枳椇果序軸水提取液對(duì)NASH的預(yù)防和治療研究

＊周敏 吳琪珍

（贛南衛(wèi)生健康職業(yè)學(xué)院 江西 341000）

引言

枳椇又名雞爪子、拐棗、萬子果、南枳椇，是鼠李科枳椇屬的高大落葉喬木。分布于安徽、江蘇、浙江、江西、福建、廣東、廣西、湖南、湖北等地。野生枳椇在江西廣泛分布于峰山、九連山、五指峰，吉安等贛南地區(qū)。

枳椇含有大量的葡萄糖和蘋果酸鈣，具有較強(qiáng)的利尿作用，能促進(jìn)乙醇的分解，顯著降低血液中的乙醇濃度，并能清除體內(nèi)由乙醇產(chǎn)生的自由基，防止過氧化氫酶的形成，從而減少酒精對(duì)肝組織的損害，避免因酒精中毒而導(dǎo)致的各種代謝異常。

中藥枳椇性平、入脾、胃經(jīng)，具有止渴功能，一直被世代醫(yī)家用于止渴解酒，適用于過度飲酒、醉不醒、口干煩渴等?！侗静菥V目》稱之為“甘平無毒，治頭風(fēng)，小腹拘急”。《唐本草》記載其“止渴除煩，潤(rùn)五臟，利大小便，去膈上熱，功用如蜜”?！兜崮媳静荨贩Q其“治一切左癱右瘓，風(fēng)濕麻木，能解酒毒”?！侗静菔斑z》記載“木蜜樹生南方，人呼白石木，枝、葉俱甜。嫩葉可生啖，味如蜜。老枝細(xì)破，煎汁成蜜，倍甜，止渴解煩也”?！兜崮媳静輬D說》記載“補(bǔ)中益氣。痰火閉結(jié)于胸中，用此可解”。煮粥服食之，對(duì)飲酒過量、口干煩渴者尤其適宜。

關(guān)于枳椇的藥用部位，古今文獻(xiàn)有不同的記載，如《廣東中藥》指出枳椇藥用部位為果實(shí)，《中藥材手冊(cè)》規(guī)定藥用部位為“果實(shí)及肉質(zhì)膨大的花序軸”，《陜西中草藥》提出枳椇藥用“果梗或種子”等。目前對(duì)枳椇抗乙醇作用的研究主要集中在種子部位，研究表明枳椇子乙酸乙酯提取物具有明顯的抗乙醇作用，但對(duì)其他部位抗乙醇作用機(jī)理的研究較少。

脂質(zhì)過氧化損傷導(dǎo)致的非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的發(fā)病機(jī)制尚未完全弄清。但是研究表明脂質(zhì)過氧化是納什均衡中最重要的因素。本研究旨在建立高脂飲食致NASH模型，檢測(cè)肝組織中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）的含量，探討脂質(zhì)過氧化損傷對(duì)NASH的影響，研究枳椇不同部位水提物對(duì)肝組織中SOD含量的影響。

1.實(shí)驗(yàn)分析材料

(1)實(shí)驗(yàn)分析動(dòng)物

60只雄性SD大鼠，清潔級(jí)，重200-250g，由浙江省實(shí)驗(yàn)分析動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)為SYXK（浙江）2005-0074，存放于浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)分析動(dòng)物中心。

(2)主要試劑

超氧化物歧化酶（SOD）試劑盒、丙二醛（MDA）試劑盒、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）試劑盒（ADL），購(gòu)自上海浙北生物科技有限公司。

(3)藥物制備

制備枳椇不同部位的水提取物：取自江西產(chǎn)枳椇不同部位壓平，放入小萃取器中，加水，萃取兩次，合并濾液，得到枳椇不同部位的水提取物0.2g/ml；制備聚烯磷脂酰膽堿和硫普羅寧的混合物：硫普羅寧片（凱西萊，批號(hào)：061207）和多烯磷脂酰膽堿片（易善復(fù)，批號(hào)：d8096，賽諾菲（北京）制藥有限公司。）制成粉末，加入蒸餾水，制備出含鈣石6mg和易善復(fù)13.68mg的混合溶液。

