王艷芬，呂 濤，舒相華，3，王余磊，張雅靖，黃 鑫，董 燕，宋春蓮*

（1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，云南昆明 650201；2.紅河州蒙自市動物疫病預(yù)防與控制中心，云南蒙自 661199；3.昆明偉牧得生物科技有限公司，云南昆明 650201）

豬瘟（classical swine fever，CSF）是由豬瘟病毒（classical swine fever Virus，CSFV）引起的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病[1]，各生長階段的豬均有感染的風(fēng)險，是制約國內(nèi)外養(yǎng)豬行業(yè)發(fā)展的重要因素[2]。藍耳病又稱豬繁殖與呼吸綜合征（porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）是由藍耳病病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV） 變 異 株（NVDC～JXA1 株）引起以體溫高熱不退、皮膚發(fā)紅、呼吸困難[3]、妊娠母豬繁殖障礙及各年齡階段豬呼吸道癥狀為主要特征的傳染病[4]?？谔阋撸╢oot and mouth disease，F(xiàn)MD）由口蹄疫病毒（foot and mouth disease，virus）引起的一種人畜共患急性、熱性、高度接觸性傳染病。以偶蹄動物口腔黏膜、四肢下端及乳房等處皮膚形成水皰和爛斑，幼齡動物引發(fā)心肌炎、急性死亡為特征[5]。FMD 有7 個血清型A、O、C、SATI、SATⅡ、SATⅢ和亞洲I 型，我國主要流行O 型[6]。我國強制免疫廣泛使用豬FMD 型滅活疫苗和豬FMD合成肽疫苗[7]。

CSF、PRRS、FMD 3 大傳染病都是生豬生產(chǎn)中危害較大的疫病，均被我國列為一類重大動物疫病。為全面掌握以上3種生豬傳染病的免疫抗體水平，及時預(yù)警預(yù)報，確保應(yīng)免密度達100%，免疫抗體陽性率達70%以上，減少疫病的發(fā)生和發(fā)展，蒙自市每年春、秋防結(jié)束后采集樣品對所轄的11 個鄉(xiāng)鎮(zhèn)進行監(jiān)測，2015～2019 年共采集樣品794 份對CSF、PRRS、FMD3種疫病的免疫效果進行調(diào)查分析。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

2015～2019年蒙自市11個鄉(xiāng)鎮(zhèn)共采集44個（場/次）規(guī)模養(yǎng)殖場、106 戶散養(yǎng)戶，具體采樣情況見表1。CSF、PRRS、FMD抗體檢測樣品分別為794份、787份、776份。

表1 2015～2019年蒙自市規(guī)?；瘓雠c散養(yǎng)戶樣品采集數(shù)Tab.1 Sample collection of large-scale farms and free-range farmers in Mengzi city from 2015 to 2019

1.2 免疫接種及疫苗種類

蒙自市轄區(qū)范圍內(nèi)分別每年3～4月為春防期，9～10月為秋防期，對豬開展年“三苗兩點”免疫方法。即CSF、PRRS 兩種疫苗混合注射一點，同時FMD 疫苗注射另一點。春、秋防疫結(jié)束后1 個月左右，對全市11 個鄉(xiāng)鎮(zhèn)進行隨機采血，分離血清進行抗體檢測。

CSF脾淋苗除2017、2018年部分購自楊凌綠方生物有限公司和廣東永順生物制藥有限公司外，其余均購自云南生物制藥有限公司；PRRS 疫苗2015～2016 年購自青島易邦生物工程有限公司，2017 年購自武漢中博生物有限公司，2018 年購自廣東永順生物制藥有限公司，2019 年購自云南生物制藥公司；FMD 疫苗除2019 年購自金宇保靈生物藥品有限公司和新疆天康生物技術(shù)股份有限公司外，其余均購自上海申聯(lián)生物制品有限公司。

1.3 檢測試劑及儀器

CSFV、PRRSV、FMDV ELISA抗體檢測試劑盒購自北京金諾百泰生物科技有限公司。電熱恒溫箱（型號：DHG-9240A）；TDL-40F離心機購自無錫市瑞江分析儀器有限公司；DWB-96G酶標儀購自廣州泰思儀器設(shè)備有限公司。

1.4 檢測方法

CSF、PRRS、FMD 分別依據(jù)的《豬瘟診斷技術(shù)》（GB/T 16551—2008）國家標準、農(nóng)醫(yī)發(fā)[2007]10 號、《口蹄疫診斷技術(shù)》（GB/T 18935—2003）國家標準進行檢測。群體免疫抗體合格率到達70%以上為免疫合格。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

