劉寶生,胡瑞瑞,白鵬華,李建成
(1.天津市植物保護研究所,天津 300384;2.河北省農(nóng)林科學(xué)院植物保護研究所,河北 保定 071000)
桃是我國重要的經(jīng)濟水果,栽種面積占全世界的一半左右,產(chǎn)量居世界第一[1]。近年來,大量桃粉蚜(Hyalopterus amygdali Blanchard)在套袋桃園內(nèi)發(fā)生,且有逐年增長的趨勢,部分地區(qū)蚜蟲危害程度僅次于甚至接近蛀果類害蟲[2]。
桃粉蚜又名桃粉大尾蚜,屬同翅目(Homoptera)蚜科(Aphididae)大尾蚜屬(Hyaloptera Koch)[3],是天津桃園普遍發(fā)生的一種重要害蟲。桃粉蚜的寄主植物因季節(jié)不同而不同,早春和越冬寄主除桃樹外,還有梨樹、杏樹、李子樹等果樹;夏、秋寄主為禾本科雜草[4]。無翅胎生雌蚜群集于嫩葉背面和嫩梢下,以吸食汁液產(chǎn)生危害;且常分泌可引起煤污病發(fā)生的白色蜜露,嚴(yán)重時使枝葉呈暗黑色,受桃粉蚜危害后的葉片向背對合縱卷,影響植株的生長和果實產(chǎn)量[5]。
目前,國內(nèi)外對蚜蟲的防治還是主要依靠化學(xué)方法,常用的化學(xué)殺蟲劑有氨基甲酸酯類、擬除蟲菊酯類、有機磷類和新煙堿類,包含觸殺性和內(nèi)吸性兩類[6]。但由于該方法的不合理使用,使害蟲不斷對農(nóng)藥產(chǎn)生抗性,且對環(huán)境和人類健康造成嚴(yán)重損害。所以,近年來以植物源殺蟲劑為主的生物防治方法受到普遍重視。具有抗重要作物害蟲活性化合物的植物有桃科、樟科、蕓香科、唇形科、菊科、傘形科、柏科、姜科、胡椒科、百合科、夾竹桃科、茄科和麻豆科[7-9]。一些具有農(nóng)藥活性的植物化合物已被成功分離并制成產(chǎn)品,包括印楝素和除蟲菊酯[10,11]。已有研究表明蒼耳(Xanthium sibiricum)、花椒(Zanthoxylum bungeanum)等植物提取物對蘿卜蚜(Lipaphis erysimi)和桃蚜(Myzus persicae)有顯著的拒食作用[12];核桃(Juglans regia)青皮提取物對小麥蚜蟲具有較好的毒殺作用和較高的拒食活性[13];竹子提取物對蚜蟲也有良好的觸殺和拒食作用[14];林開春[15]的研究結(jié)果表明蛇床子(Cnidium monnieri)提取物對蚜蟲和茶尺蠖均有較好的觸殺效果。
麻黃和防風(fēng)提取物對桃粉蚜的防治效果研究尚屬空白,目前國內(nèi)只有3個專利批準(zhǔn)了將其粉劑以一定比例和其它成分復(fù)配作為殺蟲劑防治蚜蟲[16-18]。因此,本試驗在前人研究的基礎(chǔ)上,選取蛇床子、蒼耳、麻黃和防風(fēng)為供試材料,比較了4種中藥材提取物對桃粉蚜的觸殺效果,為開發(fā)低毒高效的植物源殺蟲劑提供依據(jù)。
桃粉蚜(Hyalopterus amygdali)收集于天津市農(nóng)業(yè)科學(xué)院桃樹上。4種中藥材均購于藥店,供試中藥材的具體信息見表1。
表1 供試中藥植物
1.2.1 中藥材粗提物的制備 將自然風(fēng)干的4種中藥材粉碎,過100目篩,稱取20 g,加80%乙醇200 mL,28℃、150 r/min恒溫振蕩提取12 h,再經(jīng)超聲波提取25 min,過濾。濾液置于4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>
采用梯度稀釋法將4種中藥材粗提物分別稀釋為100.0、10.0、1.0、0.1 mg/mL。
1.2.2 觸殺活性測定 將新鮮的帶有蚜蟲的桃葉帶回實驗室,除去死蚜及過大和過小的蚜蟲,保留個體一致的中等活蚜,使每片桃葉上的蚜蟲數(shù)量保持在40頭左右,并統(tǒng)計具體蟲口數(shù)量。采用浸蟲浸液法將有蚜蟲的桃葉一起浸入提取液中,5 s后取出,自然晾干,蒸餾水處理作為對照組。每處理3個重復(fù)。晾干后,用浸水棉球裹住桃葉基部,使葉片保持新鮮,放入墊有濾紙的培養(yǎng)皿(Φ=9 cm)中進行觀察。
