宋 博

（平頂山市畜牧技術(shù)推廣站，河南 平頂山467000）

為初步弄清平頂山部分地區(qū)奶牛病毒性腹瀉?。˙VDV）流行情況，為該病防控措施的制定提供數(shù)據(jù)支持，筆者于2016-2017年從平頂山市部分地區(qū)12個(gè)奶牛場(chǎng)收集血清樣品共597份，應(yīng)用ELISA檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)血清中BVDV抗體。結(jié)果顯示，12個(gè)奶牛場(chǎng)檢測(cè)含有BVDV抗體陽(yáng)性奶牛，不同奶牛場(chǎng)陽(yáng)性率為23.08%～60.47%，平均陽(yáng)性率為49.92%；規(guī)?；膛?chǎng)陽(yáng)性率較散養(yǎng)奶牛場(chǎng)高，分別為53.75%和32.69%。研究結(jié)果表明：奶牛BVDV 在平頂山市被調(diào)查的地區(qū)流行情況較為嚴(yán)重，需引起養(yǎng)殖戶和相關(guān)防疫部門(mén)的重視。

奶牛病毒性腹瀉?。˙VD）是由牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）感染奶牛所引起的一種腸道疾病，患牛主要臨床癥狀表現(xiàn)為腹瀉，腸道黏膜壞死，懷孕母牛流產(chǎn)、死胎等，嚴(yán)重制約奶牛養(yǎng)殖的發(fā)展。有關(guān)專家在2009年對(duì)河南省部分地區(qū)奶牛進(jìn)行BVDV 血清學(xué)調(diào)查，發(fā)現(xiàn)其陽(yáng)性率為53.8%，可見(jiàn)該病在河南省部分地區(qū)流行情況較為嚴(yán)峻。為保障平頂山市奶牛養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展，此次研究通過(guò)對(duì)平頂山市部分地區(qū)12 個(gè)奶牛場(chǎng)采集的597 份血清樣品進(jìn)行BVDV抗體檢測(cè)，初步了解該病在平頂山市流行情況與分布特點(diǎn)，旨在為該病的進(jìn)一步防控提供數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 樣品來(lái)源

此次研究從平頂山市4 個(gè)地區(qū)隨機(jī)選擇12 個(gè)具有代表性的奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)（每個(gè)地區(qū)選擇3個(gè)奶牛場(chǎng)），采集血清樣品共597份，被調(diào)查奶牛場(chǎng)均未對(duì)奶牛進(jìn)行BVDV疫苗免疫接種。頸靜脈無(wú)菌采血5 ml/頭，室溫靜置3～5 h后收集上清置于滅菌1.5 ml 離心管內(nèi)，于3 000 rpm 高速離心5 min，取上清，分別進(jìn)行標(biāo)記后，低溫保存，待檢。

1.2 主要試劑與儀器

牛BVDV 抗體ELISA 檢測(cè)試劑盒購(gòu)于美國(guó)RB 公司；酶標(biāo)儀、微量移液器、恒溫水浴鍋、振蕩器等儀器實(shí)驗(yàn)室自備。

1.3 試驗(yàn)方法與判定標(biāo)準(zhǔn)

試驗(yàn)檢測(cè)方法和判定標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格按照購(gòu)買(mǎi)的牛BVDV血清抗體ELISA檢測(cè)試劑盒提供的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

2 調(diào)查結(jié)果

2.1 平頂山市部分地區(qū)奶牛BVDV血清抗體檢測(cè)結(jié)果

調(diào)查結(jié)果表1所示，此次研究共對(duì)平頂山市12個(gè)奶牛場(chǎng)共597份血清樣品進(jìn)行BVDV抗體進(jìn)行檢測(cè)，12個(gè)奶牛場(chǎng)均含有BVDV血清抗體陽(yáng)性奶牛，場(chǎng)陽(yáng)性率為100.0%，不同奶牛場(chǎng)陽(yáng)性率存在一定差異，為23.08%～60.47%，不同奶牛場(chǎng)血清陽(yáng)性率差異極顯著（P＜0.01）；不同地區(qū)奶牛BVDV 血清陽(yáng)性率為40.60%、50.00%、55.19%和50.28%，不同地區(qū)奶牛血清陽(yáng)性率差異極顯著（P＜0.01）。

表1 平頂山市不同地區(qū)奶牛病毒性腹瀉病血清學(xué)調(diào)查結(jié)果

D 10 11 12小計(jì)總計(jì)78 27 72 177 597 39 12 38 89 296 50.0 44.44 52.78 50.28 49.58