對檢測結(jié)果用Excel 2016 和GraphPad Prism 8.0.1 進行數(shù)據(jù)匯總和描述性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 2015～2019年蒙自市CSF、PRRS、FMD免疫抗體結(jié)果（見圖1）

由圖1 可知，CSF、PRRS 抗體水平呈現(xiàn)先升高后降低再升高的趨勢，除2018年抗體免疫為不合格，其余年均合格；FMD抗體水平呈現(xiàn)先降低再升高的趨勢，除2019年免疫合格率為合格外，其余年份均為免疫不合格。

圖1 2015～2019年CSF、PRRS、FMD免疫抗體結(jié)果Fig.1 Immune antibody results of CSF,PRRS,FMD from 2015 to 2019

2.2 2015～2019年春防、秋防免疫抗體結(jié)果

2.2.1 2015～2019年春防、秋防免疫抗體結(jié)果（見圖2）

圖2 2015～2019年春防、秋防免疫抗體結(jié)果Fig.2 Results of spring and autumn anti-immune antibodies from 2015 to 2019

由圖2 可知，CSF 春防、秋防免疫合格；PRRS 的春防免疫合格，秋防為不合格；FMD 春防、秋防均為免疫不合格。

2.2.2 2015～2019年各年份春防免疫抗體結(jié)果（見表2）

表2 2015～2019年各年份春防免疫抗體結(jié)果Tab.2 Spring anti-immune antibody results of each year from 2016 to 2019

由表2可知，CSF春防免疫抗體陽性率除2018年不合格，其余年份均免疫合格；PRRS春防除2017年免疫合格，其余年份均不合格；FMD均為免疫合格。

2.2.3 2015～2019年各年份秋防免疫抗體結(jié)果（見表3）

由表3 可知，CSF 抗體陽性率除2016 年、2019 年為免疫合格，其余年份均不合格；PRRS除2019年免疫合格，其余年份均不合格；FMD 除2016 年、2019 年為免疫合格，其余年份均不合格。

表3 2015～2019年各年份秋防免疫抗體結(jié)果Tab.3 Anti-immune antibody results in autumn of each year from 2016 to 2019

2.3 規(guī)模豬場與散養(yǎng)戶免疫抗體結(jié)果

2.3.1 規(guī)?；瘓雠c散養(yǎng)戶CSF免疫抗體結(jié)果（見表4）

由表4 可知，規(guī)模豬場CSF 免疫均合格。散養(yǎng)戶CSF除2018年免疫不合格，其余年份均合格。結(jié)果表明，規(guī)模豬場CSF免疫效果比散養(yǎng)戶好。

2.3.2 規(guī)模豬場與散養(yǎng)戶PRRS免疫抗體結(jié)果（見表5）

表4 規(guī)模化場與散養(yǎng)戶CSF免疫抗體結(jié)果Tab.4 Results of CSF immune antibody in large-scale farms and free-range farmers

表5 規(guī)模豬場與散養(yǎng)戶PRRS免疫抗體結(jié)果Tab.5 PRRS immune antibody results of large-scale pig farms and free-range farmers

由表5可知，規(guī)模豬場PRRS除2018年免疫不合格，其余年份均合格；散養(yǎng)戶PRRS除2015、2017、2018年免疫不合格，其余年份均合格。結(jié)果表明，規(guī)模豬場PRRS免疫效果比散養(yǎng)戶好。

2.3.2 規(guī)模豬場與散養(yǎng)戶FMD免疫抗體結(jié)果（見表6）

由表6可知，規(guī)模豬場FMD除2016年免疫不合格，其余年份均為合格；散養(yǎng)戶5年FMD免疫抗體陽性率均不合格。結(jié)果表明，規(guī)模豬場FMD免疫效果比散養(yǎng)戶好。

表6 規(guī)模豬場與散養(yǎng)戶FMD免疫抗體結(jié)果Tab.6 FMD immune antibody results of large-scale pig farms and free-range farmers