1.2.3 毒力測定 將有蚜蟲的桃葉分別浸入濃度為100.0、10.0、1.0、0.1 mg/mL的提取液中,進行毒力測定。
死亡率(%)=死亡蟲數(shù)/供試蟲數(shù)×100;
校正死亡率(%)=(處理死亡率-對照死亡率)/(1-對照死亡率)×100。
采用SPSS 17.0軟件進行單因素方差分析,用Duncan’s新復(fù)極差法(DMRT)進行差異顯著性分析,并計算4種中藥材提取物的毒力回歸方程、致死中濃度(LC50)及95%置信區(qū)間。
由圖1可知,4種中藥材提取物原液對桃粉蚜均有不同程度的觸殺活性,且校正死亡率隨接觸時間的延長而升高。其中,蛇床子和蒼耳對桃粉蚜的觸殺活性較強,在接觸12 h時校正死亡率即可達75.00%以上。防風(fēng)提取物在12 h和24 h的校正死亡率分別為46.06%和88.71%,增幅為92.60%。麻黃提取物的校正死亡率在兩個觸殺時間段內(nèi)增加幅度較一致。4種中藥材提取物在觸殺時間為48 h的校正死亡率均接近100%。
由表2可知,不同濃度的4種中藥提取物對桃粉蚜均有不同程度的觸殺活性,且校正死亡率隨提取物濃度的升高而提高。當(dāng)濃度為10.0 mg/mL時,4種中藥材提取物的24 h校正死亡率均在50%以上;當(dāng)濃度為1.0 mg/mL時,只有麻黃提取物的48 h校正死亡率低于50%??偟膩碚f,4種中藥材提取物24 h和48 h的校正死亡率均為蛇床子>蒼耳>防風(fēng)>麻黃。方差分析表明,除了蛇麻子24 h的校正死亡率外,各提取物不同濃度24 h和48 h的校正死亡率均存在顯著差異。
圖1 4種中藥材提取物對桃粉蚜的觸殺活性
表2 不同濃度提取物對桃粉蚜的觸殺活性
由表3可知,24 h對桃粉蚜毒力最強的是蛇床子提取物,LC50值為0.346 mg/mL;蒼耳和防風(fēng)提取物對桃粉蚜的毒力次之且二者的LC50值較為接近;麻黃提取物對桃粉蚜的毒力最弱,LC50值為1.278 mg/mL。48 h對桃粉蚜毒力最強的是蒼耳提取物,LC50值為3.300×10-3mg/mL;蛇床子和防風(fēng)提取物對桃粉蚜的毒力相當(dāng),LC50值分別為4.743×10-3mg/mL和4.767×10-3mg/mL。
表3 4種中藥提取物對桃粉蚜的毒力
蛇床子、蒼耳、防風(fēng)和麻黃是常用的傳統(tǒng)中藥,主要含有苷類、醇類、酯類、香豆素類、多糖類、有機酸類、聚乙炔類等成分[19-22]。蛇床子可以防治多種蚜蟲,其主要成分蛇床子素已被開發(fā)為生物農(nóng)藥應(yīng)用于防治包括蚜蟲在內(nèi)的多種害蟲[23]。多數(shù)菊科類植物含有豐富的具有殺蟲作用的生物堿,其中蒼耳對蚜蟲、菜青蟲、紅蜘蛛等多種害蟲具有顯著的防治及殺滅作用[24,25]。防風(fēng)提取物對斜紋夜蛾的生物活性有一定的影響[26]。
本試驗是在室內(nèi)條件下進行,可以保證提取藥液與供試蚜蟲充分接觸,但與田間的實際環(huán)境條件有一定差異。因此,4種中藥材提取物在田間對桃粉蚜的作用效果還需進一步研究。同一種植物在不同溶劑和萃取劑中所獲得的提取物的種類和數(shù)量可能會有差異[27],加之本試驗中應(yīng)用的是粗提物,若要在田間進行藥效試驗,還有待進一步對其活性成分進行分離純化。另外,為了降低生產(chǎn)成本,使小農(nóng)戶可以負擔(dān)并采用安全的防控產(chǎn)品,繼續(xù)探索利用廉價溶劑加工和提取植物殺蟲劑成為了一個亟需解決的科學(xué)問題[28]。
4種中藥材提取物原液對桃粉蚜均有不同程度的觸殺活性,且桃粉蚜的校正死亡率隨著接觸時間的延長而升高;4種提取物對桃粉蚜的校正死亡率隨提取物濃度的升高而升高,且24 h和48 h的校正死亡率均為蛇床子>蒼耳>防風(fēng)>麻黃;24 h對桃粉蚜毒力最強的是蛇床子,LC50值為0.346 mg/mL,48 h對桃粉蚜毒力最強的是蒼耳,LC50值為3.300×10-3mg/mL。