2.實(shí)驗(yàn)分析方法

(1)造模

用高脂飼料（100g/kg豬油+膽固醇）喂養(yǎng)正常大鼠12周，建立實(shí)驗(yàn)分析NASH模型。

(2)給藥及分組

將四十只SD大鼠隨機(jī)分為正常組、模型組、對(duì)照組、枳椇不同部位組。模型組每天給予10ml/kg蒸餾水，喂養(yǎng)2次；正常組每天給予標(biāo)準(zhǔn)飼料和10ml/kg蒸餾水，喂養(yǎng)2次；枳椇不同部位每天給予10ml/kg水提取物，然后服用2次。對(duì)照組給予多烯磷脂酰膽堿和硫普羅寧的混合物，每天10ml/kg，連續(xù)12周。

(3)觀察指標(biāo)

處死大鼠，取肝組織上清液和生理鹽水（1:9）勻漿?；瘜W(xué)比色法測(cè)定谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）的含量。采用He染色法對(duì)肝組織進(jìn)行染色，根據(jù)脂肪肝和酒精性肝?。ㄖ咀冃裕┰\斷標(biāo)準(zhǔn)觀察肝組織病理變化。

(4)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

資料用（±s）表示，用spss13.0軟件包處理，用單因素方差分析。

3.實(shí)驗(yàn)分析結(jié)果

(1)肝組織脂肪變性、炎癥程度積分

模型組肝組織脂肪變性及炎癥程度積分較正常組明顯增高，差異有顯著性意義（p&；1t；0.01），提示造模成功。不同部位枳椇果序軸組、對(duì)照組肝組織脂肪變性及炎癥程度積分較模型組明顯減輕，差異有顯著性意義（p&；1t；0.01）。不同部位枳椇果序組脂肪變性及炎癥程度與對(duì)照組比較，差異無顯著性意義（P＞0.05）。

(2)肝組織MDA、SOD、GSH-Px含量

模型組肝組織MDA較正常組明顯增高，SOD、GSH-Px較正常組明顯減低，差異有顯著性意義（p&；1t；0.01）；不同部位枳椇果序軸組、對(duì)照組肝組織MDA較模型組明顯減低，SOD、GSH-Px較模型組明顯增高，差異有顯著性意義（p&；1t；0.01）。不同部位枳椇果序軸組MDA、SOD、GSH-Px與對(duì)照組比較，差異無顯著性意義（P＞0.05）。

4.討論

目前對(duì)NASH的治療主要采用降脂藥、抗氧化劑、保肝藥和胰島素增敏劑等方法。由于病機(jī)復(fù)雜，診斷特異性差，療效不佳。

枳椇可以用作食物和藥物?！跋闾穑静莞事?，無毒”。解渴、清熱、滋潤(rùn)五臟、緩解便秘。也可以用來滋養(yǎng)和保護(hù)肝臟。結(jié)果表明，枳椇不同部位對(duì)脂肪肝有較好的防治效果。近年來，筆者采用不同部位的枳椇治療非酒精性脂肪性肝炎，取得了良好的療效。結(jié)果表明，脂質(zhì)過氧化在非酒精性脂肪性肝炎的發(fā)生發(fā)展中起重要作用，枳椇果序軸水提物對(duì)非酒精性脂肪性肝炎有良好的預(yù)防作用，其機(jī)制可能與阻斷脂質(zhì)過氧化鏈反應(yīng)、降低丙二醛生成、提高肝組織SOD水平和GSH-Px活性有關(guān)。

此外，在肝臟保護(hù)方面，也有不少學(xué)者進(jìn)行了深入的研究。劉秀玲等研究了枳椇子提取物對(duì)基質(zhì)金屬蛋白酶-13（MMP-13）和金屬蛋白酶組織抑制因子-1（TIMP-1）表達(dá)的影響。趙燕平等研究了枳椇子對(duì)高脂飲食誘導(dǎo)脂肪變性大鼠肝損傷的防治作用。宋娟觀察枳椇子對(duì)肝纖維化大鼠血脂脂質(zhì)過氧化的動(dòng)態(tài)影響。HASEK研究了長(zhǎng)期乙醇喂養(yǎng)大鼠脂多糖（LPS）誘發(fā)的肝損傷。