2.4 2015～2019年蒙自市11個鄉(xiāng)鎮(zhèn)免疫抗體結(jié)果比較

2.4.1 2015～2019年蒙自市11個鄉(xiāng)鎮(zhèn)CSF、PRRS、FMD免疫抗體結(jié)果（見圖3）

由圖3 可知，CSF、PRRS、FMD 均免疫合格的鄉(xiāng)鎮(zhèn)有3 個，免疫均不合格的鄉(xiāng)鎮(zhèn)有2 個；CSF、PRRS 免疫合格的鄉(xiāng)鎮(zhèn)有4個；CSF、FMD免疫合格的鄉(xiāng)鎮(zhèn)有1個；僅有PRRS免疫合格的鄉(xiāng)鎮(zhèn)有1個。

2.4.2 11個鄉(xiāng)鎮(zhèn)CSF各年份疫免疫抗體結(jié)果（見表7）

由表7 可知，2015～2019 年，CSF 免疫抗體均合格的有文瀾鎮(zhèn)和草壩鎮(zhèn)；雨過鋪鎮(zhèn)（2015 年）、新安所鎮(zhèn)和芷村鎮(zhèn)（2018 年）、鳴鷲鎮(zhèn)和老寨鄉(xiāng)（2016 年）、冷泉鎮(zhèn)和西北勒鄉(xiāng)（2016、2018年）、水田鄉(xiāng)（2016年）免疫不合格，其余年份均合格。期路白鄉(xiāng)2015 年免疫不合格，2017、2018 年未檢，2016、2019年均合格。

圖3 2015-2019年蒙自市11個鄉(xiāng)鎮(zhèn)CSF、PRRS、FMD免疫抗體結(jié)果FIG.3 Immune antibody results of CSF,PRRS and FMD in 11 townships of Mengzi city from 2015 to 2019

表7 11個鄉(xiāng)鎮(zhèn)CSF各年份疫免疫抗體結(jié)果Tab.7 Immune antibody results of CSF in 11 townships in each year

2.4.3 11個鄉(xiāng)鎮(zhèn)豬PRRS各年份免疫抗體結(jié)果（見表8）

由表8 可知，2015～2019 年，PRRS 免疫抗體均合格的有文瀾鎮(zhèn)、雨過鋪鎮(zhèn)、老寨鄉(xiāng)、西北勒鄉(xiāng)；草壩鎮(zhèn)（2017年）、新安所鎮(zhèn)（2016、2018 年）、芷村鎮(zhèn)（2017、2018 年）、鳴鷲鎮(zhèn)（2019 年）、期路白鄉(xiāng)（2016 年）、冷泉鎮(zhèn)（2018 年）、水田鄉(xiāng)（2019年）免疫不合格，其余年份均合格。

2.4.4 11個鄉(xiāng)鎮(zhèn)FMD各年份免疫抗體結(jié)果（見表9）

由表9可知，2015～2019年，F(xiàn)MD免疫抗體均合格的是文瀾鎮(zhèn)，均不合格的是鳴鷲鎮(zhèn)；雨過鋪鎮(zhèn)（2016、2018 年）、芷村鎮(zhèn)（2016、2017 年）、老寨鄉(xiāng)（2018 年）、冷泉鎮(zhèn)（2017、2019 年）、水田鄉(xiāng)（2018、2019 年）免疫合格，其余年份均不合格；草壩鎮(zhèn)和新安所鎮(zhèn)（2019 年）、西北勒鄉(xiāng)（2016、2018年）免疫不合格，其余年份均為合格；期路白鄉(xiāng)除2015年免疫不合格，2017、2018年未檢測，其余年份均為合格。

表8 11個鄉(xiāng)鎮(zhèn)豬PRRS各年份免疫抗體結(jié)果Tab.8 Immune antibody results of PRRS in 11 townships in each year

表9 11個鄉(xiāng)鎮(zhèn)FMD各年份免疫抗體結(jié)果Tab.9 Immune antibody results of FMD in 11 townships in each year

3 討論

2015～2019年，CSF總體陽性率為80.86%，低于邵志勇等[8]、楊國麗等[9]分別對云南省楚雄州（91.09%）和遼寧省2012～2015年的監(jiān)測結(jié)果（99.63%）；高于賀會利等[10]2015～2017 年廣西規(guī)模豬場CSF 血清流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果（80.68%）。PRRS 總抗體陽性率為74.59%，低于周恒等[11]（80.7%）、楊國麗等[9]（99.83%）分別對宜昌市夷陵區(qū)2014～2018 年抗體檢測結(jié)果，與遼寧省2012～2015 年P(guān)RRS 免疫抗體監(jiān)測結(jié)果；高于方末昌等[12]（69.52%）對望江縣規(guī)模豬場檢測結(jié)果。FMD 免疫抗體陽性率為66.37%，低于楊國麗等[9]（99.07%）對遼寧省2012～2015 年FMD 抗體監(jiān)測結(jié)果。本次調(diào)查結(jié)果除FMD外，CSF、PRRS整體抗體陽性率均達到農(nóng)業(yè)農(nóng)村部標準（70%），表明CSF、PRRS 整體免疫效果較好，F(xiàn)MD免疫防控力度有待提高。

