫反射光纖探頭壓住鋁塑包裝，以儀器內(nèi)置背景為參比，光譜掃描范圍12000～4000 cm-1，分辨率8 cm-1，掃描次數(shù)32次，對(duì)每批樣品進(jìn)行掃描6次，計(jì)算平均光譜，共采集6個(gè)企業(yè)的98批鋁塑包裝制劑的近紅外光譜圖，鹽酸坦索羅辛緩釋膠囊的代表光譜圖見圖1。

圖1 鹽酸坦索羅辛緩釋膠囊的代表光譜圖

2 結(jié) 果

2.1 定量分析模型的建立

在近紅外光譜測(cè)量過程中，由于多重因素影響，導(dǎo)致光譜中含有噪聲、基線漂移和波長(zhǎng)漂移等不穩(wěn)定因素。因此對(duì)光譜信號(hào)進(jìn)行消除噪聲的預(yù)處理十分必要。Quant2定量分析軟件提供10種圖譜預(yù)處理方法。分別采用這十種預(yù)處理方法處理建模樣品的原始圖譜，結(jié)果表明在近紅外譜段11995～6097.8 cm-1、5453.7～4597.5 cm-1，Vector Normalization和Straight Line Substraction相結(jié)合的預(yù)處理方法模型的預(yù)測(cè)結(jié)果較好。

建模樣品的含量范圍（0.0904 mg/mg（%）～0.2957 mg/mg（%））已覆蓋了規(guī)格為0.2 mg的所有待測(cè)樣品濃度。以PLS法進(jìn)行化學(xué)計(jì)量學(xué)計(jì)算，選擇該軟件推薦的最佳因子數(shù)（Rank=8）建立NIR定量測(cè)定模型。

2.2 PLS模型的建立與驗(yàn)證

可采用內(nèi)部交叉驗(yàn)證和外部驗(yàn)證兩種方式評(píng)價(jià)模型。其中對(duì)模型進(jìn)行內(nèi)部交叉法驗(yàn)證，均方根誤差RMSECV和交叉驗(yàn)證相關(guān)系數(shù)R；隨機(jī)選取70批樣品作為校正集，其他20批樣品作為驗(yàn)證集，進(jìn)行外部驗(yàn)證，得到外部驗(yàn)證均方根誤差RMSEP 和校正相關(guān)系數(shù)R。驗(yàn)證結(jié)果見表1.

表1 檢驗(yàn)與校正的結(jié)果

R值表示校正集樣品中預(yù)測(cè)值與理論值的相關(guān)程度,其越接近100%，預(yù)測(cè)效果越好；RMSECV和RMSEP用于衡量校正集樣品預(yù)測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,當(dāng)RMSECV和RMSEP的差異越小，校正集樣品的預(yù)測(cè)結(jié)果越接近理論值[11],由此可確定該模型具有良好的預(yù)測(cè)能力。

3 討 論

近紅外技術(shù)可以減少采用高相液相法進(jìn)行含量測(cè)定中帶來(lái)的材料損耗大和時(shí)間長(zhǎng)的問題，其是一種快速且較為準(zhǔn)確的定量分析方法。本文的近紅外定量分析的方法并非通用型方法，局限性在于只能對(duì)該品種該劑型適用。本文所涉及的樣品涉及到全國(guó)范圍內(nèi)所有生產(chǎn)鹽酸坦索羅辛緩釋膠囊品種，代表性較強(qiáng)，但仍需要在今后工作中不斷補(bǔ)充模型庫(kù)。