2.2 不同養(yǎng)殖模式奶牛場(chǎng)BVDV血清抗體檢測(cè)結(jié)果

通過(guò)分析該地區(qū)不同養(yǎng)殖模式奶牛場(chǎng)BVDV 流行情況差異，結(jié)果如表2 所示：被調(diào)查的8 個(gè)規(guī)?；膛?chǎng)共493 份樣品中有265 份檢測(cè)為BVDV 血清抗體陽(yáng)性，平均陽(yáng)性率為53.75%，4個(gè)散養(yǎng)場(chǎng)共104份樣品中有34份檢測(cè)為陽(yáng)性，為32.69%，不同養(yǎng)殖模式奶牛BVDV血清抗體陽(yáng)性率差異顯著（P＜0.05）。

表2 不同養(yǎng)殖模式奶牛場(chǎng)BVDV血清抗體檢測(cè)結(jié)果

2.3 不同年齡階段奶牛BVDV血清抗體檢測(cè)結(jié)果

通過(guò)分析BVDV 在該地區(qū)不同年齡階段奶牛群流行特點(diǎn)，結(jié)果顯示：該地區(qū)不同年齡階段奶牛群均檢測(cè)含有BVDV 血清抗體陽(yáng)性奶牛，其中規(guī)模化奶牛場(chǎng)犢牛、青年奶牛、后備奶牛和泌乳奶牛血清抗體陽(yáng)性率分別為56.25%、57.89%、66.40%和44.57%（P＞0.05）；散養(yǎng)場(chǎng)不同年齡階段奶牛群陽(yáng)性率分別為33.33%、33.33%、37.04%和29.78%（P＜0.01）。詳見(jiàn)表3。

3 討論

奶牛BVD 為一類免疫抑制性疾病，可導(dǎo)致病牛免疫力低下，易誘發(fā)其他病毒性或細(xì)菌性疾病，給奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。此次研究通過(guò)對(duì)平頂山市部分地區(qū)奶牛BVDV 血清抗體檢測(cè)，結(jié)果顯示：被調(diào)查的597 份奶牛血清樣品中有299份樣品檢測(cè)為BVDV抗體陽(yáng)性，陽(yáng)性率為50.08%，調(diào)查結(jié)果與石東梅等調(diào)查結(jié)果基本一致，低于太原地區(qū)調(diào)查結(jié)果（63.50%），但高于河北省廊坊地區(qū)調(diào)查結(jié)果（22.75%），說(shuō)明該病在我國(guó)中部省市地區(qū)流行情況嚴(yán)重，但感染情況存在差異，其內(nèi)在原因需進(jìn)一步調(diào)查。

通過(guò)分析不同養(yǎng)殖模式奶牛群BVDV 抗體陽(yáng)性差異，結(jié)果顯示，規(guī)?；膛?chǎng)BVDV 抗體陽(yáng)性率顯著高于散養(yǎng)奶牛場(chǎng)，分別為53.75%和32.69%，筆者分析其主要原因是：該病臨床癥狀不明顯，但傳播速度較快，而規(guī)?；膛?chǎng)養(yǎng)殖環(huán)境較為恒定，使得該病在規(guī)模化奶牛場(chǎng)傳播速度較快，而不同散養(yǎng)場(chǎng)管理水平存在差異，且相對(duì)獨(dú)立，導(dǎo)致該病在散養(yǎng)場(chǎng)傳播速度有限。值得注意的是，在同種養(yǎng)殖類型奶牛場(chǎng)不同年齡階段奶牛BVDV 陽(yáng)性率差異較小，各飼養(yǎng)模式奶牛群陽(yáng)性率與平均陽(yáng)性率相差不大，可能是由于BVDV 可通過(guò)垂直傳播由患病母牛傳播給犢牛，且患病奶?？砷L(zhǎng)期帶毒并向外排毒，導(dǎo)致該病在各年齡階段奶牛群迅速波及。

表3 不同年齡階段奶牛BVDV血清抗體檢測(cè)結(jié)果

分析總結(jié)防控方法如下：加強(qiáng)奶牛群疫苗免疫；對(duì)引種奶牛進(jìn)行疾病監(jiān)測(cè)，確定為BVDV 血清抗體陰性奶牛后，方可入群；提高對(duì)奶牛群的監(jiān)測(cè)力度，若確定含有BVDV 病原陽(yáng)性奶牛，對(duì)奶牛進(jìn)行及時(shí)淘汰，對(duì)相關(guān)養(yǎng)殖器具進(jìn)行滅菌、消毒等，對(duì)健康奶牛群進(jìn)行緊急免疫等。