CSF、PRRS春防免疫水平高于秋防，F(xiàn)MD秋防免疫水平高于春防；CSF、PRRS、FMD 免疫抗體均合格的年份較少。分析可能是由于2017年取消強制免疫后，養(yǎng)殖戶的反而提高了防控意識；疫病流行的季節(jié)性，F(xiàn)MD 冬、春季多發(fā)，夏季平息等。

規(guī)模豬場與散養(yǎng)戶CSF 免疫抗體結(jié)果分別83.50%、79.18%與董骎等[13]對云南省楚雄部分地區(qū)CSF 血清學(xué)調(diào)查結(jié)果規(guī)模豬場（71.77%、）和散養(yǎng)戶（14.86%）免疫抗體結(jié)果相比較高。PRRS規(guī)模豬場與散養(yǎng)戶免疫抗體結(jié)果分別81.00%、70.71%，均高于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部標準（70%）；與陳興平等[14]對陜西中漢市規(guī)模豬場PRRS 血清學(xué)調(diào)查結(jié)果（69.7%）相比較高；與羅時霞等[15]對2015～2017 年花溪區(qū)豬藍耳病抗體檢測結(jié)果（87.82%）相比較低。CSF、PRRS、FMD 規(guī)模豬場抗體陽性率高于散養(yǎng)戶，與沈娜[16]2016 年證實規(guī)模戶養(yǎng)殖場區(qū)的CSF 抗體水平遠遠高于散養(yǎng)戶和高萬英等[17]2017 年發(fā)現(xiàn)規(guī)模豬場的CSF 抗體水平明顯高于散養(yǎng)戶等研究結(jié)果相似。各年份免疫結(jié)果相比較，2018年規(guī)模豬場與散養(yǎng)戶免疫抗體水平普遍較低。可能存在的原因為：散養(yǎng)戶疫病防控意識較差，自2017年秋防兩病退出國家強制免疫后[18]，疫苗實行收費養(yǎng)殖戶就不愿主動進行免疫；鄉(xiāng)村防疫員專業(yè)素養(yǎng)有關(guān)[19]。

該市11 個鄉(xiāng)鎮(zhèn)中CSF、PRRS、FMD 免疫均合格的有3個，均不合格的有2個，達到兩病合格的有4個，只有1個鄉(xiāng)鎮(zhèn)達到1個病免疫合格。各鄉(xiāng)鎮(zhèn)總體免疫效果較差，免疫合格較多的鄉(xiāng)鎮(zhèn)均處在蒙自市區(qū)周邊，相反免疫效果較差的鄉(xiāng)鎮(zhèn)多數(shù)處于偏遠地區(qū)。分析可能原因為：一是由于各鄉(xiāng)鎮(zhèn)發(fā)展差異性，養(yǎng)殖戶對疫病防控意識及相關(guān)政策的了解差異性造成的；二是由于各鄉(xiāng)鎮(zhèn)樣品采集數(shù)量不均勻造成的。

建議養(yǎng)殖戶應(yīng)根據(jù)本場往年的發(fā)病、周圍疫病的流行情況及抗體水平制訂一個科學(xué)合理的免疫程序，還要定期監(jiān)測豬群抗體水平[20]；加強豬的營養(yǎng)水平管理，做好內(nèi)、外環(huán)境的凈化工作，把好引種或補欄關(guān)；養(yǎng)殖場要盡量實施自繁自養(yǎng)、全進全出的飼養(yǎng)模式，避免引種帶來的疫病風(fēng)險[21]。豬場在引進種豬精液前，要嚴格地檢測種豬精液質(zhì)量，使豬的飼養(yǎng)繁殖更規(guī)范、更健康[22]。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明，蒙自市2015～2019年豬瘟、高致病性藍耳病總體免疫情況良好，春防秋防防控效果較理想，口蹄疫免疫效果相對較差，各年份、地區(qū)免疫水平具有差異性。本次研究結(jié)果為蒙自市CSF、PRRS、FMD防控提供參考數(shù)據(jù)。